Neue Wege zur Bernsteinsäureproduktion mit der Hefe Saccharomyces cerevisiae:
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| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
Logos-Verl.
2010
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INHALTSVERZEICHNIS: 1. THEORETISCHER TEIL 1 EINLEITUNG 1 1.
"BIO-BASIERTE" BERNSTEINSAEUREPRODUKTION MIT DER HEFE SACCHAROMYCES
CEREVISIAE 1 2. ZENTRALMETABOLISMUS UND SUCCINATBIOSYNTHESE 4 3.
OXIDATIVE SUCCINATPRODUKTION IN SACCHAROMYCES CEREVISIAE 11 4.
KOMPARTIMENTIERUNG 15 5. GLUKOSE-REPRESSION 17 II. PRAKTISCHER TEIL 21
L.ZIEL- UND PROBLEMSTELLUNG 21 1.1. UNTERBRECHUNG DES CITRATZYKLUS 23
1.2. DEREGULATION DES GLYOXYLATZYKLUS 24 1.3. GLUKOSE-DEREPRESSION 24 2.
MATERIAL UND METHODEN 27 2.1. MATERIAL 27 2.1.1. PRIMER 27 2.1.2.
PLASMIDE 29 PFLAT-VEKTORSYSTEM (VEEN ET AL., 2003) 29 MOVE5 29 PSH47 29
PUG6 29 2.1.3. STAEMME 29 2.1.4. MEDIEN 30 2.2. METHODEN 30 2.2.1.
ANZUCHT 30 2.2.2. PUFFER 30 2.2.3. METHODEN DER DNA-ANALYSE 31
RESTRIKTION 31 AGAROSE-GELELEKTROPHORESE 31 GELELUTION 31
PHENOL-CHLOROFORM-EXTRAKTION 31 DNA-FAELLUNG 31 ALKALISCHE PHOSPHATASE 31
LIGATION 32 KOMPETENTE ZELLEN UND TRANSFORMATION VON E. COLI 32
ISOLATION VON PLASMID-DNA AUS E. COLI (MINIPREP) 32 ISOLATION VON
PLASMID-DNA (MIDIPREP) 33 ISOLATIO BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/1002361575 DIGITALISIERT DURCH 2.2.8. ANALYTIK 36
ETHANOL, GLYCERIN, ACETAT UND SPEZIFISCHE PRODUKTIONSRATEN 36
GLUKOSE-BESTIMMUNG 37 ZELLZAHLBESTIMMUNG 37 BESTIMMUNG DER
BIOTROCKENSUBSTANZ 37 INTRAZELLULAERE METABOLITENANALYSE 37 GC-MS
BESTIMMUNG ORGANISCHER DICARBOXYLSAEUREN UND AMINOSAEUREN 37 HPLC-ANALYSE
38 3. ERGEBNISSE 39 3.1. UNTERBRECHUNG DES CITRATZYKLUS 39 3.1.1
KONSTRUKTION DER DELETIONSSTAEMME 39 3.1.2 EVALUIERUNG DER
DELETIONSSTAEMME 41 3.1.2.1 FERMENTATIONSVERLAUF UND ORGANISCHE SAEUREN IM
KULTURUEBERSTAND 42 3.1.2.2 WACHSTUMSPARAMETER DER DELETIONSSTAEMME UND
GLUTAMAT-AUXOTROPHIE 46 3.1.2.3 BERNSTEINSAEURE: INTRAZELLULAER
AKKUMULIERT VS. AUSGESCHLEUST 48 3.1.3 REPRIMIERBARES PROMOTORSYSTEM 49
3.2. DEREGULATION DES GLYOXYLATZYKLUS 56 3.2.1 KONSTRUKTION DER STAEMME
MIT UEBEREXPRESSIONEN VON GENEN DES GLYOXYLATZYKLUS IM
DELETIONSHINTERGRUND ASDH2ASDHLAIDHLAIDPL 57 3.2.2 EVALUIERUNG DER
STAEMME MIT UEBEREXPRESSIONEN VON GENEN DES GLYOXYLATZYKLUS IM
DELETIONSHINTERGRUND ASDH2ASDHLAIDHIAIDPL 58 3.2.3 KONSTRUKTION DER
STAEMME MIT UEBEREXPRESSIONEN VON GENEN DES GLYOXYLATZYKLUS IM
DELETIONSHINTERGRUND ASDH2ASDHLAIDHL 62 3.2.4 EVALUIERUNG DER STAEMME MIT
UEBEREXPRESSIONEN VON GENEN DES GLYOXYLATZYKLUS IM DELETIONSHINTERGRUND
ASDHIASDHLAIDHL 63 3.3. GLUKOSE-DEREPRESSION 66 3.3. |
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