Struktur- und Funktionsuntersuchungen einer Superoxiddismutase aus Propionibakterium shermanii:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
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| Beschreibung: | 117 S. Ill., graph. Darst. 21 cm |
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INHAL
TSV
ERZEICHNIS
SEITE
GEWINNUNG
VON
ZELLFREIEN
EXTRAKTEN
1.
EINLEITUNG
1
2
.
SCHRIFTTUM
5
2.1.
PROPIONIBAKTERIEN
5
2.1.1
STOFFWECHSEL
DER
PROPIONIBAKTERIEN
7
2.2
REAKTIVE
SAUERSTOFFSPEZIES
UND
PRINZI
PIEN
DER
SAUERSTOFFAKTIVIERUNG
10
2.2.1
SAUERSTOFF
IM
GRUNDZUSTAND
UND
SINGU
LE
T
T
SAUERS
TOF
F
11
2.2.2
SUPEROXIDRADIKAL
15
2.2.3
WAS
SERS
TOF
F
PEROXID
17
2.2.4
HYDROXY
1
RADIKAL
18
2.3
SUPEROXIDRADIKALE
IM
ORGANISMUS
19
2.4.
SUPEROXIDDISMUTASEN
20
2.4.1
KATALYTISCHER
MECHANISMUS
DER
SUPEROXIDDISMUTASEN
21
2.4.2
RAEUMLICHE
STRUKTUR
DER
SUPEROXID
DISMUTASEN
23
2.4.3
REGULATION
DER
SUPEROXIDDISMUTASE
23
2.5
SPEKTROSKOPIE
26
2.5.1
UV
UND
SICHTBARES
SPEKTRUM
26
2.5.2
ESR
-
SPEKTROSKOPIE
26
2.5.3
CD
-
SPEKTROSKOPIE
28
3
.
MATERIAL
UND
METHODEN
31
3.1
MATERIAL
31
3.1.1
CHEMIKALIEN
31
3.1.2
GERAETE
32
3.2
METHODEN
34
3.2.1
ANZUCHT
VON
P
YY
FREUDENREICHII
SSP
.
SHERMANII
34
3.2.1.1
ANZUCHT
AUF
KOMPLEXEM
MEDIUM
34
3.2.1.2
ANZUCHT
AUF
DEFINIERTEM
MEDIUM
35
3.2.1.3
WACHSTUMSKINET
IKEN
36
3.2.3
HERSTELLUNG
VON
ZELLSUSPENSIONEN,
37
UND
PARTIKELN
3.2.4
ENZYMREINIGUNG
38
3.2.4.1
SAEULENCHROMATOGRAPHIE
38
3.2.5
PROTEINNACHWEIS
39
3.2.6
AKTIVITAETSTEST
39
3.2.6.1
CYTOCHROM
C
-
XANTHINOXIDASE
-
TEST
39
3.2.6.2
NITROBLAUTETRAZOLIUM
-
TEST
(NBT
-
TEST)
40
3.2.7
NACHWEIS
VON
METALLEN
IM
AKTIVEN
ZENTRUM
DER
SUPEROXIDDISMUTASEN
41
3.2.7.1
NACHWEIS
VON
KUPFER
41
3.2.7.2
NACHWEIS
VON
KOBALT
41
3.2.8
IN
VITRO
METALLAUSTAUSCH
42
3.2.9
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
METALIGEHALTE
43
3.2.10
SPEKTROSKOPIE
44
3.2.10.1
VIS
-
UND
UV
-
SPEKTROSKOPIE
44
3.2.10.2
ESR
-
SPEKTROSKOPIE
44
3.2.10.3
CD
-
SPEKTROSKOPIE
44
3.2.11
IMMUNOLOGISCHE
METHODEN
45
3.2.11.1
PRODUKTION
VON
ANTIKOERPERN
GEGEN
SUPEROXIDDISMUTASE
45
3.2.11.2
ANTIKOERPERTITERBESTIMMUNG
MIT
ELISA
45
3.2.11.3
ELEKTROCHEMISCHER
TRANSFER
("
WESTERN
BLOT
"
)
47
3.2.12
SEQUENZIERUNG
48
3.2.13
ANALYTISCHE
ULTRAZENTRIFUGATION
49
4.
ERGEBNISSE
51
4.1
EINFLUSS
VON
UEBERGANGSMETALLEN
AUF
DIE
SUPEROXIDDISMUTASE
VON
P
.
SHE
RMANI
I
51
4.1.1
EINFLUSS
VON
UBERGANGSMETALLEN
AUF
DAS
WACHSTUM
VON
P
,
SHERMANI
I
51
4.1.2
EINFLUSS
VON
UEBERGANGSMETALLEN
AUF
DIE
BILDUNG
DER
SUPEROXIDDISMUTASE
53
4.1.3
NACHWEIS
VON
KUPFER
UND
KOBALT
IN
SUPEROXIDDISMUTASEN
56
4.1.3.1
KUPFERFAERBUNG
IN
ACRYLAMIDGELEN
56
4.1
.
3.2
KOBALTFAERBUNG
IN
ACRYLAMIDGELEN
57
4.2
ANTIKOERPERPRODUKTION
UND
CHARAKTERI
SIERUNG
VON
ANTIKOERPERN
GEGEN
DIE
EISEN
-
SUPEROXIDDISMUTASE
,
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
DES
PROTEINS
59
4.3
SAUERSTOFFINDUKTION
60
4.4
ISOLIERUNG
DER
EISEN-,
MANGAN-,
KUPFER
UND
KOBALT
SUPEROXIDDISMUTASE
64
4.5
BESTIMMUNG
DES
SCHWERMETALLGEHALTES
DER
GEREINIGTEN
SUPEROXIDDISMUTASEN
68
4.6
CHARAKTERISIERUNG
DER
SUPEROXIDDIS
MUTASEN
69
4.6.1
UV
-
UND
VIS
-
SPEKTREN
DER
SUPEROXID
DISMUTASE
AUS
P.
SHERMANII
69
4.6.2
CD
-
SPEKTREN
DER
SUPEROXIDDISMUTASEN
AUS
P
.
SHERMANII
70
4.6.3
ELEKTRONENSPINRESONANZSPEKTROSKOPIE
DER
EISEN
UND
KUPFER
-
SUPEROXIDDISMUTASE
71
4.7.
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
DER
SUPER
OXIDDISMUTASEN
72
4.8
SEQUENZANALYSE
DER
SUPEROXIDDISMUTASEN
73
4.9
IN
VITRO
METALLAUSTAUSCH
75
4.9.1
CD
-
SPEKTREN
DER
IN
VITRO
METALLAUS
GETAUSCHTEN
SUPEROXIDDISMUTASEN
76
5
.
DISKUSSION
81
5.1
METALLAUSTAUSCH
81
5.2
REINIGUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
EISEN-,
MANGAN-,
KUPFER
UND
KOBALT
-
SUPEROXIDDISMUTASE
AUS
P
YY
SHERMANII
87
5.3
IN
VITRO
METALLAUSTAUSCH
96
6
.
ZUSAMMENFASSUNG
98
7
.
SUMMARY
99
8
.
LITERATUR
100 |
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