Untersuchungen zur Regulation der Expression angiogener Faktoren in choroidalen Endothelzellen und retinalen Pigmentepithelzellen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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2008
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| adam_text | Titel: Untersuchungen zur Regulation der Expression angiogener Faktoren in choroidalen Endothelzellen und r
Autor: Kauder, Corinna
Jahr: 2008
Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
1.1 Neovaskularisierung 1
1.1.1 Allgemeines 1
1.1.2 Angiogenese-relevante Faktoren 4
1.1.3 Proliferative diabetische Retinopathie (PDR) 14
1.1.4 Altersabhängige Makuladegeneration (AMD) 18
1.2 Matrixmetalloproteinasen (MMPs) 24
1.2.1 Allgemeines 24
1.2.2 Retinales Pigmentepithel 30
1.2.3 Choroidales Endothel 32
1.2.4 Rolle der MMPs in okulären Erkrankungen 33
1.3 Aufgabenstellung 35
2. Material und Methoden 36
2.1 Materialien 36
2.2 Zellbiologische Methoden 38
2.2.1 Zellisolierung 38
2.2.2 Kultivierung und Stimulation der Zellen 40
2.3 Molekularbiologische Methoden 41
2.3.1 RNA-Isolierung 41
2.3.2 Photometrische Bestimmung des RNA-Gehalts 42
2.3.3 Amplifikation von RNA (RT-PCR) 42
2.3.4 Darstellung der PCR-Produkte mittels Elektrophorese 46
2.3.5 Quantifizierung der Gelbanden 48
2.3.6 Enzyme-Iinked immunosorbent assay (ELISA) 48
3. Ergebnisse 50
3.1 Expression ausgewählter, potentiell angioregulatorischer Moleküle in
choroidalen Endothelzellen und retinalen Pigmentepithelzellen 51
3.2 Regulation von MMP-2 in bovinen choroidalen Endothelzellen 52
3.3 Regulation von MMP-2 in humanen retinalen Pigmentepithelzellen 54
3.4 Regulation von MMP-3 in humanen retinalen Pigmentepithelzellen 58
3.5 Regulation von MMP-12 in humanen retinalen Pigmentepithelzellen 59
3.6 Regulation von TIMP-1 in humanen retinalen Pigmentepithelzellen 61
4. Diskussion 63
5. Zusammenfassung 68
6. Abkürzungsverzeichnis 70
7. Tabellen- und Abbildungsverzeichnis 72
8. Literaturverzeichnis 74
9. Erklärung über die eigenständige Abfassung der Arbeit 90
10. Lebenslauf 91
11. Danksagung 92
7. Tabellen- und Abbildungsverzeichnis
Tabellen:
1. Aufstellung ausgewählter MMPs, deren Bezeichnungen und jeweiligen
Substrate 25
2. Verwendete Materialien 36
3. PCR-Reaktionsansatzfur20ul 46
4. PCR-Programm 46
Abbildungen:
1. Schematische Darstellung der Angiogenese mittels Aussprassung 4
2. Schematische Darstellung eines Querschnitts durch eine RPE-Zelle 30
3. Schematische Darstellung der Amplifikation von DNA in der PCR 45
4. Sekretion von MMP-2 durch humane RPE-Zellen nach Stimulierung mit
unterschiedlichen Konzentrationen an AGEs für 24 Stunden 52
5 Modulation der mRNA-Expression von MMP-2 durch TGF-ß, AGEs und
TNF-a in bovinen CECs 53
6. Modulation der mRNA-Expression von MMP-2 durch TGF-ß, AGEs und
TNF-a in bovinen CECs, Quantifizierung der Gelbanden (n=4) 54
7. Modulation der mRNA-Expression von MMP-2 durch AGEs, TNF-a,
TGF-ß und INF-v in humanen RPE-Zellen 55
8. Modulation der mRNA-Expression von MMP-2 durch AGEs, TNF-a,
TGF-ß und INF-y in humanen RPE-Zellen, Quantifizierung der
Gelbanden (n=6) 56
9. Modulation der mRNA-Expression von MMP-2 durch TGF-ß in humanen
RPE-Zellen 57
10. Modulation der mRNA-Expression von MMP-2 durch TGF-ß in humanen
RPE-Zellen, Quantifizierung der Gelbanden (n=3) 57
11. Modulation der mRNA-Expression von MMP-3 durch AGEs in humanen
RPE-Zellen 58
12. Modulation der mRNA-Expression von MMP-3 durch AGEs in humanen
RPE-Zellen, Quantifizierung der Gelbanden (n=6) 59
72
13. Modulation der mRNA-Expression von MMP-12 durch AGEs, TNF-a,
TGF-ß und INF-v in humanen RPE-Zellen 60
14. Modulation der mRNA-Expression von MMP-12 durch AGEs, TNF-a,
TGF-ß und INF-y in humanen RPE-Zellen, Quantifizierung der
Gelbanden (n=6) 60
15. Modulation der mRNA-Expression von TIMP-1 durch AGEs in humanen
RPE-Zellen 61
16. Modulation der mRNA-Expression von TIMP-1 durch AGEs in humanen
RPE-Zellen, Quantifizierung der Gelbanden (n=6) 62
73
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