Untersuchungen zur Karzinogenese im Oropharynx unter Berücksichtigung exogener und endogener Risikofaktoren:
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| adam_text | Titel: Untersuchungen zur Karzinogenese im Oropharynx unter Berücksichtigung exogener und endogener Risiko
Autor: Jaiser, Sonja Christine
Jahr: 2008
/. Einleitung 1
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 4
1.1 Karzinogenese im Kopf-Hals-Bereich 4
1.2 Das Oropharynxkarzinom 4
1.3 Anatomie des Oropharynx 5
1.4 DNA-Schädigung und Kanzerogenese 6
1.5 Mutagensensitivität 10
1.6 Reparaturkapazität 10
1.7 Fremdstoffe 11
1.7.1 Polyzyklisch aromatische Kohlenwasserstoffe (PAH) 11
1.7.2 N Nitrosoverbindungen 12
1.8 Problemstellung und Ziele 14
2. MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 Patientenkollektiv 15
2.1.1 Anamnese der Patienten 15
2.1.2 Spender oropharyngealer Epithelien mit Oropharynxkarzinom 15
2.1.3 Spender oropharyngealer Epithelien ohne Oropharynxkarzinom 16
2.1.4 Spender der Lymphozyten 16
2.2 Zellseparation, Fremdstoffexposition 16
2.2.1 Gewinnung und Präparation der Gewebefragmente 16
2.2.2 Gewinnung der Lymphozyten 17
2.2.3 Untersuchungen an Schleimhautzellen 18
2.2.4 Untersuchungen an Lymphozyten 19
2.3 Messung der Mutagensensitivität 20
2.4 DNA-Reparatur 20
2.4.1 DNA-Reparatur von Schleimhautzellen 20
2.4.2 DNA-Reparatur von Lymphozyten 21
2.4.3 Messung der DNA-Reparaturkapazitüt 22
2.5 Übersicht des Versuchsaufbaus 23
2.6 Materialien 24
2.6.1 Chemikalien und Reagenzien 24
2.6.2 Medien und Zusätze 24
2.6.3 Enzyme 25
2.6.4 Testsubstanzen 25
2.6.5 Lösungen, Zellisolierung, Agarose, Puffer 25
2.6.6 Verbrauchsmaterialien 28
/. Einleitung 2
2.6.7 Geräte 29
2.7 Testverfahren 30
2.7.1 Die Mikrogelelektrophorese (MGE), Comet Assay 30
2.7.2 Der Comet Assay als Nachweismethode für DNA-Schädigung 31
2.7.3 Elektrophoretische Auftrennung der DNA 33
2.7.4 Digitale Analyse der DNA-Migration 33
2.8 Datenanalyse und Statistik 34
3. ERGEBNISSE 35
3.1 Genotoxizität von Umweltstoffen an humanem Gewebe 36
3.1.1 Genotoxische Wirkung von DMSO (Negativkontrolle) und N-Methyl-N -nitro-N-
nitrosoguanidin MNNG (Positivkontrolle) auf oropharyngeale Schleimhautzellen
und Lymphozyten 37
3.1.2 Genotoxische Wirkung der Testsubstanzen B[a]P, BPDE, NNN und NNK auf
oropharyngeale Schleimhautzellen und Lymphozyten 40
3.2 Messung endogener Risikomarker an humanen Schleimhautzellen des
Oropharynx und Lymphozyten 45
3.2.1 Mutagensensitivität 45
3.2.2 DNA-Reparatur 46
3.2.3 DNA-Reparaturkapazität 47
3.2.3.1 DNA-Reparaturkapazität von Patienten mit und ohne Karzinom an
oropharyngealen Schleimhautzellen 47
3.2.3.2 DNA-Reparaturkapazität von Tumorpatienten 48
3.2.3.3 DNA-Reparaturkapazität von tumorfreien Spendern 49
3.2.3.4 DNA-Reparaturkapazität von Patienten mit und ohne Oropharynxkarzinom an
Lymphozyten 50
3.2.3.5 DNA-Reparaturkapazität der Schleimhautzellen von Tumorpatienten bei
Konsum von 63g bzw. 63g Alkohol/d 51
4. DISKUSSION 53
4.1 Auswahl des Spenderkollektivs 53
4.1.1 Patienten mit Oropharynxkarzinom als Spender von Schleimhautzellen des
Oropharynx 53
4.1.2 Patienten als tumorfreie Spender von Schleimhautzellen des Oropharynx 54
4.1.3 Spender der Lymphozyten 55
4.2 Diskussion der Methodik 55
4.3 Genotoxizität von Umweltstoffen als exogene Risikofaktoren 56
4.3.1 Genotoxizität polyzyklisch aromatischer Kohlenwasserstoffe 56
4.3.2 Genotoxizität von Nitrosaminen 57
4.4 Mutagensensitivität und DNA-Reparaturkapazität als endogener
Risikofaktor 59
4.4.1 Mutagensensitivität 59
4.5 DNA-Reparatur 60
1. Einleitung 3^
4.6 DNA-Reparaturkapazität 61
4.6.1 DNA-Reparaturkapazität von Schleimhautzellen 61
4.6.2 DNA-Reparaturkapazität von Lymphozyten 62
5. ZUSAMMENFASSUNG 64
6. LITERATUR 66
7. ANHANG 77
7.1 Anamnesen der Probenspender 77
7.2 Verwendete Abkürzungen 80
7.3 Abbildungsverzeichnis 81
7.4 Fragebogen für Patienten 82
7.5 Lebenslauf 86
7.6 Danksagung 87
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