Präklinische, strahlenbiologische Untersuchung zur kombinierten Wirkung von Topotecan oder Gemcitabin und Radiatio auf menschliche Plattenepithelkarzinomzellen und Fibroplasten in vitro:
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|---|---|
| adam_text | Einleitung
INHALT
1. EINLEITUNG 1
1.1 Zytostatika 2
1.2 Grundlagen der Strahlentherapie 3
1.3 Kombination Chemotherapie und Strahlentherapie 4
1.4 Topoisomerase 1 Inhibitor : Topotecan 6
1.5 Nukleosid-Analogon: Gemcitabin 9
1.6 Lungenfibrose: Zelluläre und molekulare Veränderungen 12
1.7 Rolle von TGf-ß1 bei der strahleninduzierten Lungenfibrose 13
1.8 Zielsetzung der Dissertation 14
2. MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 Chemikalien(A-Z) 15
2.2 Geräte und Einmalartikel 16
2.3 Verwendete Pharmakologische Substanzen 17
2.3.1. Gemcitabin 17
2.3.2. Topotecan 17
2.4 Zellinien 17
2.4.1. HSF6 17
2.4.2. SCC 4 / ATCC CRL-1624 17
2.5 Zellbiologische Arbeitstechniken 17
2.5.1. Steriles Arbeiten: 17
2.5.2. Zellkultur 18
2.5.3. DAPI Routinefärbung zum Nachweis von Mykoplasmen: 20
2.5.4. Koloniebildungstest (KoBi) 22
2.5.5. Behandlungsmedien 24
Einleitung
2.5.6. Bestrahlung: 24
2.5.7. Humaner TGF-B1 Immunoassay, Quantikine ( R D Systems ) 25
2.6 Versuche mit Kolonie Bildungstests (KoBi) 27
2.6.1. Dosis-Wirkungs-Beziehungen 27
2.6.2. Untersuchung der Strahlensensibilisierung unter Behandlung mit
Gemcitabin 27
2.6.3. Untersuchung der Strahlensensibilisierung unter Behandlung mit
Topotecan von HSF 6 Zellen und SCC 4 Zellen 29
2.6.4. Fraktionierte Bestrahlung unter Topotecan - Behandlung 30
2.7 Quantitative Bestimmung von aktiviertem TGF-B1 im
Zellkulturüberstand von HSF 6 Zellen unter Gemcitabinbehandlung 31
2.8 Apoptosenachweis mittels DAPI 31
3. ERGEBNISSE 32
3.1 Dosiswirkungskurven 32
3.1.1. Dosiswirkungskurven für HSF 6 Zellen und SCC 4 Zellen unter
Gemcitabinbehandlung 32
3.1.2. Dosiswirkungskurven für HSF 6 Zellen und SCC 4 Zellen unter
Toptecanbehandlung 33
3.2 Untersuchung der Strahlensensibilisierung von HSF 6 Zellen und
SCC 4 Zellen unter Behandlung mit Gemcitabin 34
3.3 Untersuchung der Strahlensensibilisierung von HSF 6 Zellen und
SCC 4 Zellen unter Behandlung mit Topotecan 42
3.4 Fraktionierte Bestrahlung unter Topotecan-Behandlung 50
3.5 Quantitative Bestimmung von aktiviertem TGf-131 im
Zellkulturüberstand von HSF6-Zellen unter Gemcitabin-Behandlung 54
3.6 Nachweis einer Topotecan induzierten Apoptose bei HSF 6 Zellen
und SCC 4 Zellen unter Topotecan-Behandlung mittels DAPI 58
4. DISKUSSION 60
4.1 Gemcitabin 60
4.2 Topotecan 64
Einleitung
5. ZUSAMMENFASSUNG 70
6. LITERATURVERZEICHNIS 71
7. DANKSAGUNG 76
8. LEBENSLAUF 77
|
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Einleitung
INHALT
1. EINLEITUNG 1
1.1 Zytostatika 2
1.2 Grundlagen der Strahlentherapie 3
1.3 Kombination Chemotherapie und Strahlentherapie 4
1.4 Topoisomerase 1 Inhibitor : Topotecan 6
1.5 Nukleosid-Analogon: Gemcitabin 9
1.6 Lungenfibrose: Zelluläre und molekulare Veränderungen 12
1.7 Rolle von TGf-ß1 bei der strahleninduzierten Lungenfibrose 13
1.8 Zielsetzung der Dissertation 14
2. MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 Chemikalien(A-Z) 15
2.2 Geräte und Einmalartikel 16
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2.3.1. Gemcitabin 17
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2.4.2. SCC 4 / ATCC CRL-1624 17
2.5 Zellbiologische Arbeitstechniken 17
2.5.1. Steriles Arbeiten: 17
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2.5.3. DAPI Routinefärbung zum Nachweis von Mykoplasmen: 20
2.5.4. Koloniebildungstest (KoBi) 22
2.5.5. Behandlungsmedien 24
Einleitung
2.5.6. Bestrahlung: 24
2.5.7. Humaner TGF-B1 Immunoassay, Quantikine ( R D Systems ) 25
2.6 Versuche mit Kolonie Bildungstests (KoBi) 27
2.6.1. Dosis-Wirkungs-Beziehungen 27
2.6.2. Untersuchung der Strahlensensibilisierung unter Behandlung mit
Gemcitabin 27
2.6.3. Untersuchung der Strahlensensibilisierung unter Behandlung mit
Topotecan von HSF 6 Zellen und SCC 4 Zellen 29
2.6.4. Fraktionierte Bestrahlung unter Topotecan - Behandlung 30
2.7 Quantitative Bestimmung von aktiviertem TGF-B1 im
Zellkulturüberstand von HSF 6 Zellen unter Gemcitabinbehandlung 31
2.8 Apoptosenachweis mittels DAPI 31
3. ERGEBNISSE 32
3.1 Dosiswirkungskurven 32
3.1.1. Dosiswirkungskurven für HSF 6 Zellen und SCC 4 Zellen unter
Gemcitabinbehandlung 32
3.1.2. Dosiswirkungskurven für HSF 6 Zellen und SCC 4 Zellen unter
Toptecanbehandlung 33
3.2 Untersuchung der Strahlensensibilisierung von HSF 6 Zellen und
SCC 4 Zellen unter Behandlung mit Gemcitabin 34
3.3 Untersuchung der Strahlensensibilisierung von HSF 6 Zellen und
SCC 4 Zellen unter Behandlung mit Topotecan 42
3.4 Fraktionierte Bestrahlung unter Topotecan-Behandlung 50
3.5 Quantitative Bestimmung von aktiviertem TGf-131 im
Zellkulturüberstand von HSF6-Zellen unter Gemcitabin-Behandlung 54
3.6 Nachweis einer Topotecan induzierten Apoptose bei HSF 6 Zellen
und SCC 4 Zellen unter Topotecan-Behandlung mittels DAPI 58
4. DISKUSSION 60
4.1 Gemcitabin 60
4.2 Topotecan 64
Einleitung
5. ZUSAMMENFASSUNG 70
6. LITERATURVERZEICHNIS 71
7. DANKSAGUNG 76
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