Kinetik der Insulinfreisetzung Langerhansscher Inseln aus Polysulfon-Membrankapillaren:
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| adam_text | SW - (O30 KINETIK DER INSULINFREISETZUNG LANGERHANSSCHER INSELN AUS
POLYSULFON-MEMBRANKAPILLAREN DISSERTATION DER FAKULTAET FUER CHEMIE UND
PHARMAZIE DER EBERHARD-KARLS-UNIVERSITAET TUEBINGEN ZUR ERLANGUNG DES
GRADES EINES DOKTORS DER NATURWISSENSCHAFTEN 1997 VORGELEGT VON HOLGER
SCHWARZ INHALTSVERZEICHNIS VII INHALT INHALTSVERZEICHNIS VII
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS XIII 1 EINLEITUNG 1 1.1 PHYSIOLOGIE DES
KOHLENHYDRATSTOFFWECHSELS 1 1.1.1 DIE LANGERHANSSCHE INSEL 1 1.1.2
INITIATOREN UND MODULATOREN DER INSULINSEKRETION 2 1.1.3 DAS
INKRETINSYSTEM 4 1.1.4 EINFLUSS DES VEGETATIVEN NERVENSYSTEMS UND
PEPTIDERGER NEURO- TRANSMITTER AUF DIE INSULINSEKRETION 7 1.2 DIABETES
MELLITUS 9 1.2.1 DIABETESFORMEN 9 1.2.2 STOERUNGEN DES
INTERMEDIAERSTOFFWECHSELS BEI DIABETES MELLITUS 10 1.3 DIABETISCHE
FOLGEERKRANKUNGEN 11 1.3.7 MIKROANGIOPATHIE 11 1.3.2 MAKROANGIOPATHIE 12
1.4 THERAPIE DES DIABETES MELLITUS 13 1.4.1 THERAPIE DES TYP-IL-DIABETES
13 1.4.2 THERAPIE DES TYP-I-DIABETES 13 1.5 TRANSPLANTATION 15 1.5.1
PANKREASTRANSPLANTATION 15 1.5.2 INSELTRANSPLANTATION 17 1.6
BIOARTIFIZIELLES PANKREAS 19 1.6.1 MIKROVERKAPSELTE INSELN 20 1.6.2
DIFFUSIONSKAMMERN 22 1.6.3 VASKULAERES BIOARTIFIZIELLES PANKREAS 23 1.6.4
LITERATUROBERBLICK ZU STUDIEN MIT BIOARTIFIZIELLEN TRANSPLANTATIONEN 25
1.7 MEMBRANEN 30 VIII INHALTSVERZEICHNIS 1.7.1 DEFINITION: MEMBRAN 30
1.7.2 STOFFAUSTAUSCH UEBER SEMIPERMEABLE MEMBRANEN 30 1.7.3
MEMBRANMORPHOLOGIE 33 1.7.4 HERSTELLUNG VON MEMBRANKAPILLAREN 33 1.8
FRAGESTELLUNG 35 2 MATERIAL 39 2.1 VERSUCHSTIERE 39 2.2 GERAETE 39 2.3
CHEMIKALIEN 40 2.4 LOESUNGEN 42 2.4.1
KREBS-RINGER-HEPES-PUFFER(KRH-PUFFER) 42 2.4.2 KULTURMEDIUM RPM11640 .
43 2.4.3 FOETALES KAELBERSERUM (FKS) 43 2.4.4 ASSAY-PUFFER FUER DEN
INSULIN-RADIOIMMUNOASSAY (FA. LINCO) 44 2.4.5 PUFFER FUER DIE
RATTENINSULINSTANDARDLOESUNG 44 2.4.6 MEERSCHWEINCHEN-ANIKOERPERGEGEN
RATTENINSULIN (GUINEA PIG ANTI RAT INSULIN SERUM, FA. LINCO) 44 2.4.7
MEERSCHWEINCHEN IGG CARRIER (GUINEA PIG IGG CARRIER, FA. LINCO) 44 2.4.8
ZIEGEN-ANTIKOERPER GEGEN MEERSCHWEINCHEN IGG (GOATANTI GUINEA PIG IGG
SERUM, FA. LINCO) 45 2.4.9 12SJ INSULIN (FA. HOECHST) 45 2.4.
LOGASTROINTESTINALE PEPTIDE 45 2.4.1 IPOLYSULFON 45 2.4.12POLYSULFON -
MEMBRANKAPILLAREN 46 3 METHODEN 47 3.1 ISOLIERUNG DER LANGERHANSSCHEN
INSELN 47 3.1.1 PRAEPARATION DES PANKREAS 47 3.1.2 INSELISOLIERUNG 47 3.2
PERIFUSION 48 3.2.1 PERIFUSIONSSYSTEM 48 3.3 PROTEIN-COATING DER
MEMBRANKAPILLAREN 53 3.3.1 VORBEREITUNG DER LAMINAR-AIR-FLOW-BOX 53
INHALTSVERZEICHNIS IX 3.3.2 INKUBATION DER MEMBRANKAPILLAREN . 53 3.4
IMPLANTATION VON LANGERHANSSCHEN INSELN IN MEMBRANKAPILLAREN 53 3.5
PERIFUSIONSVERSUCHE ZUR BESTIMMUNG DER INSULINFREISETZUNG 54 3.5.1
VORBEREITUNGEN ZUR PERIFUSION 54 3.5.2 VERSUCHSDESIGN: PERIFUSION 54
3.5.3 REINIGUNG DES PERIFUSIONSSYSTEMS 55 3.6 RADIOIMMUNOLOGISCHE
BESTIMMUNG VON INSULIN 56 3.6. 1 MESSPRINZIP DES RADIOIMMUNOASSAYS FUER
INSULIN 56 3.6.2 DURCHFUEHRUNG DER RADIOIMMUNOLOGISCHEN INSULINBESTIMMUNG
56 3.6.3 MESSUNG DER INSULINPROBEN 57 3.7 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
(REM) 5 8 3.7.1 MESSPRINZIP 58 3.7.2 BESCHLEUNIGUNGSSPANNUNG 59 3.7.3
PROBENVORBEREITUNG 59 3.7.4 PRAEPARATMONTAGE 59 3.7.5 SPUTTERN DER
MEMBRANKAPILLAREN (KATHODENZERSTAEUBUNG) 60 3.7.6
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE AUFNAHMEN 60 3.8 BERECHNUNG DER FLAECHE
UNTER DEN INSULINSEKRETIONSKURVEN (AUC) 61 3.9 STATISTISCHE AUSWERTUNG
61 4 ERGEBNISSE 62 4.1 UNTERSUCHUNGEN ZUR INSULIN FREISETZUNG
LANGERHANSSCHER INSELN AUS DER NATIVEN 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRAN-KAPILLARE 62 4.1.1 INSULIN FREISETZUNG VON
FREI FLOATIERENDEN LANGERHANSSCHEN INSELN 63 4.1.2 INSULINFREISETZUNG
VON FREI FLOATIERENDEN LANGERHANSSCHEN INSELN AUSSERHALB DER NATIVEN 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT- MEMBRANKAPILLARE 65 4.1.3 INSULIN FREISETZUNG
LANGERHANSSCHER INSELN AUS DER NATIVEN 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE 67 4.1.4 VERGLEICH DER
INSULINFREISETZUNG (FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC) VON FREI FLOATIERENDEN
INSELN, FREI FLOATIERENDEN INSELN AUSSERHALB EINER NATIVEN 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE UND INSELN IN EINER NATIVEN 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE 69 INHALTSVERZEICHNIS 4.2
UNTERSUCHUNGEN ZUR INSULINFREISETZUNG LANGERHANSSCHER INSELN AUS MIT
FOETALEM KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 F POLYSULFON DOPPELHAUT-
MEMBRANKAPILLAREN 72 4.2.1 INSULINFREISETZUNG LANGERHANSSCHER INSELN AUS
MIT FOETALEM KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN 72 4.2.2 VERGLEICH DER
INSULINFREISETZUNG (FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC) VON FREI FLOATIERENDEN
INSELN UND INSELN IN EINER 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT- MEMBRANKAPILLARE
NACH 24-STUENDIGER INKUBATION DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM
KAELBERSERUM 75 4.2.3 VERGLEICH DER INSULINFREISETZUNG (FLAECHE UNTER DER
KURVE, AUC) VON INSELN IN EINER 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE NACH 24- STUENDIGER INKUBATION DES
MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM UND VON INSELN IN EINER
NATIVEN 62 F POLYSULFON- DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE * 78 4.3
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNGEN AN 62 F POLYSULFON-
DOPPELHAUT- MEMBRANKAPILLAREN 81 4.3:1 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG DER NATIVEN 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE 82
4.3.2 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG DER MIT FOETALEM
KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRAN- KAPILLARE
83 4.3.3 STRUKTURELLE MODIFIKATION DER 62 F
POLYSULFON-DOPPEHAUT-MEMBRAN- KAPILLARE 84 4.3.4
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG DER NATIVEN 62 FL
POLYSULFON-MEMBRANKAPILLARE 84 4.3.5 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG DER MIT FOETALEM KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 FL
POLYSULFON-MEMBRANKAPILLARE 86 4.4 UNTERSUCHUNGEN ZUR INSULINFREISETZUNG
LANGERHANSSCHER INSELN AUS LASERGESCHAELTEN 62 FL
POLYSULFON-MEMBRAN-KAPILLAREN 8 7 4.4.1 INSULINFREISETZUNG
LANGERHANSSCHER INSELN AUS MIT FOETALEM KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 FL
POLYSULFON-MEMBRANKAPILLAREN 87 4.4.2 VERGLEICH DER INSULINFREISETZUNG
(FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC) VON FREI FLOATIERENDEN INSELN, INSELN IN
EINER 62 FL POLYSULFON- MEMBRANKAPILLARE NACH 24-STUENDIGER INKUBATION
DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM UND INSELN IN EINER 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRAN- KAPILLARE NACH 24-STUENDIGER INKUBATION
DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM 90 INHALTSVERZEICHNIS XI
4.5 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS VON INKRETINHORMONEN AUF DIE
INSULINFREISETZUNG LANGERHANSSCHER INSELN AUS MIT FOETALEM KAELBERSERUM
VORBEHANDELTEN 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN 94 4.5.1
EINFLUSS VON GASTRIC-INHIBITORY POLYPEPTIDE (GIP) AUF DIE INSULIN-
FREISETZUNG FREI FLOATIERENDER LANGERHANSSCHER INSELN 94 4.5.2 VERGLEICH
DER INSULINFREISETZUNG (FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC) VON: FREI
FLOATIERENDEN INSELN UNTER DEM EINFLUSS VON 16,7 MM GLUCOSE UND 5 NM GIP
UND FREI FLOATIERENDEN INSELN UNTER DEM EINFLUSS VON 16,7 MM GLUCOSE 96
4.5.3 EINFLUSS VON GIP AUF DIE INSULIN-FREISETZUNG LANGERHANSSCHER INSELN
AUS MIT FOETALEM KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 F POLYSULFOEN-DOPPELHAUT-
MEMBRANKAPILLAREN 98 4.5.4 EINFLUSS VON GIP AUF DIE INSULINFREISETZUNG
FREI FLOATIERENDER INSELN AUSSERHALB EINER MIT FOETALEM KAELBERSERUM
VORBEHANDELTEN 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE 100 4.5.5
EINFLUSS VON GIP AUF DIE INSULINFREISETZUNG LANGERHANSSCHER INSELN AUS
EINER UEBER 72 STUNDEN MIT FOETALEM KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE 102 4.5.6 VERGLEICH DER
INSULINFREISETZUNG (FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC) VON: INSELN IN EINER 62
F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE NACH 24-STUENDIGER INKUBATION
DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM (16,7 MM GLUCOSE + 5NM
GIP), INSELN IN EINER 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE NACH
24-STUENDIGER INKUBATION DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM
(16,7 MM GLUCOSE) UND INSELN IN EINER 62 FL POLYSULFON-MEMBRANKAPILLARE
NACH 24-STUENDIGER INKUBATION DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM
KAELBERSERUM (16,7 MM GLUCOSE) 104 4.5.7 VERGLEICH DER INSULINFREISETZUNG
(FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC) VON: FREI FLOATIERENDEN INSELN UND INSELN
AUSSERHALB EINER 62 F POLYSULFON- DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE NACH
24-STUENDIGER INKUBATION DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM
UNTER DEM EINFLUSS VON 16,7MM GLUCOSE UND 5 NM GIP 108 4.5.8 VERGLEICH
DER INSULINFREISETZUNG (FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC) VON: FREI
FLOATIERENDEN INSELN, INSELN IN EINER 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-
MEMBRANKAPILLARE NACH 24-STUENDIGER INKUBATION DES MEMBRANPOLYMERS IN 10%
FOETALEM KAELBERSERUM UND INSELN IN EINER 62 F POLYSULFON-
DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLARE NACH 72-STUENDIGER INKUBATION DES
MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM UNTER DEM EINFLUSS VON 16,7 MM
GLUCOSE UND 5 NM GIP 111 XII INHALTSVERZEICHNIS 4.5.9 EINFLUSS VON
GLUCAGON-LIKE PEPTIDE-1 {7 . 31) AMIDE (GLP-1) AUF DIE INSULIN-
FREISETZUNG LANGERHANSSCHER INSELN AUS MIT FOETALEM KAELBERSERUM
VORBEHANDELTEN 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN 115
4.5.10VERGLEICH DER INSULINFREISETZUNG (FLAECHE UNTER DER KURVE, AUC)
VON: FREI FLOATIERENDEN INSELN UND INSELN IN EINER 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT- MEMBRANKAPILLARE NACH 72- STUENDIGER INKUBATION
DES MEMBRANPOLYMERS IN 10% FOETALEM KAELBERSERUM UNTER EINFLUSS VON 5 NM
GLP-1 UND 11,1 MM GLUCOSE 118 5 DISKUSSION 121 5.1 INSULINFREISETZUNG
AUS DER NATIVEN 62 F-POLYSULFON-DOPPELHAUT- MEMBRANKAPILLARE 121 5.2
INSULINFREISETZUNG AUS MIT FOETALEM KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62
F-POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN 122 5.3 ULTRASTRUKTUR,
OBERFLAECHENBESCHAFFENHEIT UND STABILITAET DER POLYSULFON-
MEMBRANKAPILLAREN 124 5.3.1 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN
124 5.3.2 62 FL POLYSULFON-MEMBRANKAPILLAREN 124 5.4 INSULINFREISETZUNG
AUS LASERGESCHAELTEN 62 FL POLYSULFON-MEMBRANKAPILLAREN 125 5.5 EINFLUSS
VON INKRETINHORMONEN AUF DIE INSULIN FREISETZUNG AUS MIT FOETALEM
KAELBERSERUM VORBEHANDELTEN 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN
126 5.5.1 EINFLUSS VON GASTRIC-INHIBITORY POLYPEPTIDE (GIP) AUF DIE
INSULIN- FREISETZUNG AUS 62 F POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN
126 5.5.2 EINFLUSS VON GLUCAGON-LIKE PEPTIDE-1 (7 . 37) AMIDE (GLP-1) AUF
DIE INSULIN- FREISETZUNG AUS 62 F
POLYSULFON-DOPPELHAUT-MEMBRANKAPILLAREN 128 5.6 MEMBRAN-SCREENING 129
5.6.1 DIFFUSIONSSTUDIEN 129 5.6.2 STATISCHE INKUBATION VON IN DAS
MEMBRANMATERIAL EINGESCHLOSSENEN LANGERHANSSCHEN INSELN 130 5.6.3
PERIFUSION VON IN DAS MEMBRANMATERIAL EINGESCHLOSSENEN LANGERHANSSCHER
INSELN 130 5.6.4 HYDROGEL-EINBETTUNG LANGERHANSSCHER INSELN 130 5.6.5
IN-VIVO-UNTERSUCHUNGEN 131 6 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 132
INHALTSVERZEICHNIS XIII 6.1 ZUSAMMENFASSUNG 132 6.1.1 FRAGESTELLUNG 132
6.1.2 ERGEBNISSE 133 6.1.3 SCHLUSSFOLGERUNG 134 6.2 AUSBLICK 135 7
LITERATURVERZEICHNIS 137
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