Vaterschaftsnachweis an Embryonen mit polymorphen DNA-Markern zur Fertilitätsbeurteilung von Ebern nach heterospermer Insemination:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
7
2
LITERATUR
.
9
2
1
HETEROSPERME
INSEMINATION
.
9
2.1
1
SPERMIENKOMPETENZ
UNTER
AUSSCHALTUNG
VON
UMWELTEINFLUESSEN
.
10
2
1
2
ANWENDUNGSMOEGLICHKEITEN
DER
HETEROSPERMEN
INSEMINATION
.
13
2
2
VATERSCHAFTSNACHWEIS
MIT
DNA-MARKERN
.
16
2
2.1
DNA-AMPHFIKATION
MIT
DER
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
(PCR)
.
17
2
2.2
RANDOM
AMPLIFIED
POLYMORPHIE
DNA
(RAPD)
.
19
2.2
3
MIKROSATELLITEN
.
19
2
2.4
OPTIMIERUNG
DER
REAKTIONSBEDINGUNGEN
.
20
2.2
5
FEHLERQUELLEN
BEI
DER PCR-AMPLIFIKATION
.
22
2.2
6
FEHLERQUELLEN
BEI
DER
TYPISIERUNG
VON
MIKROSATELHTEN
.
23
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
25
3.1
MATERIAL
.
25
3
1.1
ENZYME
UND
CHEMIKALIEN
.
25
3
1
2
GERAETE
.
26
3
1
3
PUFFER
UND
STAMMLOESUNGEN
.
27
3.1
4
VERSUCHSTIERE
.
29
3.2
METHODEN
.
29
3.2
1
BRUNSTKONTROLLE
.
29
3
2
2
SAMENGEWINNUNG
UND
-UNTERSUCHUNG
.
30
3.2
3
SAMENVERDUENNUNG
.
30
3.2
4
INSTRUMENTELLE
BESAMUNG
.
30
3
2.5
OVULATIONSKONTROLLE
.
31
3
26
EMBRYONENGEWINNUNG
UND-UNTERSUCHUNG
.
32
3
2
7
MIKROMANIPULATION
DER
EMBRYONEN
.
32
3
2
8
ERMITTLUNG
DES
BEFRUCHTUNGSERFOLGES
.
34
3.2.9
DARSTELLUNG
DER
AKZESSORISCHEN
SPERMIEN
IN
DER
ZONA
PELLUCIDA
.
35
3
2
10
DNA-ISOLIERUNG
.
.
.
.
35
3
2
10
1
DNA-ISOLIERUNG
AUS
BLUT
.
35
3.2
10.2
DNA-ISOLIERUNG
AUS
BLASTOMEREN
.
36
3
2
11
PRIMER
FUER
DIE
PCR
.
36
3
2
12
PRIMER-KONZENTRATIONSMESSUNG
.
37
3
2
13
BESTIMMUNG
DER
SCHMELZTEMPERATUR
DER
PRIMER
.
38
3
2
14
DNA-AMPLIFIZIERUNG
MIT
DER
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
(PCR)
38
3
2
15
MASSNAHMEN
GEGEN
KONTAMINATIONEN
42
3
2
16
AUFTRENNUNG
DER
DNA-FRAGMENTE
.
43
3
2
16
1
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
43
3
2
16
2
POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
43
3
2
17
BESTIMMUNG
DER
GENOTYPEN
UND
ERMITTLUNG
DER
VATERSCHAFT
45
3
2
18
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
46
4
ERGEBNISSE
.
47
4
1
AUSWAHL
DER
DNA-MARKER
.
47
4.2
PCR-AUSBEUTE
AUS
EMBRYONALEN
ZELLEN
.
49
4
2.1
EINFLUSS
DER
DNA-ISOLIERMETHODE
.
49
4.2
2
ANPASSUNG
DER
REAKTIONSBEDINGUNGEN
.
49
4
3
TYPISIERUNG
DER
EMBRYONEN
.
51
4.4
VATERSCHAFT
DER
EMBRYONEN
AUS
MISCHSPERMABESAMUNG
.
54
4
5
BESAMUNGSERGEBNISSE
.
58
5
DISKUSSION
.
60
5.1
PROBENAUFBEREITUNG
FUER
DIE
PCR
.
60
5.2
AUSWAHL
DER
DNA-MARKER
.
61
5
3
EFFIZIENZ
DER
PCR
.
61
5
4
NULLALLEL
.
62
5
5
UNTERSUCHUNGEN
BEI
FRUEHEN
EMBRYOSTADIEN
.
62
5.6
SCHLUSSBETRACHTUNG
.
64
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
65
7
SUMMARY
.
67
8
RESUMO
.
69
9
LITERATURVERZEICHNIS
.
71
10
ANHANG
.
85
10.1
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
.
85
10.2
TABELLEN
IM
ANHANG
.
87 |
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