Ergebnisse der Kryokonservierung in vitro produzierter Rinderblastozysten unter besonderer Berücksichtigung des Zusatzes eines pflanzlichen Gefrierschutzfaktors zum Einfriermedium:
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN
8
1.
EINLEITUNG
10
2.
SCHRIFTTUM
11
2.1.
IN-VITRO-FERTILISATION
VON
RINDEROOZYTEN
11
2.1.1.
GEWINNUNG
DER
OOZYTEN
11
2.1.2.
SELEKTION
DER
OOZYTEN
15
2.1.3.
MATURATION
16
2.1.3.1.
VORGANG
DER
EIZELLREIFUNG
16
2.1.3.2.
MATURATIONSMEDIEN
UND
ZUSAETZE
17
2.1.4.
AUFBEREITUNG
DER
SPERMIEN
UND
KAPAZITATION
20
2.1.5.
FERTILISATION
22
2.1.6.
KULTUR
DER
BEFRUCHTETEN
OOZYTEN
25
2.2.
GRUNDLAGEN
FUER
DAS
EINFRIEREN
VON
LEBENDEN
ZELLEN
30
2.2.1.
THERMODYNAMISCHE
VORGAENGE
WAEHREND
DES
EINFRIERENS
31
2.2.2.
ENTSTEHUNG
VON
GEFRIERSCHAEDEN
32
2.2.3.
WIRKUNG
VON
KRYOPROTEKTIVA
32
2.2.3.I.
PENETRIERENDE
KRYOPROTEKTIVA
33
2.2.3.2.
NICHTPENETRIERENDE
KRYOPROTEKTIVA
34
2.3.
EINFRIEREN
VON
RINDEREMBRYONEN
34
2.3.1.
VERFAHREN
ZUM
EINFRIEREN
VON
RINDEREMBRYONEN
35
2.3.1.1.
KONTROLLIERTES
EINFRIEREN
UND
AUFTAUEN/"STANDARD-METHODE"
35
2.3.1.2.
ONE-STEP-METHODE
36
2.3.1.3.
VITRIFIKATION
37
2.3.1.4.
ULTRA-RAPID
FREEZING
38
2.4.
EINFRIEREN
VON
IN
VITRO
PRODUZIERTEN
RINDERBLASTOZYSTEN
39
2.5.
WIRKUNG
VON
GEFRIERSCHUTZFAKTOREN
41
2.5.1.
GEFRIERSCHUTZFAKTOREN
TIERISCHER
HERKUNFT
41
2.5.2.
GEFRIERSCHUTZFAKTOREN
PFLANZLICHER
HERKUNFT
44
3.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
47
3.1.
MATERIAL
UND
METHODEN
47
3.1.1.
GEWINNUNG
DER
OVARIEN
47
3.1.2.
GEWINNUNG
DER
OOZYTEN
47
3.1.3.
IN-VITRO-MATURATION
49
3.1.4.
IN-VITRO-FERTILISATION
50
3.1.4.1.
AUFBEREITUNG
DER
SPERMIEN
50
3.1.4.2.
BEFRUCHTUNG
DER
MATURIERTEN
OOZYTEN
51
3.1.5.
IN-VITRO-KULTUR
53
3.1.6.
TIEFGEFRIEREN
DER
BLASTOZYSTEN
55
3.1.6.1.
EINFRIERMEDIEN
55
3.1.6.2.
GEFRIERSCHUTZMITTEL
56
3.1.6.3.
GEFRIERSCHUTZFAKTOREN
56
3.1.6.4.
GRUPPENEINTEILUNG
UND
VERSUCHSANSAETZE
FUER
IN-VITRO-VERSUCHE
58
3.1.7.
AUFTAUEN
DER
BLASTOZYSTEN
60
3.1.8.
BEURTEILUNG
DER
UEBERLEBENS-UND
WEITERENTWICKLUNGSRATE
61
3.1.9.
TRANSFERVERSUCHE
63
3.1.10.
GEWINNUNG
VON
IN-VIVO-BLASTOZYSTEN
64
3.2.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
64
3.3.
ERGEBNISSE
65
3.3.1.
ERGEBNISSE
DER
IN-VITRO-FERTILISATION
MIT
ANSCHLIESSENDER
KULTIVIERUNG
65
3.3.2.
EINFLUSS
EINES
AUS
WINTERFESTEM
WIRSINGKOHL
ISOLIERTEN
GEFRIERSCHUTZ
66
FAKTORS
(GSF)
AUF
DIE
AUFTAUERGEBNISSE
VON
EINGEFRORENEN
SIEBEN
UND
ACHT
TAGE
ALTEN
IVF-BLASTOZYSTEN
UNTER
VERWENDUNG
VERSCHIEDENER
KRYOPROTEKTIVA
IM
ONE-STEP-VERFAHREN
3.3.2.I.
VERWENDUNG
VON
ETHYLENGLYKOL
ALS
KRYOPROTEKTIVUM
66
3.3.2.2.
VERWENDUNG
VON
GLYCERIN
ALS
KRYOPROTEKTIVUM
68
3.3.3.
EINFLUSS
EINES
HOCHGEREINIGTEN,
AUS
WINTERFESTEM
KOHL
ISOLIERTEN
71
GEFRIER
SCHUTZFAKTORS
AUF
DIE
AUFTAUERGEBNISSE
VON
EINGEFRORENEN
IVF
BLASTOZYSTEN
UNTER
VERWENDUNG
DES
STANDARDVERFAHRENS
3.3.4.
EINFLUSS
DES
GEFRIERSCHUTZFAKTORS
(GSF)
AUF
DIE
TRANSFERERGEBNISSE
74
VON
IVF-BLASTOZYSTEN
3.3.5.
EINFLUSS
DER
HERKUNFT
DER
RINDERBLASTOZYSTEN
AUF
DIE
AUFTAUERGEBNISSE
78
3.3.6.
EINFLUSS
DES
ALTERS
VON
EINGEFRORENEN
IVF-BLASTOZYSTEN
BEI
VERWEN
79
DUENG
VERSCHIEDENER
KRYOPROTEKTIVA
UND
EINFRIERVERFAHREN
3.3.7.
EINFLUSS
DES
KRYOPROTEKTIVUMS
SOWIE
DES
EINFRIERVERFAHRENS
AUF
81
DIE
AUFTAUERGEBNISSE
VON
EINGEFRORENEN
IVF-BLASTOZYSTEN
4.
DISKUSSION
83
4.1.
ERGEBNISSE
DER
IN-VITRO-FERTILISATION
MIT
ANSCHLIESSENDER
KULTIVIERUNG
83
4.2.
EINFLUSS
ZWEIER
PFLANZLICHER
GEFRIERSCHUTZFAKTOREN
AUF
DIE
AUFTAUERGEB
84
NISSE
VON
IVF-BLASTOZYSTEN
4.3.
EINFLUSS
WEITERER
FAKTOTEN
AUF
DIE
AUFTAUERGEBNISSE
VON
IVF-BLASTOZYSTEN
88
4.4.
SCHLUSSFOLGERUNGEN
92
5.
ZUSAMMENFASSUNG
93
SUMMARY
95
6.
SCHRIFTTUMSVERZEICHNIS
97 |
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