Cardenolide in Crown-gall-Tumoren von Digitalis lanata Ehrh.:
Gespeichert in:
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Halle-Wittenberg
1994
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adam_text | - EI* CARDENOLIDE IN CROWN-GALL-TUMOREN VON DIGITALIS LANATA EHRH.
DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DES AKADEMISCHEN GRADES DOCTOR RERUM
NATURALIUM (DR. RER. NAT) VORGELEGT DER
MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICHEN FAKULTAET DER
MARTIN-LUTHER-UNIVERSITAET HALLE-WITTENBERG VON HERRN WOLFRAM PINKWART
GEBOREN AM: 04. MAERZ 1964 IN: EISENACH GUTACHTER: 2. */. FT. U/T 3.
PRO/. L/ . HALLE (SAALE), Z . 2 . / ^ R A, GLIEDERUNG 1. EINLEITUNG UND
ZIELSTELLUNG 6 2. BILDUNG VON CROWN-GALL-TUMOREN DURCH INFEKTION VON
DIGITALIS LANATA MIT AGROBACTERIUM TUMEFACIENS 8 2.1. GRUNDLAGEN DER
TRANSFORMATION 8 2.2. CHARAKTERISIERUNG DES VERWENDETEN BAKTERIENSTAMMES
10 2.3. INFEKTION VON DIGITALIS LANATA . 11 2.3.1. INFEKTION VON
GEWAECHSHAUSPFLANZEN 11 2.3.2. INFEKTION VON IN-VITRO-KULTUREN 13 2.3.3.
JAHRESZEITLICHE ABHAENGIGKEIT DER INFEKTIONSEFFIZIENZEN BEI
GEWAECHSHAUSPFLANZEN UND IN-VITRO-PFLANZEN 14 3. CHARAKTERISIERUNG DER
GEBILDETEN TUMORE 16 3.1. NACHWEIS DER TRANSFORMATION 16 3.1.1. NACHWEIS
DER OCTOPINSYNTHESE 16 3.1.2. WACHSTUMSVERHALTEN 17 3.2. MORPHOLOGIE 19
3.3. REGENERATION VON PFLANZEN AUS CROWN-GALL-TUMOREN 22 4.
CARDENOLIDGEHALT UND -SPEKTRUM DER CROWN-GALL-TUMORE 28 4.1. UEBERSICHT
UEBER DIE CARDENOLIDE DER GATTUNG DIGITALIS 28 4.2. VERGLEICH DES
CARDENOLIDGEHALTES UND -SPEKTRUMS BEI GEWAECHSHAUSKULTUREN 30 4.2.1.
BLATTWUECHSIGE TUMORE 30 4.2.2. STENGELWUECHSIGE TUMORE 33 4.3. VERGLEICH
DES CARDENOLIDGEHALTES UND -SPEKTRUMS BEI IN-VITRO-KULTUREN 35 4.3.1.
FRISCH VONEINANDER GETRENNTE TUMORE UND BLAETTER 35 4.3.2.
IN-VITRO-TUMORLINIEN 37 4.3.3. REGENERATE DER TUMORLINIE IV 38 4.4.
SCHLUSSFOLGERUNGEN 41 5. UNTERSUCHUNGEN ZUM TRANSPORT VON CARDENOLIDEN IN
CROWN-GALL- TUMORE 42 5.1. AUSWASCHVERSUCHE DURCH KULTIVIERUNG IM
FLUESSIGMEDIUM 42 5.2. FUETTERUNG VON CARDENOLIDEN IM FLUESSIGMEDIUM AN
IN-VITRO-TUMORLINIEN 43 5.3. FUETTERUNG VON RADIOAKTIV MARKIERTEN
CARDENOLIDEN 49 5.3.1. FUETTERUNG AN ISOLIERTE BLAETTER 49 5.3.2.
FUETTERUNG UEBER 5.4. APPLIKATIONEN VON CARDENOLIDEN IN DAS NATUERLICHE
SYSTEM BLATT/TUMOR MITTELS INJEKTION IN DEN BLATTNERV 53 5.5.
UNTERSUCHUNGEN ZUM CARDENOLID-TRANSPORT IM KUENSTLICHEN SYSTEM
BLATT/IN-VITRO-TUMORLINIE 55 6. UNTERSUCHUNG DER AKTIVITAETEN VON ENZYMEN
DER CARDENOLID-BIOTRANSFORMATION IN CROWN-GALL-TUMOREN,
IN-VITRO-TUMORLINIEN UND REGENERATEN AUS TUMORLINIE IV 57 6.1.
ALLGEMEINES 57 6.2. ACETYL-COENZYM A:DIGITOXIN 15 -O-ACETYLTRANSFERASE
58 6.3. LANATOSID 15 -O-ACETYLESTERASE 58 6.4. UDP-GLUCOSE:DIGITOXIN
16 -O-GLUCOSYLTRANSFERASE 58 6.5. CARDENOLID 16 -O-GLUCOHYDROLASE 58
6.6. UNTERSUCHUNG FRISCHER CROWN-GALL-TUMORE 59 6.7. UNTERSUCHUNG VON
IN-VITRO-TUMORLINIEN 61 6.8. UNTERSUCHUNG VON REGENERATEN DER TUMORLINIE
IV 63 7. DISKUSSION 65 8. METHODEN UND MATERIALIEN 77 8.1. KULTIVIERUNG
VON DIGITA/R,S-/ANATA-GEWAECHSHAUSPFLANZEN 77 8.2. KULTIVIERUNG VON
DIGITA/W-ZANARA-M-VITRO-KULTUREN 77 8.2.1. NAEHRMEDIEN 77 8.2.2.
SAMENBUERTIGE IN-VITRO-PFLANZEN 78 8.2.3. IN-VITRO-KLONSPROSSE P15 79
8.2.4. KULTIVIERUNG DER TUMORLINIEN 79 8.2.5. KULTIVIERUNG DER DURCH
REGENERATION GEWONNENEN PFLANZEN 79 8.2.6. KULTIVIERUNG
NICHTTRANSFORMIERTER ZELLSUSPENSIONEN 80 8.3. KULTIVIERUNG DER
VERWENDETEN AGROBAKTERIEN 80 8.4. WUNDINFEKTION ZUR TRANSFORMATION 80
8.5. NACHWEIS DER TRANSFORMATION 80 8.5.1. NACHWEIS DES
HORMONAUTOTROPHEN WACHSTUMS 80 8.5.2. NACHWEIS DER OCTOPINBILDUNG 81
8.6. METHODEN ZUM NACHWEIS DER CARDENOLIDE 82 8.6.1. PROBENAUFBEREITUNG
82 8.6.2. HPLC 82 8.6.3. DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE 84 8.7. FUETTERUNG
VON CARDERIOLIDEN 84 8.7.1. AUFNAHME DURCH TUMORLINIEN 84 8.7.2.
AUFNAHME RADIOAKTIV MARKIERTER CARDENOLIDE DURCH ISOLIERTE BLAETTER 85
8.7.3. AUFNAHME RADIOAKTIV MARKIERTER CARDENOLIDE UEBER DIE BLATTSPREITE
85 8.7.4. INJEKTION IN DEN BLATTNERV 85 8.8. ENZYMBESTIMMUNGEN 86 8.8.1.
ACETYL-COENZYM ARDIGITOXIN 15 -O-ACETYLTRANSFERASE 86 8.8.2. LANATOSID
15 -O-ACETYLESTERASE 87 8.8.3. UDP-GLUCOSE:DIGITOXIN
16 -O-GLUCOSYLTRANSFERASE 87 8.8.4. CARDENOLID 16 -O-GLUCOHYDROLASE 87
8.8.5. PROTEINBESTIMMUNG 88 8.9. STERILISIERVERFAHREN 88 8.10.
VERWENDETE SONDERCHEMIKALIEN 88 8.11. GERAETELISTE 89 9. ZUSAMMENFASSUNG
91 10. LITERATURVERZEICHNIS 93
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