Hepatozelluläre Aufnahme des HMG-CoA-Reduktase-Inhibitors Pravastatin:
Gespeichert in:
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
BEDEUTUNG
DES
CHOLESTERINS
FUER
DEN
MENSCHLICHEN
UND
TIERISCHEN
ORGANISMUS
.
1
1.2
HYPERLIPIDAEMIEN
-
URSACHEN
UND
FOLGEN
.
3
1.3
ENTWICKLUNG
VON
HMG-COA
REDUKTASE
INHIBITOREN
.
3
1.4
HEPATOZELLULAERE
AUFNAHME
UND
BILIAERE
AUSSCHEIDUNG
VON
ENDOGENEN
UND
EXOGENEN
STOFFEN
.
6
1.5
FRAGE-UND
AUFGABENSTELLUNG
.
9
2
MATERIAL
.
11
2.1
VERSUCHSTIERE
.
11
2.2
REUBER
FAO-HEPATOMZELLEN
.
11
2.3
HEPG2
ZELLEN
.
11
2.4
FIBROBLASTEN
.
11
2.5
CHEMIKALIEN
UND
ENZYME
.
12
2.6
PUFFERLOESUNGEN
FUER:
2.6.1
LEBERPARENCHYMZEILEN
.
14
2.6.2
BASOLATERALE
LEBERPLASMAMEMBRANVESIKEL
.
16
2.6.3
ENZYMTESTS
.
19
2.7
ZELLKULTUREN
2.7.1
KULTURMEDIUMZUSAETZE
.
20
2
7.2
KULTURMEDIUMZUSAMMENSETZUNG
.
20
2.8
BIURET-REAGENZ
.
21
2.9
MATERIAL
FUER
VESIKELSTUDIEN
.
21
3
METHODEN
.
22
3.1
ISOLIERUNG
VON
RATTENHEPATOZYTEN
.
22
3.2
ISOLIERUNG
VON
AS-30D
ASZITES
HEPATOMZELLEN
.
23
3.3
KULTUR
VON
REUBER
FAO-HEPATOMZELLEN,
HEP
G2
ZELLEN
UND
FIBROBLASTEN
.
23
3.4
VITALITAETSTEST
.
23
3.5
AUFNAHMEMESSUNGEN
IN
ISOLIERTE
HEPATOZYTEN,
HEPATOMZELLEN
UND
FIBROBLASTEN
.
24
3.5.1
MESSUNG
UND
BERECHNUNG
DER
AUFGENOMMENEN
SUBSTANZ
.
24
3.6
PRAEPARATION
VON
BASOLATERALEN
PLASMAMEMBRANVESIKELN
.
25
INHALTSVERZEICHNIS
3.7
AUFHAHMEMESSUNGEN
IN
PLASMAMEMBRANVESIKEL
.
26
3.7.1
MESSUNG
UND
BERECHNUNG
DER
AUFGENOMMENEN
SUBSTANZ
.
27
3.8
PROTEINBESTIMMUNG
.
27
3.8.1
BIURET-METHODE
.
27
3.8.2
BESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
.
28
3.9
ENZYMTESTS
.
.
28
3.9.1
NA
+
/K
+
-ATPASE
.
28
3.9.2
GLUCOSE-6-PHOSPHATASE
.
29
3.9.3
BESTIMMUNG
DER
5'-NUKLEOTIDASE
.
29
3.9.4
PHOSPHATBESTIMMUNG
NACH
CHEN
.
29
3.10
DUENNSCHICHTRADIOGRAPHISCHE
REINHEITSBESTIMMUNG
.
30
3.11
UNTERSUCHUNG
AUF
METABOLITE
.
30
3.12
IN
SITU
PERFUSION
.
30
3.13
AUFNAHMEMESSUNGEN
IN
TOTE
HEPATOZYTEN
.
31
3.14
BESTIMMUNG
DER
ZYTOSOL-PLASMAMEMBRANVERTEILUNG
VON
PRAVASTATIN
IN
ISOLIERTEN
RATTENHEPATOZYTEN
.
31
3.15
AUSWERTUNG
DER
ERMITTELTEN
DATEN
.
32
3.15.1
DERIC
50
-WERT
.
32
3.15.2
DER
LINEWEAVER-BURK-PLOT
.
32
3.15.3
DER
WOOLF-HOFSTEE-PLOT
.
32
3.15.4
KJ-WERT
BESTIMMUNG
NACH
DIXON
.
32
3.15.5
AUFTRAGUNG
DER
WERTE
NACH
COMISH-BOWDEN
.
32
3.16
STATISTISCHE
METHODEN
.
34
3.16
1
MITTELWERT
UND
STANDARDABWEICHUNG
.
34
3.16
2
BERECHNUNG
VON
K
M
UND
V
MAX
34
3.16.3
LINEARE
REGRESSION
.
35
3.16.4
SIGNIFIKANZ.
35
3.17.
ABBILDUNGEN
.
35
4
ERGEBNISSE
.
36
4.1
DIE
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
ISOLIERTE
RATTENHEPATOZYTEN
.
36
4.1.1
ZEIT
UND
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
HEPATOZYTEN
BEI
37C .
36
4.1.2
ERMITTLUNG
DER
KINETISCHEN
DATEN
DES
SAETTIGBAREN
ANTEILS
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
HEPATOZYTEN
.
41
4.1.3
BERECHNUNG
DER
PERMEABILITAETSKOEFFIZIENTEN
FUER
DIE
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
BEI
VERSCHIEDENEN
TEMPERATUREN
.
43
4.1.4
MESSUNG
DER
PRAVASTATINAUFNAHME
IN
TOTE
HEPATOZYTEN
.
46
4.1.5
ERMITTLUNG
DER
ZYTOSOL-PLASMAMEMBRAN-VERTEILUNG
VON
PRAVASTATIN
IN
ISOLIERTEN
HEPATOZYTEN
.
48
4.1.6
HEMMUNG
DER
HEPATOZELLULAEREN
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
DURCH
TRYPSIN
.
49
4.1.7
VERGLEICH
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
ISOLIERTE
RATTENHEPATOZYTEN,
AS-30D
HEPATOMZELLEN,
FAO-ZELLEN
HEP
G2
ZELLEN
UND
FIBROBLASTEN
.
52
4.2
ENERGIEABHAENGIGKEIT
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
ISOLIERTE
RATTENHEPATOZYTEN
.
54
4.2.1
BEEINFLUSSUNG
DER
HEPATOZELLULAEREN
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
FOLGE
MINDERUNG
DES
ATP-GEHALTES
DER
ZELLEN
DURCH
METABOLISCHE
INHIBITOREN
.
54
4.2.2
TEMPERATURABHAENGIGKEIT
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
.
57
4.3
TREIBENDE
KRAEFTE
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
LEBERZELLEN
.
62
4.3.1
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
NATRIUMFREIEN
PUFFERN
.
62
4.3.2
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
CHLORIDVERMINDERTEN
PUFFERN
.
63
4.4
BEZIEHUNG
DER
HEPATOZELLULAEREN
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
ZU
EINIGEN
BEKANNTEN
TRANSPORTSYSTEMEN
DER
LEBERZELLE
.
65
4.4.1
MULTISPEZIFISCHE
GALLENSAEURETRANSPORTSYSTEME
.
66
4.4.1.1
BEEINFLUSSUNG
DER
HEPATOZELLULAEREN
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
DURCH
TAUROCHOLAT
UND
CHOLAT
.
.
66
4.4
1
2
KINETIK
DER
HEMMUNG
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
DURCH
TAUROCHOLAT
UND
CHOLAT
.
67
4.4
1.3
KINETIK
DER
AUFNAHMEHEMMUNG
VON
PRAVASTATIN
DURCH
EINIGE
BEKANNTE
SUBSTRATE
DER
MULTISPEZIFISCHEN
GALLENSAEURETRANSPORTSYSTEME
IN
CHOLIN-PUFFER
.
70
4.4.2
TRANSPORTSYSTEM
FUER
BILIRUBIN.
75
4
4.2.1
BEEINFLUSSUNG
DER
HEPATOZELLULAEREN
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
DURCH
BROMSULPHTHALEIN
(BSP)
UND
RIFAMPIZIN
.
75
INHALTSVERZEICHNIS
4.4.2.2
KINETIK
DER
HEMMUNG
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
DURCH
BSP
.
76
4.4.2.3
KINETIK
DER
HEMMUNG
DER
AUFNAHME
VON
BSP
DURCH
PRAVASTATIN
.
77
4.4.2.4
KINETIK
DER
AUFNAHMEHEMMUNG
VON
PRAVASTATIN
DURCH
BSP
IN
CHOLIN-TYRODE
.
78
4.4.3
EINFLUSS
VON
ALBUMIN
AUF
DIE
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
.
80
4.4.4
FEHLENDE
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
HEP
G2
ZELLEN
.
85
4.4.4.1
KINETIK
DER
AUFNAHME
VON
TAUROCHOLAT,
CHOLAT
UND
BSP
IN
HEP
G2
ZELLEN
UND
VERGLEICHSWEISE
IN
ISOLIERTE
HEPATOZYTEN
.
88
4.4.5
BEEINFLUSSUNG
DER
HEPATOZELLULAEREN
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
DURCH
DEN
HMG-COA
REDUKTASE
INHIBITOR
LOVASTATIN
.
92
4.4.6
BEEINFLUSSUNG
DER
PRAVASTATINAUFNAHME
IN
ISOLIERTE
HEPATOZYTEN
DURCH
CYCLOSPORIN
A
.
V.
.
94
4.5
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN-LAKTON
IN
ISOLIERTE
RATTENHEPATOZYTEN
.
96
4.5.1
ZEIT
UND
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
HEPATOZELLULAEREN
PRAVASTATIN-LAKTONAUFNAHME
.
96
4.5.2
VERGLEICH
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN-LAKTON
IN
ISOLIERTE
RATTENHEPATOZYTEN,
AS-30D
ASZITES
HEPATOMZELLEN
UND
FIBROBLASTEN
.
101
4.5.3
ENERGIEABHAENGIGKEIT
DER
HEPATOZELLULAEREN
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN-LAKTON
.
103
4.5.4
BEEINFLUSSUNG
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN-LAKTON
DURCH
PRAVASTATIN-NATRIUM
.
106
4.5.5
BEEINFLUSSUNG
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN-NATRIUM
DURCH
PRAVASTATIN-LAKTON
.
107
4.5.6
BEEINFLUSSUNG
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN-LAKTON
DURCH
LOVASTATIN
.
108
4.6
DUENNSCHICHTRADIOGRAPHISCHE
REINHEITSBESTIMMUNG
.
109
4.7
METABOLISMUS
VON
PRAVASTATIN
DURCH
DIE
LEBERZELLEN
.
109
4.7.1
DUENNSCHICHTRADIOGRAPHISCHE
UNTERSUCHUNGEN
DER
METABOIISIERUNG
VON
PRAVASTATIN-NATRIUM
.
109
4.7.2
DUENNSCHICHTRADIOGRAPHISCHE
UNTERSUCHUNGEN
DER
METABOIISIERUNG
VON
PRAVASTATIN-LAKTON
.
109
4.8
IN
SITU
PERFUESION
.
111
INHALTSVERZEICHNIS
4.8.1
UNTERSUCHUNG
DER
GALLE
AUF
METABOLITE
DES
PRAVASTATIN-NATRIUMS
.
111
4.8.2
UNTERSUCHUNG
DER
GALLE
AUF
METABOLITE
DES
PRAVASTATIN-LAKTONS
.
114
4.9
AUFHAHMEMESSUNGEN
IN
BASOLATERALE
PLASMAMEMBRANVESIKEL
DER
RATTENLEBER
.
117
4.9.1
UNTERSUCHUNG
DER
QUALITAET
DER
ISOLIERTEN
VESIKEL
.
117
4.9.1.1
ENZYMTESTS
.
117
4.9.1.2
MESSUNGEN
DER
AUFNAHME
VON
TAUROCHOLAT
.
118
4
9.2
BEEINFLUSSUNG
DER
PRAVASTATINAUFNAHME
IN
BASOLATERALE
PLASMAMEMBRANVESIKEL
DURCH
ZUGABE
VONATP
.
120
4.9.3
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
BASOLATERALE
PLASMAMEMBRANVESIKEL
IN
GEGENWART
VON
ALBUMIN
.
122
4.9.4
EINFLUSS
EINES
VALINOMYCIN
INDUZIERTEN
KALIUM-DIFFUSIONSPOTENTIALS
AUF
DIE
PRAVASTATINAUFNAHME
.
126
4
9.5
EINFLUSS
EINES
CHLORIDGRADIENTEN
AUF
DIE
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
BASOLATERALE
PLASMAMEMBRAN
VESIKEL
.
128
4.9.6
PRAVASTATINAUFNAHME
IN
BASOLATERALE
PLASMAMEMBRANVESIKEL
DURCH
OH"-LONEN-AUSTAUSCH
.
129
4.9.7
EINFLUSS
EINES
ZELLAUSWAERTS
GERICHTETEN
PROTONENGRADIENTEN
AUF
DIE
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
.
133
4.9.8
EINFLUSS
EINES
ZELLEINWAERTS
GERICHTETEN
PROTONENGRADIENTEN
AUF
DIE
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
IN
BASOLATERALE
PLASMAMEMBRANVESIKEL
.
135
5
DISKUSSION
.
137
5
1
HEPATOSELEKTIVITAT
DES
PRAVASTATINS
.
137
5.2
METABOLISIERUNG
VON
PRAVASTATIN
.
138
5.3
TRAEGERVERMITTELTER
TRANSPORT
.
139
5.4
KOMPETITIONSSTUDIEN
.
143
5.4
1
TRANSPORTSYSTEME
FUER
GALLENSAEUREN
.
143
5.4.2
TRANSPORTSYSTEME
FUER
BSP
.
144
5.4.3
ANDERE
TRANSPORTSYSTEME
.
145
5.5
TREIBENDE
KRAEFTE
DER
AUFNAHME
VON
PRAVASTATIN
.
146
5.6
SCHLUSSBEMERKUNG
.
149
INHALTSVERZEICHNIS
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
150
7
SUMMARY
.
151
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
152 |
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| spelling | Hummelsiep, Silke Verfasser aut Hepatozelluläre Aufnahme des HMG-CoA-Reduktase-Inhibitors Pravastatin von Silke Hummelsiep 1995 VIII, 167 S. graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Giessen, Univ., Diss., 1995 (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=016984222&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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