Therapie der Harnröhrenstriktur in vitro:
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler
2009
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Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schriftenreihe: | Edition scientifique
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IMAGE 1
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS IX
1. EINLEITUNG 1
2. LITERATURUEBERSICHT 2
2.1 HISTOLOGISCHER AUFBAU DER HARNABLEITENDEN WEGE 2
2.2 ZYTOSKELETTPROTEINE: ZYTOKERATINE (CK) 4
2.3 ANATOMIE DER MAENNLICHEN HARNROEHRE 5
2.4 DIE AETIOLOGIE DER HARNROEHRENSTRIKTUR 7
2.5 DIAGNOSTIK DER HARNROEHRENSTRIKTUR 8
2.6 GESCHICHTE UND ENTWICKLUNG DER BEHANDLUNG VON HARNROEHRENSTRIKTUREN
10
2.7 THERAPIE DER HARNROEHRENSTRIKTUR 14
2.7.1 URETHROTOMIA INTERNA NACH SACHSE 14
2.7.2 TRANSURETHRALE LASERURETHROTOMIE 15
2.7.3 BOUGIERUNG DER HARNROEHRE 16
2.7.4 END-ZU-END ANASTOMOSE 17
2.7.5 OFFENE HARNROEHRENPLASTIKEN 17
2.8 TISSUE ENGINEERING EINE MOEGLICHKEIT ZUR ENTWICKLUNG NEUER
THERAPIEANSAETZE 19
3. ZIELSTELLUNG 22
4. MATERIAL UND METHODEN 24
4.1 ZELLKULTUR VON PORCINEN UROTHELZELLEN 24
4.1.1 GEWINNUNG VON UROTHELZELLEN AUS HARNLEITERN UND -BLASEN 24
4.1.2 ZELLKULTURBEDINGUNGEN 25
4.1.3 PASSAGIEREN VON UROTHELZELLEN 25
4.1.4 BESTIMMUNG DER ZELLKONZENTRATION MITTELS TRYPANBLAUFAERBUNG
(VITALFAERBUNG) 25
4.1.5 KRYOKONSERVIERUNG VON ZELLKULTUREN 26
4.1.6 AUFTAUEN VON ZELLEN 26
4.2 PHAENOTYPISIERUNG VON IN VITRO KULTIVIERTEN PORCINEN UROTHELZELLEN 26
4.2.1 IMMUNZYTOCHEMIE VON KULTIVIERTEN UROTHELZELLEN MIT DEM DAKO
ENVISION* SYSTEM
26
4.2.2 PHAENOTYPISIERUNG DER PRIMAEREN PORCINEN UROTHELZELLEN AUF
PROTEINEBENE MITTELS
WESTERNBLOTANALYSE 28
4.2.2.1 AUFARBEITUNGEN DER UROTHELZELLEN FUER DEN WESTERNBLOT 28
4.2.2.2 BESTIMMUNGEN DER PROTEINKONZENTRATION NACH BRADFORD 29
4.2.2.3 SDS- POLYACRYLAMID GELELEKTROPHORESE 29
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN HTTP://D-NB.INFO/994761937
DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
4.2.2.4 WESTERN BLOT 29
4.3 IMMUNHISTOLOGIE VON GEWEBESCHNITTEN MIT DEM DAKO ENVISION* SYSTEM 31
4.4 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS DES FLUORESZENSFARBSTOFFES PKH26 AUF
PORCINE
UROTHELZELLEN 32
4.4.1 PKH26 MARKIERUNG ZELLEN 32
4.4.2 PROLIFERATIONSUNTERSUCHUNG ZUM EINFLUSS VON PKH26 AUF PORCINE
UROTHELZELLEN
MITTELS BRDU-TEST 33
4.4.3 WST-1-TEST ZUR MESSUNG DER ZELLVITALITAET UNTER DEM EINFLUSS VON
PKH26 AUF DIE
UROTHELZELLEN 33
4.4.4 LANGZEITSTUDIE ZUR STABILITAET DER PKH26-MAKIERUNG VON
UROTHELZELLEN IN VITRO 34
4.5 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS VON STABILISIERTER HYALURONSAEURE AUF
PORCINE UROTHELZELLEN
34
4.5.1 WST-1-TEST ZUR MESSUNG DER ZELLVITALITAET ZUM EINFLUSS VON
VERSCHIEDENEN
HYALURONSAEUREKONZENTRATIONEN 34
4.5.2 UNTERSUCHUNG ZUM ADHAERENZVERHALTEN PORCINER UROTHELZELLEN IN
ABHAENGIGKEIT
VERSCHIEDENER HYALURONSAEUREKONZENTRATIONEN 35
4.6 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS VON HYALURONSAEURE AUF PORCINE
UROTHELZELLEN IM KO- KULTUR MODELL 35
4.6.1 KULTIVIERUNG VON MURINEN FIBROBLASTEN (NIH3T3) 35
4.6.2 KO-KULTUR VON MURINEN FIBROBLASTEN (NIH3T3) MIT PORCINEN
UROTHELZELLEN 36
4.6.3 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER KO-KULTUREN MITTELS DES PAN-
ZYTOKERATINMARKERS AE1/AE3 37
4.6.4 TRANSMISSIONSELEKTOMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG DER KO-KULTUREN 37
4.6.5 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG DER KO-KULTUREN 39
5 ERGEBNISSE 40
5.1 PHAENOTYPISIERUNG VON KULTIVIERTEN PORCINEN UROTHELZELLEN 40
5.1.1 IMMUNZYTOCHEMIE VON KULTIVIERTEN PORCINEN UROTHELZELLEN 40
5.1.2 WESTERNBLOTANALYSE VON KULTIVIERTEN PORCINEN UROTHELZELLEN 43
5.2 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN AN NATIVER PORCINER HARNBLASE UND
NATIVEN PORCINEN
HARNLEITER 48
5.2.1 ZYTOKERATINMUSTER DES HARNBLASENEPITHELS 48
5.2.2 ZYTOKERATINMUSTER DES PORCINEN HARNLEITERS 50
5.3 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS DES FLUORESZENZFARBSTOFFES PKH26 AUF
PORCINE
UROTHELZELLEN 51
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
5.3.1 WIRKUNG DER PKH26-MARKIERUNG AUF DIE VITALITAET VON PORCINEN
UROTHELZELLEN 52
5.3.2 WIRKUNG DER PKH26-MARKIERUNG AUF DIE PROLIFERATION PORCINER
UROTHELZELLEN 53
5.3.3 LANGZEITSTUDIE ZUR STABILITAET DER PKH26 MARKIERUNG VON
UROTHELZELLEN IN VITRO. 54
5.3.4 VERDOPPLUNGSZEIT VON PKH26 MARKIERTEN UROTHELZELLEN 57
5.4 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS VON STABILISIERTER HYALURONSAEURE MIT
DEXTRANOMER AUF
PORCINE UROTHELZELLEN 58
5.4.1 WIRKUNG VON STABILISIERTER HYALURONSAEURE AUF DIE VITALITAET
PORCINER UROTHELZELLEN
58
5.4.2 DAS ADHAERENZVERHALTEN PORCINER UROTHELZELLEN IN ABHAENGIGKEIT VON
VERSCHIEDENEN
HYALURONSAEUREKONZENTRATIONEN 59
5.5 KO-KULTUR VON PORCINEN UROTHELZELLEN MIT MURINEN FIBROBLASTEN MIT
UND OHNE
HYALURONSAEURE 61
5.5.1 IMMUNHISTOLOGIE DER KO-KULTUREN MIT DEM PAN-ZYTOKERATINMARKER
AE1/AE3 61
5.5.2 NACHWEIS DES EINFLUSSES VON STABILISIERTER HYALURONSAEURE MIT
DEXTRANOMEREN AUF DIE
ZELLULAERE MORPHOLOGIE IN DER KO-KULTUR MITTELS
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE 64
5.5.3 NACHWEIS DES EINFLUSSES VON STABILISIERTER HYALURONSAEURE MIT
DEXTRANOMEREN AUF DIE
ZELLULAERE MORPHOLOGIE IN DER KO-KULTUR MITTELS
TRANSMISSIONSELEKTRONEN-MIKROSKOPIE
(TEM) 68
6. DISKUSSION 77
6.1 PHAENOTYPISIERUNG VON KULTIVIERTEN PORCINEN UROTHELZELLEN 78
6.2 PKH26-MARKIERUNG PORCINER UROTHELZELLEN IN VITRO 81
6.3 BIOKOMPATIBILITAETSUNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS VON STABILISIERTER
HYALURONSAEURE MIT
DEXTRANOMEREN AUF PORCINE UROTHELZELLEN 84
6.4 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS VON STABILISIERTER HYALURONSAEURE AUF
PORCINE UROTHELZELLEN
IM KO-KULTURMODELL MIT MURINEN FIBROBLASTEN 88
6.4.1 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN DER KO-KULTUREN MITTELS
PAN-ZYTOKERATIN- MARKER AE1/AE3 88
6.4.2 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNGEN DER KO-KULTUREN 89
6.4.3 TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNGEN DER
KO-KULTUREN 89
7. AUSBLICK 92
8. ZUSAMMENFASSUNG 93
9. SUMMA RY 95
10. LITERATURUEBERSICHT 97
11. DANKSAGUNG 105
IMAGE 4
INHALTSVERZEICHNIS
12. ERKLAERUNG 106 |
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