Isolierung von Fibrinogen aus Blutplasma durch Affinitätschromatographie:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Sprache: | German |
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
VERWENDETE
ABKUERZUNGEN
1.
EINLEITUNG
4
1.1.
FIBRINOGEN
5
1.2.
FRAGESTELLUNG
10
2.
MATERIALIEN
11
2.1.
REAGENZIEN
11
2.2.
GERAETE
12
2.3.
PUFFER
UND
LOESUNGEN
13
3.
METHODEN
18
3.1.
DAS
PRINZIP
DER
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
18
3.2.
HERSTELLEN
EINES
PLASMAPOOLS
20
3.3.
KOPPLUNG
VON
FIBRINOGEN
AN
DIE
TRAEGERGELE
20
3.4.
BESTIMMUNG
DER
KOPPLUNGSRATE
21
3.5.
WASCHEN
DER
TRAEGERGELE
22
3.6.
HERSTELLUNG
VON
DESAABB-FIBRIN-SEPHAROSE
UND
DESAABB-FIBRIN-FRACTOGEL
22
3.7.
HERSTELLUNG
VON
DESAA-FIBRIN-SEPHAROSE
22
3.8.
VERSUCHSAUFBAU
UND
DURCHFUEHRUNG
23
3.9.
BESTIMMUNG
DER
GERINNBARKEIT
DES
FIBRINOGENS
24
3.10.
BESTIMMUNG
DER
FIBRINOGENAUSBEUTE
DES
EINGESETZTEN
PLASMAFIBRINOGENS
25
3.11.
BESTIMMUNG
DER
FUNKTIONELLEN
AKTIVITAET
UND
UNTERSUCHUNG
AUF
DEGRADIERENDE
ENZYME
26
3.12.
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHISCHE
REINIGUNG
VON
FIBRINOGEN
MITTELS
DESAA-FIBRIN-SEPHAROSE
27
3.13.
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
28
3.14.
STATISTIK
29
4.
ERGEBNISSE
30
4.1.
ISOLIERUNG
VON
FIBRINOGEN
AUS
PLASMA
DURCH
AFFINITAETS
CHROMATOGRAPHIE
MIT
DESAABB-FIBRIN-FRACTOGEL
TSK
AF-CDI
33
4.1.1.
MESSUNG
DES
FIBRINOGEN-GEHALTES
DER
NICHT
ADSORBIERTEN
PROTEINE
33
4.1.2.
PROTEINBESTIMMUNG
DER
FRAKTIONEN
33
4.1.3.
SEMIQUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
REINHEIT
DES
ELUIERTEN
FIBRINOGENS
34
4.1.4.
GERINNBARKEIT
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
35
4.1.5.
FIBRINOGENAUSBEUTE
AUS
DEM
EINGESETZTEN
PLASMAFIBRINOGEN
36
4.1.6.
KONTAMINATION
UND
FUNKTIONELLE
AKTIVITAET
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
37
SEITE
4.2.
ISOLIERUNG
VON
FIBRINOGEN
AUS
PLASMA
DURCH
AFFINITAETS
CHROMATOGRAPHIE
MIT
GPRP-PEPTID-FRACTOGEL
TSK
AF-CDI
39
4.2.1.
MESSUNG
DES
FIBRINOGEN-GEHALTES
DER
NICHT
ADSORBIERTEN
PROTEINE
39
4.2.2.
PROTEINBESTIMMUNG
DER
FRAKTIONEN
39
4.2.3.
SEMIQUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
REINHEIT
DES
ELUIERTEN
FIBRINOGENS
40
4.2.4.
GERINNBARKEIT
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
41
4.2.5.
FIBRINOGENAUSBEUTE
AUS
DEM
EINGESETZTEN
PLASMAFIBRINOGEN
42
4.2.6.
KONTAMINATION
UND
FUNKTIONELLE
AKTIVITAET
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
43
4.3.
ISOLIERUNG
VON
FIBRINOGEN
AUS
PLASMA
DURCH
AFFINITAETS
CHROMATOGRAPHIE
MIT
DESAABB-FIBRIN-SEPHAROSE
45
4.3.1.
MESSUNG
DES
FIBRINOGEN-GEHALTES
DER
NICHT
ADSORBIERTEN
PROTEINE
45
4.3.2.
PROTEINBESTIMMUNG
DER
FRAKTIONEN
45
4.3.3.
SEMIQUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
REINHEIT
DES
ELUIERTEN
FIBRINOGENS
46
4.3.4.
GERINNBARKEIT
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
47
4.3.5.
FIBRINOGENAUSBEUTE
AUS
DEM
EINGESETZTEN
PLASMAFIBRINOGEN
48
4.3.6.
KONTAMINATION
UND
FUNKTIONELLE
AKTIVITAET
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
49
4.4.
ISOLIERUNG
VON
FIBRINOGEN
AUS
PLASMA
DURCH
AFFINITAETS
CHROMATOGRAPHIE
MIT
DESAA-FIBRIN-SEPHAROSE
52
4.4.1.
MESSUNG
DES
FIBRINOGEN-GEHALTES
DER
NICHT
ADSORBIERTEN
PROTEINE
52
4.4.2.
PROTEINBESTIMMUNG
DER
FRAKTIONEN
52
4.4.3.
SEMIQUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
REINHEIT
DES
ELUIERTEN
FIBRINOGENS
53
4.4.4.
DIE
GERINNBARKEIT
UND
DIE
FIBRINOGENAUSBEUTE
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
55
4.4.5.
KONTAMINATION
UND
FUNKTIONELLE
AKTIVITAET
DES
ISOLIERTEN
FIBRINOGENS
55
5.
DISKUSSION
58
6.
ZUSAMMENFASSUNG
70
7.
SUMMARY
72
8.
LITERATURVERZEICHNIS
74
DANKSAGUNG |
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