Systematische Analyse der Proteinsequenzen von GAD65 und Proinsulin mittels Peptid-Bibliotheken zur Detektion krankheitsassoziierter Epitope beim humanen Typ 1 Diabetes:
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| adam_text | Titel: Systematische Analyse der Proteinsequenzen von GAD65 und Proinsulin mittels Peptid-Bibliotheken zur
Autor: Dittrich, Marcus
Jahr: 2008
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 1
1.1 Systembiologischer Kontext..................... 1
1.2 Autoimmunität und Toleranz.................... 4
1.2.1 Toleranzmechanismen .................... 4
1.2.2 Antigenprozessierung und Präsentation........... 9
1.2.3 Mechanismen der Pathogenese des Typ 1 Diabetes..... 10
1.3 Genetischer Hintergrund des Typ 1 Diabetes............ 13
1.4 Das NOD-Mausmodell........................ 17
1.5 Inselzell-Antigene........................... 19
1.5.1 GAD65 ............................ 21
1.5.2 Insulin............................. 23
1.5.3 IA-2.............................. 24
1.6 Antigenspezißsche Therapien..................... 25
1.7 Aufbau und Strategie der Studie................... 27
2 Material und Methoden 30
2.1 ELISPOT-Assays........................... 30
2.1.1 Grundlagen der ELISPOT-Technik............. 30
2.1.2 Anwendung der ELISPOT-Technik............. 34
2.2 Isolation der PBMC ......................... 35
2.3 Kryopräservation........................... 35
2.4 Peptid-Bibliotheken.......................... 37
2.5 Patientenkollektiv........................... 38
2.6 Untersuchungen an Mäusen..................... 39
Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis
3 Ergebnisse 40
3.1 HLA-Haplotypen........................... 40
3.2 Kryopräservation........................... 42
3.3 Reaktivität gegen die Peptid-Bibliotheken............. 43
3.4 Reaktivität gegen GAD65-Protein.................. 49
3.5 Signalverstärkung durch Co-Stimulation.............. 51
3.6 Spezifität der Reaktivitätsmuster.................. 56
3.7 Fazit.................................. 57
4 Diskussion 58
4.1 Betrachtung im Kontext der Literatur................ 58
4.2 Analyse des Epitop-Spektrums.................... 60
4.3 Evidenz für Epitope Spreading.................... 63
4.4 Suche nach dem primären Antigen.................. 65
4.5 Therapeutische Implikationen.................... 68
4.6 Fazit und Ausblick.......................... 69
5 Zusammenfassung 71
6 Anhang 88
6.1 Tabellen................................ 88
6.2 Liste eigener Publikationen...................... 96
|
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Titel: Systematische Analyse der Proteinsequenzen von GAD65 und Proinsulin mittels Peptid-Bibliotheken zur
Autor: Dittrich, Marcus
Jahr: 2008
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 1
1.1 Systembiologischer Kontext. 1
1.2 Autoimmunität und Toleranz. 4
1.2.1 Toleranzmechanismen . 4
1.2.2 Antigenprozessierung und Präsentation. 9
1.2.3 Mechanismen der Pathogenese des Typ 1 Diabetes. 10
1.3 Genetischer Hintergrund des Typ 1 Diabetes. 13
1.4 Das NOD-Mausmodell. 17
1.5 Inselzell-Antigene. 19
1.5.1 GAD65 . 21
1.5.2 Insulin. 23
1.5.3 IA-2. 24
1.6 Antigenspezißsche Therapien. 25
1.7 Aufbau und Strategie der Studie. 27
2 Material und Methoden 30
2.1 ELISPOT-Assays. 30
2.1.1 Grundlagen der ELISPOT-Technik. 30
2.1.2 Anwendung der ELISPOT-Technik. 34
2.2 Isolation der PBMC . 35
2.3 Kryopräservation. 35
2.4 Peptid-Bibliotheken. 37
2.5 Patientenkollektiv. 38
2.6 Untersuchungen an Mäusen. 39
Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis
3 Ergebnisse 40
3.1 HLA-Haplotypen. 40
3.2 Kryopräservation. 42
3.3 Reaktivität gegen die Peptid-Bibliotheken. 43
3.4 Reaktivität gegen GAD65-Protein. 49
3.5 Signalverstärkung durch Co-Stimulation. 51
3.6 Spezifität der Reaktivitätsmuster. 56
3.7 Fazit. 57
4 Diskussion 58
4.1 Betrachtung im Kontext der Literatur. 58
4.2 Analyse des Epitop-Spektrums. 60
4.3 Evidenz für Epitope Spreading. 63
4.4 Suche nach dem primären Antigen. 65
4.5 Therapeutische Implikationen. 68
4.6 Fazit und Ausblick. 69
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