Regulation der Reningenexpression durch Calcium:
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 Einleitung 8
1.1 Das Renin-Angiotensin-Aldosteron-System 8
1.1.01 Reningen 9
1.1.02 Präprorenin-mRNA 9
1.1.03 Präprorenin 9
1.1.04 Prorenin 10
1.1.05 Renin 10
1.1.06 Reninsekretion aus der juxtaglomerulären Zelle 11
1.1.06.1 Transformation und Retransformation 11
1.1.06.2 Extrazelluläre Osmolarität und Vesikelschwellen 12
1.1.06.3 Aktin-Myosin- Schild 13
1.1.07 Angiotensinogen 13
1.1.08 Angiotensin-Converting-Enzyme (ACE) 14
1.1.09 Angiotensin II 14
1.1.10 Aldosteron 17
1.2 Physiologische Faktoren der Reninsynthese und -Sekretion 18
1.2.01 Barorezeptor-Mechanismus 18
1.2.02 Sympathisches Nervensystem 21
1.2.03 Kochsalzhaushalt und Macula densa-Mechanismus 21
1.2.04 Stickstoffmonoxid (NO) 24
1.2.05 Atriales Natriuretisches Peptid (ANP) 25
1.2.06 Prostaglandine 26
1.2.07 Endothelin 29
1.2.08 Zytokine (IL-1 und TNF-a) 30
1.2.09 Adrenomedullin 31
4
1.2.10 Membraneigenschaften der JGC 32
1.2.10.1 Rolle membranpermeabler Ionen 32
1.2.10.2 Ionenkanäle der Plasmamembran 33
1.2.10.2.1 Kalium-Kanal 33
1.2.10.2.2 Chlorid-Kanal 33
1.2.10.2.3 Calcium-Kanäle 34
1.2.10.2.3.1 potentialgesteuerte Calcium-Kanäle (POCC) 34
1.2.10.2.3.2 Calciumgesteuerte Calcium-Kanäle (SOCC) 36
1.3 Zelluläre Mechanismen der Reninsynthese und -Sekretion 39
1.3.1 cAMP 39
1.3.2 cGMP 41
1.3.3 Rolle des Calciums 44
1.3.3.1 extrazelluläre Calcium-Konzentration ([Ca2+]e) 44
1.3.3.1.1 erniedrigte [Ca2+]e 44
1.3.3.1.2 erhöhte [Ca2+]e 45
1.3.3.2 intrazelluläre Calcium-Konzentration ([Ca2+]j) 46
1.3.3.2.1 Calcium als paradoxer second messenger 46
1.3.3.2.2 räumlich begrenzte Calciumsignale 51
1.3.3.2.3 Calciumoszillationen 52
1.3.3.2.4 Calciumsensitive Multiproteinkomplexe 53
1.3.3.3 Calmodulin 53
1.3.3.4 Proteinkinase C (PKC) 55
1.3.3.5 intranukleäres Calcium 55
1.4 Fragestellung 57
2 Material und Geräte 59
5
3 Methoden 62
3.1 Anzucht und Kultivierung der As4.1 Zellen 62
3.2 RNA-Isolation 63
3.3 Reverse Transkriptasereaktion 65
3.4 Polymerase-Kettenreaktion 65
3.4.1 Prinzip der PCR 65
3.4.2 Rapid Cyde PCR 66
3.4.3 Real-Time PCR 67
3.4.4 Quantifizierung und Produktidentifikation mit dem Light Cycler 68
3.4.4.1 Quantifizierung 69
3.4.4.2 Standardkurve 72
3.4.4.3 Produktidentifikation 73
3.4.4.4 Vorgehen 74
3.5 Statistik 75
4 Ergebnisse 76
4.1 Dosis-Wirkungsbeziehung von Thapsigargin und CPA 76
4.2 Zeitverlauf der Thapsigargin -Wirkung 79
4.3 Einfluss von Endothelin und Thapsigargin auf die
Renin-mRNA-Abundanz 80
4.4 Vergleich des Einflusses von Forskolin/IBMX und von 8-Br-cAMP 82
4.5 Einfluss von Bisindolylmaleimide I (BIM) und
Phorbol-12-myristat-13-acetat(PMA) 83
4.6 Einfluss von EGTA 85
4.7 Einfluss von 2-Aminoethoxydiphenylborat (2-APB) 86
4.8 Einfluss von Fluphenazin 88
4.9 Einfluss von SKF-96365 89
6
5 Diskussion 92
6 Literaturverzeichnis 106
7 Publikation 153
8 Danksagung 154
7
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1 Einleitung 8
1.1 Das Renin-Angiotensin-Aldosteron-System 8
1.1.01 Reningen 9
1.1.02 Präprorenin-mRNA 9
1.1.03 Präprorenin 9
1.1.04 Prorenin 10
1.1.05 Renin 10
1.1.06 Reninsekretion aus der juxtaglomerulären Zelle 11
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1.1.10 Aldosteron 17
1.2 Physiologische Faktoren der Reninsynthese und -Sekretion 18
1.2.01 Barorezeptor-Mechanismus 18
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1.2.06 Prostaglandine 26
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1.2.09 Adrenomedullin 31
4
1.2.10 Membraneigenschaften der JGC 32
1.2.10.1 Rolle membranpermeabler Ionen 32
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1.3.1 cAMP 39
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1.3.3 Rolle des Calciums 44
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1.3.3.2.2 räumlich begrenzte Calciumsignale 51
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1.3.3.5 intranukleäres Calcium 55
1.4 Fragestellung 57
2 Material und Geräte 59
5
3 Methoden 62
3.1 Anzucht und Kultivierung der As4.1 Zellen 62
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4 Ergebnisse 76
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4.2 Zeitverlauf der Thapsigargin -Wirkung 79
4.3 Einfluss von Endothelin und Thapsigargin auf die
Renin-mRNA-Abundanz 80
4.4 Vergleich des Einflusses von Forskolin/IBMX und von 8-Br-cAMP 82
4.5 Einfluss von Bisindolylmaleimide I (BIM) und
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4.8 Einfluss von Fluphenazin 88
4.9 Einfluss von SKF-96365 89
6
5 Diskussion 92
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