Einfluss von Eimeria bovis auf die Apoptosefähigkeit der Wirtszelle in vitro:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Giessen
VVB Laufersweiler
2008
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Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schriftenreihe: | Edition scientifique
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Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | 125 S. Ill., graph. Darst. 21 cm, 350 gr. |
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adam_text | AUS DEM INSTITUT FUER PARASITOLOGIE DER JUSTUS-LIEBIG-UNIVERSITAET GIESSEN
BETREUER: PROF. DR. H. ZAHNER EINFLUSS VON EIMERIA BOVIS AUF DIE
APOPTOSEFAEHIGKEIT DER WIRTSZEILE IN VITRO INAUGURAL-DISSERTATION ZUR
ERLANGUNG DES GRADES EINES DR. MED. VET. BEIM FACHBEREICH
VETERINAERMEDIZIN DER JUSTUS-LIEBIG-UNIVERSITAET GIESSEN EINGEREICHT VON
MIRJAM LANG TIERAERZTIN AUS WUERZBURG GIESSEN 2008 INHALTSVERZEICHNIS 1
EINLEITUNG 1 2 LITERATURUEBERSICHT 2 2.1 EIMERIA BOVIS 2 2.1.1 VORKOMMEN
UND BEDEUTUNG VON EIMERIA BOVIS 2 2.1.2 ENTWICKLUNGSZYKLUS VON EIMERIA
BOVIS 2 2.1.3 GEEIGNETE WIRTSZELLLINIEN ZUR ETABLIERUNG EINES IN
VJ O-SYSTEMS FUER E. BOVIS 3 2.1.4 BISHERIGE IN VIFT-O-UNTERSUCHUNGEN ZUR
INTERAKTION VON EIMERIA BOVIS- SPOROZOITEN MIT IHREN WIRTSZELLEN 3 2.2
APOPTOSE 6 2.2.1 APOPTOSE UND NEKROSE 6 2.2.2 DIE SIGNALKASKADEN DER
APOPTOSE 9 2.2.3 CASPASEN UND IHRE FUNKTION 13 2.2.4 REGULATOREN DER
APOPTOSE 14 2.2.4.1 IAP-FAMILIE 14 2.2.4.2 C-FLIP 15 2.2.4.3
BCL-2-FAMILIE 16 2.2.4.4 HITZESCHOCK PROTEINE (HSP) 19 2.2.4.5
POLY-ADP-RIBOSE-POLYMERASE(PARP) 22 2.2.4.6 P53 23 2.2.4.7 NFKB UND IKB
23 2.3 MODULATION DER APOPTOSE DURCH INTRAZELLULAERE PARASITEN 23 2.3.1
EIMERIA TENELLA UND EIMERIA NECATRIX 24 2.3.2 TOXOPLASMA GONDII 24 2.3.3
CRYPTOSPORIDIUM PARVUM 25 2.3.4 PLASMODIUM SPP 27 2.3.5 THEILERIA PARVUM
28 2.3.6 TRYPANOSOMA CRUZI 29 2.3.7 LEISHMANIA SPP 30 2.3.8 NOSEMA
ALGERAE 31 3 MATERIAL UND METHODEN 33 3.1 PARASIT EIMERIA BOVIS 33 3.2
VERSUCHSTIERE 33 3.2.1 KAELBER 33 INHALTSVERZEICHNIS 3.2.2 INFEKTION VON
KAELBERN MIT EIMERIA BOVIS- OOZYSTEN 33 3.2.3 GEWINNUNG UND SPORULATION
DER EIMERIA BOVIS- OOZYSTEN 34 3.2.4 GEWINNUNG VON EIMERIA BOVIS-
SPOROZOITE N 35 3.3 WIRTSZELLLINIEN 36 3.3.1 BOVINE FETALE
GASTROINTESTINALZELLEN (BFGC) 36 3.3.2 AFRICAN GREEN MONKEY KIDNEY CELLS
(VERO) ..38. 3.3.3 BOVINE UMBILICAL VEIN CELLS (BUVEC) 38 3.3.4
INFEKTION DER WIRTSZELLEN 39 3.4 APOPTOSEINDUKTOREN.. 39 3.4.1
ACTINOMYCIN D 39 3.4.2 CYTOCHALASIN B 40 3.4.3 COLCHICIN 40 3.4.4
BESTIMMUNG DER NOTWENDIGEN KONZENTRATIONEN DER APOPTOSEINDUKTOREN FUER
BFGC 40 3.4.5 BESTIMMUNG DER NOTWENDIGEN KONZENTRATIONEN DER
APOPTOSEINDUKTOREN FUER VERO-ZELLEN 41 3.5 LICHTMIKROSKOPISCHE
DARSTELLUNG DER APOPTOSE 42 3.6 APOPTOSENACHWEIS MITTELS TUNEL-ASSAY 43
3.7 ANNEXIN V-TEST 44 3.7.1 BESTIMMUNG ANNEXINV POSITIVER ZELLEN 44
3.7.2 VITALFAERBUNG MIT TRYPANBLAU 46 3.8 CASPASE 3-NACHWEIS MITTELS
PLUOROSCAN 47 3.9 CYTOCHROM-C-NACHWEIS MITTELS ELISA 48 3.10
KONFOKALMIKROSKOPIE..... 50 3.10.1 VORBEREITUNG DER PRAEPARATE 50 3.10.2
FAERBUNG DER PRAEPARATE 51 3.10.3 MIKROSKOPIE 52 3.10.4 QUANTIFIZIERUNG
DER FLUORESZENZINTENSITAET 52 3.11 WESTERN BLOT UND IMMUNFAERBUNG 53
3.11.1 VORBEREITUNG DES ZELLMATERIALS 53 3.11.2 SDS-PAGE UND
PROTEINTRANSFER (WESTERN BLOT) 54 3.11.3 BLOCKIEREN DER MEMBRAN UND
INKUBATION MIT ANTIKOERPERN UND VISUALISIERUNG DER REAKTION 57
INHALTSVERZEICHNIS 4 ERGEBNISSE 59 4.1 IN VITRO ENTWICKLUNG VON E. BOVIS
UND EINFLUSS DES PARASITEN AUF DIE UEBERLEBENSFAEHIGKEIT DER WIRTSZELLE 59
4.2 INDUKTION DER APOPTOSE BEI NICHT INFIZIERTEN BFGC UND VERO-ZELLEN 63
4.3 EINFLUSS VON E. BOVIS AUF DIE APOPTOSEFAEHIGKEIT VON BFGZ UND
VERO-ZELLEN ..68 4.4 NACHWEIS DER APOPTOSEINHIBITION DURCH E.
AOVIS-SPOROZOITEN MITTELS TUNEL- ASSAY 71 4.5 VERSUCH DER
QUANTIFIZIERUNG DER APOPTOSE ANHAND DER ANNEXIN V-EXPRESSION. 74 4.6
VERSUCH DER QUANTIFIZIERUNG DER APOPTOSE ANHAND DER CASPASE
3-AKTIVIERUNG MITTELS FLUOROSCAN 80 4.7 VERSUCH DER QUANTIFIZIERUNG DER
APOPTOSE DURCH DEN NACHWEIS VON CYTOCHROM-C ALS INDIKATOR FUER DEN
MITOCHONDRIALEN WEG DER APOPTOSE (UNTERSUCHUNGEN MITTELS ELISA) 83 4.8
EINFLUSS VON E. BOVIS AUF APOPTOSEWEGE 84 4.8.1 NACHWEIS VON C-IAPL 85
4.8.1.1 NACHWEIS VON C-IAPL MITTELS KONFOKALMIKROSKOPISCHER
UNTERSUCHUNGEN.. 85 4.8.1.2 NACHWEIS VON C-IAPL IM IMMUNOBLOT 91 4.8.2
NACHWEIS VON C-FLIP 92 4.8.2.1 NACHWEIS VON C-FLIP MITTELS
KONFOKALMIKROSKOPISCHER UNTERSUCHUNGEN..92 4.8.2.2 NACHWEIS VON C-FLP IM
IMMUNOBLOT 96 4.8.3 NACHWEIS VON BCL-2 97 5 DISKUSSION 98 6
ZUSAMMENFASSUNG 108 7 SUMMARY 110 8 LITERATURUEBERSICHT 112 9 DANKSAGUNG
124
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