In-vitro-Untersuchungen des Effektes von Peritonealdialyselösungen auf peritoneale Mesothelzellen und Fibroblasten:
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| adam_text | Titel: In-vitro-Untersuchungen des Effektes von Peritonealdialyselösungen auf peritoneale Mesothelzellen u
Autor: Finn, André Alexander
Jahr: 2008
Inhalt
Abkürzungsverzeichnis S. 6-7
Abbildungsverzeichnis S. 8-9
1 Einleitung S. 10-27
1.1 Terminale Niereninsuffizienz S. 10-11
1.2 Nierenersatzverfahren S. 11-13
1.3 Struktur des Peritoneums S. 14-15
1.4 Veränderungen des Peritoneums bei CAPD S. 15-16
1.5 CADP-assoziierte Komplikationen S. 16-17
1.6 Abwehrmechanismen des Peritoneums S. 17-21
1.7 Peritonealdialyselösungen S. 21-26
1.7.1 Osmotische Agenzien S. 21 -22
1.7.2 Puffer S. 22-24
1.7.3Glukosedegradationsprodukte und Advanced Glycation S. 24-26
Endproducts
1.8 Einflüsse der konventionellen laktatgepufferten CAPD- S. 26-28
Lösungen auf die verschiedenen Zellpopulationen
2 Fragestellung S. 29
3 Methoden S. 30-38
3.1.1 Peritoneale Zellkultur S. 30-31
3.1.2 Immunfluoreszenz von HPMC und HPFB S. 31 -32
3.2 Inkubationsexperimente in Peritonealdialyselösungen S. 33-35
3.2.1 Zusammensetzung der Peritonealdialyselösungen S. 33
3.2.2 Dose-response-Experimente S. 33-34
3.2.3 Präinkubations-Erholungs-Experimente S. 34
3.2.4 Chronische Inkubationsexperimente mit HPMC S. 34-35
3.3 Quantitative lnterleukin-6-Bestimmung S. 35-37
3.4 MTTAssay S. 37-38
3.5 Proteinbestimmung S. 38
3
3.6 Statistische Analysen S. 38
4 Ergebnisse S. 39-53
4.1 Lichtmikroskopische Darstellung von humanen peritonealen S. 39
Mesothelzellen und humanen peritonealen Fibroblasten
4.2 Zellproteinbestimmung von HPFB und HPMC pro Loch einer S. 40
24-Loch-lnkubationsplatte
4.3 Basale lnterleukin-6-Freisetzung von HPMC nach Inkubation in S. 40-41
verschiedenen PDL
4.4 Basale lnterleukin-6-Freisetzung von HPFB nach Inkubation in S. 41-42
laktat- oder bikarbonatgepufferten PDL unterschiedlicher
Konzentration
4.5 lnterleukin-6-Sekretion von unstimulierten HPFB nach Inkubation S. 42-43
in neutralisierten laktatgepufferten PDL
4.6 lnterleukin-6-Freisetzung von HPMC nach Inkubationen in S. 43-44
laktat- oder bikarbonatgepufferten PDL unterschiedlicher
Konzentration und IL-1ß-Stimulation
4.7 lnterleukin-6-Freisetzung aus HPFB nach Inkubation in laktat- S. 44-45
oder bikarbonatgepufferten PDL unterschiedlicher Konzentration
und IL-1ß-Stimulation
4.8 lnterleukin-6-Sekretion von stimulierten HPFB nach Inkubation S. 46
in neutralisierten PDL
4.9 Vitalität von HPMC nach Inkubation in laktat- oder S. 47
bikarbonatgepufferten PDL mit 1,5% Glukose
4.10 Vitalität von HPFB nach 24 Stunden Inkubation in laktat- oder S. 47-48
bikarbonatgepufferten PDL
4.11 lnterleukin-6-Freisetzung aus HPFB nach Präinkubations- S. 48-49
experimenten mit laktat- oder bikarbonatgepufferten PDL
4.12 lnterleukin-6-Freisetzung aus humanen peritonealen S. 49-50
Mesothelzellen nach Präinkubationsexperimenten mit laktat-
oder bikarbonatgepufferten PDL
4.13 Viabilität von HPMC nach Präinkubation in laktat- oder S. 51
bikarbonatgepufferten PDL mit 1,5% Glukose
4.14 lnterleukin-6-Freisetzung von HPMC nach Inkubation in S. 51-52
4
Glukose oder Glukosedegradationsprodukten im
chronischen Modell
4.15 Zellvitalität von HPMC nach chronischer Inkubation in GDP S. 53
oder Glukose
5 Diskussion S. 54-69
5.1 Kritische Beurteilung der angewendeten Methoden S. 54-55
5.2 Diskussion der Ergebnisse S. 55-69
5.2.1 Diskussion der Ergebnisse aus den Inkubations- S. 55-61
experimenten
5.2.2Diskussion der Präinkubationsexperimente S. 61-69
6 Zusammenfassung S. 70
7 Literaturverzeichnis S. 71-82
8 Erklärung s- 83
9 Lebenslauf s-84 85
10 Danksagung s-86
5
Abbildungsverzeichnis
Abbildung Nr.1 Abwehrmechanismen des Peritoneums S. 21
Abbildung Nr.2 Lichtmikroskopische Darstellung von humanen S. 38
peritonealen Mesothelzellen und humanen perito-
nealen Fibroblasten
Abbildung Nr.3 Basale lnterleukin-6-Freisetzung von HPMC nach S. 40
Inkubation in verschiedenen CAPD-Lösungen
Abbildung Nr.4 Basale lnterleukin-6-Freisetzung von HPFB nach S. 41
Inkubation in verschiedenen CAPD-Lösungen
Abbildung Nr.5 lnterleukin-6-Sekretion von unstimulierten HPFB S. 42
nach Inkubation in neutralisierten laktatgepufferten
CAPD-Lösungen
Abbildung Nr.6 lnterleukin-6-Freisetzung von HPMC nach S. 43
Koinkubationen in verschiedenen CAPD-
Lösungen und IL-1ß in verschiedenen Verdünnungen
Abbildung Nr.7 lnterleukin-6-Freisetzung aus HPFB nach Inkubation S. 44
in L-PDL und B-PDL unterschiedlicher Konzentrationen
und IL-1ß-Stimulation
Abbildung Nr.8 lnterleukin-6 Sekretion von stimulierten HPFB nach S. 45
Inkubation in neutralisierten laktatgepufferten CAPD-
Lösungen
Abbildung Nr.9 Vitalität von HPMC nach Inkubation in L-PDL und B- S. 46
PDL mit 1,5% Glukose
8
Abbildung Nr. 10 Vitalität von HPFB nach 24 Stunden Inkubation in S. 47
verschiedenen PDL
Abbildung Nr.11 lnterleukin-6-Freisetzung aus humanen peritonealen S. 48
Mesothelzellen nach Präinkubationsexperimenten
in verschiedenen PDL
Abbildung Nr. 12 lnterleukin-6-Freisetzung aus HPFB nach S. 49
Präinkubationsexperimenten in verschiedenen PDL
Abbildung Nr.13 Viabilität von HPMC nach Präinkubation in laktat- S. 50
und bikarbonatgepufferter PDL mit 1,5 % Glukose
Abbildung Nr.14 lnterleukin-6-Freisetzung von HPMC nach Inkubation S. 51
in Glukose oder Glukosedegradationsprodukten im
chronischen Modell
Abbildung Nr.15 Zellvitalität von HPMC nach chronischer Inkubation S. 52
in GDP oder Glukose
9
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