Einfluss proinflammatorischer Zytokine auf die Ab-Sekretion mononukleärer Phagozyten:
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| adam_text | Titel: Einfluss proinflammatorischer Zytokine auf die Ab-Sekretion mononukleärer Phagozyten
Autor: Brandner, Sebastian
Jahr: 2009
Zusammenfassung_____________________________1
1 Einleitung_________________________________________5
1.1 Die Alzheimer-Krankheit_______________________________________5
1.1.1 Epidemiologie, Klinik und Risikofaktoren der Alzheimer-Krankheit___5
1.1.2 Histopathologie der Alzheimer-Krankheit_________________________7
1.1.3 ß-Amyloid-Vorläuferprotein (ßAPP) und ß-Amyloid (Aß)___________10
1.1.4 Die Rolle inflammatorischer Mediatoren bei der Alzheimer-Krankheit 12
1.1.4.1 Aktivierte Mikroglia in Plaque-Umgebung_________________________13
1.1.4.2 Transmigration, Transdifferenzierung von Monozyten_______________15
1.1.4.3 Zytokine__________________________________________________16
1.2 Zielsetzung__________________________________________________21
2 Material und Methoden_____________________________22
2.1 Geräte und Materialien_______________________________________22
2.2 Substanzen, Chemikalien________________________________24
2.3 Antikörper__________________________________________________26
2.4 Zellkulturmedien und Stammlösungen_________________________27
2.4.1 Medien und Puffer für die Zellkultur____________________________27
2.4.2 Stammlösungen und Puffer für Immunopräzipitation______________27
2.4.3 Stammlösungen und Puffer für SDS-PAGE und Western-Blot______29
2.5 Methoden___________________________________________________ 34
2.5.1 Zellkultur___________________________________________________34
2.5.1.1 Isolation von humanen Monozyten aus peripher-venösem Blut________34
2.5.1.2 Kultivation von humanen Monozyten/Makrophagen_________________36
2.5.1.3 Durchflusszytometrische Differenzierungsbestimmung von Makrophagen 37
2.5.1.4 Versuche mit humanen Monozyten/Makrophagen__________________38
2.5.1.5 Präparation von Hühnchen-Mikroglia aus Hühnerembryonen_________39
2.5.1.6 Kultivation von Hühnchen-Mikroglia_____________________________39
2.5.2 Proteinbiochemie____________________________________________ 40
2.5.2.1 immunopräzipitaton der Aß-Peptide aus Zellkulturüberständen________40
2.5.2.2 SDS-PAGE und Western-Blot__________________________________ 41
3 Ergebnisse______________________________________43
3.1 Ergebnisse der Versuche mit Monozytenkulturen______________43
3.1.1 Aß-Sekretion nach primär serumfreier Kultivation von Monozyten __43
3.1.2 Aß-Sekretion von Monozyten nach primär serumhaltiger Kultivation _ 46
3.1.3 Einfluss von GM-CSF auf die Aß-Sekretion von Monozyten_______48
3.1.4 Einfluss von IL-6 auf die Aß-Sekretion von Monozyten___________51
3.1.5 TNF-a und IL-1 ß haben keinen Einfluss auf die Aß-Sekretion von
Monozyten________________________________________________52
3.2 Ergebnisse der Versuche mit Makrophagenkulturen___________54
3.2.1 Einfluss von IL-6 auf die Aß-Sekretion von Makrophagen_________54
3.2.2 TNF-a und IL-1ß haben keinen Einfluss auf die Aß-Sekretion von
Makrophagen _____________________________________________56
3.3 Einfluss von IL-6 auf Hühnchen-Mikroglia___________________58
4 Diskussion_______________________________________60
4.1 Überblick über die Ergebnisse_____________________________60
4.2 GM-CSF induziert die Aß-Sekretion von Monozyten____________61
4.3 IL-6 induziert die Aß-Sekretion von Monozyten/Makrophagen und
Mikroglia______________________________________________62
4.4 IL-1ß und TNF-a haben keine Wirkung auf die Aß-Sekretion von
Monozyten/Makrophagen____________________________________ 64
4.5 Schlussfolgerungen_____________________________________68
Literaturverzeichnis_________________________________69
Abkürzungsverzeichnis______________________________88
Danksagung_______________________________________91
Lebenslauf___________________ ________92
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