Analyse Testican-defizienter Mäuse:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2009
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
DIE
EXTRAZELLULAERE
MATRIX
IM
GEHIRN
.
1
1.2
PROTEOGLYKANE
.
1
1.2.1
VORKOMMEN
UND
FUNKTIONEN
VON
PROTEOGLYKANEN
IM
GEHIRN
.
2
1.3
ZENTRALE
KOERPERGEWICHTSREGULIERUNG
.
4
1.3.1
SYNDECANE
SIND
AN
DER
KOERPERGEWICHTSREGULATION
BETEILIGT
.
7
1.4
TESTICANE
.
8
1.4.1
AUFBAU
.
8
1.4.2
EXPRESSIONSMUSTER
.
10
1.4.3
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
FUNKTION
DURCHGEFUEHRT
IN
VITRO
.
12
1.5
TESTICAN-DEFIZIENTE
MAEUSE
.
13
1.6
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
13
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
15
2.1
MATERIAL
.
15
2.1.1
PUFFER
.
15
2.1.2
VERBRAUCHSMATERIAL
.
15
2.1.3
ANTIKOERPER
.
16
2.1.4
OLIGONUKLEOTIDE
.
17
2.2
METHODEN
.
18
2.2.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
18
2.2.2.1
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
AUS
SCHWANZSPITZEN-BIOPSIEN
.
18
2.2.2.2
ISOLIERUNG
VON
GESAMT-RNA
AUS
GEWEBE
.
18
2.2.2.3
ISOLIERUNG
VON
MRNA
AUS
GESAMT-RNA
.
19
2.2.2.4
DENATURIERENDE
GELELEKTROPHORESE
.
19
2.2.2.5
NORTHERN
BLOT
UND
HYBRIDISIERUNG
.
19
2.2.2.6
REVERSE
TRANSKRIPTION
.
20
2.2.2.7
POLYMERASE
KETTEN
REAKTION
(PCR)
.
20
2.2.2.8
REAL-TIME-PCR
.
22
2.2.1.9
AUFTRENNUNG
VON
DNA
DURCH
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.
22
2.2.2
PROTEINBIOCHEMISCHE
METHODEN
.
23
2.2.2.1
PROTEINEXTRAKTE
AUS
GEWEBEN
.
23
2.2.2.1
IMMUNPRAEZIPITATION
.
23
2.2.2.3
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
.
24
2.2.2.4
WESTERN
BLOT
ANALYSE
.
24
2.2.2.5
ELISA
.
25
2.2.3
HISTOLOGISCHE
METHODEN
.
25
2.2.3.1
HERSTELLUNG
VON
GEFRIERSCHNITTEN
.
25
2.2.3.1
HERSTELLUNG
VON
PARAFFINSCHNITTEN
.
25
2.2.3.3
HAEMATOXYLIN
UND
EOSIN
(H&E)
UND
NISSL-FAERBUNG
.
26
2.2.3.4
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN
.
27
2.2.3.5
ALZIAN-BLAU
ALIZARIN
ROT
FAERBUNG
.
28
2.2.4
MAUSEXPERIMENTE
.
29
2.2.4.1
TIERHALTUNG
.
29
2.2.4.2
MAEUSE
.
29
2.2.4.3
KOERPERFETTBESTIMMUNG
UND
KOERPERLAENGENBESTIMMUNG
.
29
2.2.4.4
GEWINNUNG
VON
BLUTPROBEN
UND
BLUTZUCKERMESSUNG
.
30
2.2.4.5
MESSUNG
DER
NAHRUNGSAUFNAHME
UND
INDIREKTE
KALORIMETRIE
.
30
2.2.4.7
GLUKOSETOLERANZTEST
.
30
2.2.4.8
INSULINTOLERANZTEST
.
30
2.2.4.9
STATISTISCHE
ANALYSE
.
31
3.
ERGEBNISSE
.
32
3.1
GENERIERUNG
DER
TESTICAN-1/-2/-3
KNOCKOUT
MAUSLINIE
.
32
3.2
ANALYSE
DER
RNA
UND
PROTEINMENGEN
ANDERER
BM-40
FAMILIENMITGLIEDER
IN
.
WILDTYP
UND
T123-KNOCKOUT
MAEUSEN
.
34
3.3
MORPHOLOGIE
DER
TESTICAN-1/-2/-3-KNOCKOUT-MAEUSE
.
36
3.4
METABOLISCHE
ANALYSE
TESTICAN-1/-2/-3
DEFIZIENTER
MAEUSE
.
38
3.4.1
VORUNTERSUCHUNGEN
.
39
3.4.2
ERSTE
METABOLISCHE
VERSUCHSREIHE
.
41
3.5
ZWEITE
METABOLISCHE
ANALYSE
DER
TESTICAN-1/-2/-3-KNOCKOUT-MAEUSE
.49
3.5.1
WEIBCHEN
MIT
STANDARDDIAET
.
49
3.5.2
MAENNCHEN
MIT
STANDARDDIAET
.
52
3.5.3
MAEUSE
MIT
FETTREICHER
DIAET
.
56
3.6
METABOLISCHE
ANALYSE
TESTICAN-2
DEFIZIENTER
MAEUSE
.
62
3.7
TESTICANE
IM
HYPOTHALAMUS
.
70
4.
DISKUSSION
.
72
4.1
TESTICAN-1/TESTICAN-2/TESTICAN-3
KNOCKOUT
MAEUSE
BILDEN
KEINE
.
TESTICAN-PROTEINE
.
72
4.2
T123-DEFIZIENTE
MAEUSE
ZEIGTEN
KEINE
UNTERSCHIEDE
IN
DER
MORPHOLOGIE
DER
UNTERSUCHTEN
ORGANE
73
4.3
DIE
EXPRESSION
DER
BM-40
FAMILIENMITGLIEDER
IST
IN
T123-KNOCKOUT-MAEUSEN
UNVERAENDERT
.
78
4.4
T123-DEFIZIENTE
MAEUSE
SIND
SCHWERER
ALS
DIE
WILDTYP-TIERE
.
79
4.4.1
WIE
KOENNTEN
DIE
TESTICANE
DEN
ENERGIEVERBRAUCH
UNABHAENGIG
VON
DER
NAHRUNGSAUFNAHME
REGULIEREN?
.
82
4.5
TESTICAN-2
DEFIZIENTE
MAEUSE
SIND
LEICHTER
ALS
DIE
WILDTYP-TIERE
.
84
4.5.1
TESTICAN-2
DEFIZIENTE
MAENNCHEN
WEISEN
ANZEICHEN
EINES
HYPOKORTISOLISMUS
AUF.
.85
4.5.2
WIE
KOENNTE
TESTICAN-2
DEN
ENERGIEVERBRAUCH
REGULIEREN?
.
86
4.6
WIE
KOENNTE
DER
UNTERSCHIEDLICHE
PHAENOTYP
DER
T123-KNOCKOUT
UND
TESTICAN-2
DEFIZIENTEN
MAEUSE
ERKLAERT
WERDEN?
.
87
4.7
AUSBLICK
.
89
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
90
6.
ABSTRACT
.
91
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
92
8.
ABBILDUNGS
UND
TABELLENVERZEICHNIS
.
101
9.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
103
10.
ANHANG
.
106
9.1
ANHANG
MORPHOLOGIE
.
106
9.2
ANHANG
ZUR
METABOLISCHE
ANALYSE
.
118
9.2.1
ANHANG
ZUR
METABOLISCHEN
ANALYSE
T123
DEFIZIENTER
MAEUSE
.
118
9.2.2
ANHANG
ZUR
METABOLISCHEN
ANALYSE
TESTICAN-2
DEFIZIENTER-MAEUSE
.
120
ERKLAERUNG
.
122
DANKSAGUNG
.
123
LEBENSLAUF
.
124 |
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