Überwindung der zelladhäsionsvermittelten Chemoresistenz durch Hemmung des Mevalonat-Signalweges beim Multiplen Myelom:
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Autor: Şimşek, Meral
Jahr: 2008
Inhaltsverzeichnis
INHALTSVERZEICHNIS
1. Einleitung 7
1.1 Das Multiple Myelom - Klinik und pathophysiologische Grundlagen 7
1.2 Therapie des MM 11
1.3 Chemoresistenz- eine große Herausforderung in der MM-Therapie 13
2. Patienten, Materialien und Methoden 16
2.1 Zellkultur 16
2.1.1 Zelllinien 16
2.1.2 Einfrieren und Auftauen von Zellen 16
2.1.3 Zellzahlbestimmung 17
2.1.4 Extrahierung von mononukleären Zellen 17
2.2 Zellvitalitätsmessungen 18
2.3 Durchflusszytometrische Analysen 18
2.3.1 Annexin/Pl Apoptose Assay 18
2.3.2 Oberflächenmarkermessungen 21
2.3.3 Zytotoxizitäts-Assay unter Kokulturbedingungen 22
2.3.4 Durchführung und Auswetung der Kokulturversuche 23
2.4 Western Blotting 25
2.5 Statistik 29
3. Ergebnisse 30
3.1 Zelladhäsonsvermittelte Chemoresistenz (CAM-DR) 30
3.2 Antimyelomeffekt von Simvastatin 34
3.4 Bedeutung der Bisphosphonate in der Myelomtherapie 38
3.4.1 Zoledronsäure wirkt nicht toxisch in Myelomzellen 38
3.4.2. Bisphosphonate können die CAM-DR nicht inhibieren 41
3.4.3 Synergistische Wirkung von Simvastatin und Zoledronsäure 43
4. Diskussion 48
4.1. Zelladhäsionsvermittelte Chemoresistenz in Myelomzellen 48
4.2 Antimyelomeffekt von Simvastatin 51
4.3 Antimyelomeffekt von Bisphosphonaten 55
4.4 Synergistische Wirkung von Simvastatin und Zoledronsäure 59
5. Zusammenfassung 60
6. Literaturverzeichnis 62
7. Anhang 71
7.1 Verwendete Materialien und Methoden 71
7.2 Erklärung 75
7.3 Danksagungen 76
7.4 Lebenslauf 77
Abbildungs- und Tabellenverzeichnis
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
Abbildung 2.1: Das Annexin-Pl Apoptose Assay 20
Abbildung 2.2 (qualitativ): Oberflächenmarkermessung (Baumann, 2006) 22
Abbildung 2.3: Monokultur aus Stromazellen versus NCI-H929/HS-5-Kokultur 24
Abbildung 2.4: Zytotoxizitäts-Assay unter Kokulturbedingungen 25
Abbildung 3.2: Resistenz gegen Bortezomib durch Adhäsion an Stromazellen 31
Abbildung 3.3a-c: Zeit- und dosisabhängige Zytotoxizität von Dexamethason in Myelomzellen 33
Abbildung 3.4: CAM-DR unter Dexamethason-Wirkung 34
Abbildung 3.5: Zeit- und dosisabhängige Hemmung der Zellproliferation durch Simvastatin 35
Abbildung 3.6a-c: Antimyelomeffekt von Simvastatin sowohl in der Mono- als auch in der Kokultur... 37
Abbildung 3.7: Western Blot Analyse der wichtigsten Signalmoleküle unter Simvastatinwirkung 38
Abbildung 3.8a-e: Fehlender Antimyelomeffekt von Zoledronsäure 41
Abbildung 3.9-3.11: Keine Abnahme der CAM-DR durch Zoledronsäure 43
Abbildung 3.12a-d: Synergistische Wirkung von Simvastatin und Zoledronsäure 47
Abbildung 4.1: GG-PP/Rho/Rho-Kinase-Signalweg 56
TABELLENVERZEICHNIS
Tabelle 1: International Staging System (ISS) 8
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