Genexpressionsanalyse mesangialer Proliferationen unter Anwendung der entzündlichen und proliferativen Marker in Laser-mikrodissezierten, Formalin-fixierten und Paraffin-eingebetteten Glomeruli der menschlichen Nierenbiopsien:
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2008
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis 7
1. Einleitung 10
1.1 IgA-Nephritis 10
1.2 Systemischer Lupus Erythematodes 12
1.3 Mesangialproliferative Glomerulonephritiden 14
1.4 Problematik der gegenwärtigen Diagnostik und mögliche
neue Wege 15
1.5 Mesangialzellen 17
1.6 Antikörper 18
1.6.1 VCAM-1 18
1.6.2 PDGF (i-Rezeptor 18
2. Aufgabenstellung und Aufbau der Arbeit 20
3. Material und Methoden 22
3.1 Allgemein verwendete Materialien 22
3.1.1 Gewebe und Zellen 23
3.2 Methoden 27
3.2.1 Immunhistologie 27
3.2.1.1 Vorversuche zur Optimierung des Protokolls 27
3.2.2 Polymerase-Kettenreaktion 29
3.2.2.1 RNA Extraktion 30
3.2.2.2 Reverse Transkriptase der gesamten RNA 31
3.2.2.3 Gelelektrophorese und die verwendeten Standards 33
3.2.2.4 Optimierung der RT-PCR Primer 34
3.2.2.5 Optimierung der Temperatur für die semi-nested PCR 35
3.2.3 Lasergestützte Mikrodissektion 35
3.2.3.1 Materialgewinnung aus paraffmiertem Gewebe 35
4. Ergebnisse 37
4.1 Immunhistologie 37
4.2 RT-PCR 41
4.3 Lasergestützte Mikrodissektion 43
5. Diskussion 45
5.1 Immunhistologie 45
5.2 Polymerase-Kettenreaktion 47
5.3 Lasergestützte Mikrodissektion 51
6. Zusammenfassung 54
7. Literaturverzeichnis 57
8. Vorveröffentlichungen 64
9. Lebenslauf 65
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Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis 7
1. Einleitung 10
1.1 IgA-Nephritis 10
1.2 Systemischer Lupus Erythematodes 12
1.3 Mesangialproliferative Glomerulonephritiden 14
1.4 Problematik der gegenwärtigen Diagnostik und mögliche
neue Wege 15
1.5 Mesangialzellen 17
1.6 Antikörper 18
1.6.1 VCAM-1 18
1.6.2 PDGF (i-Rezeptor 18
2. Aufgabenstellung und Aufbau der Arbeit 20
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3.1 Allgemein verwendete Materialien 22
3.1.1 Gewebe und Zellen 23
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3.2.3 Lasergestützte Mikrodissektion 35
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4.2 RT-PCR 41
4.3 Lasergestützte Mikrodissektion 43
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5.1 Immunhistologie 45
5.2 Polymerase-Kettenreaktion 47
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