Einfluss von einer Metalloproteinase und einer Chitinase auf die Entstehung und den Verlauf der chronisch obstruktiven Lungenerkrankung:
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INHALTSVERZEICHNIS
Abkürzungsverzeichnis 7
1. Einleitung 9
1.1 Definition der COPD 9
1.2 Epidemiologie und sozioökonomische Bedeutung der COPD 9
1.3 Symptomatik und Diagnostik der COPD 10
1.3.1 Anamnese II
1.3.2 Lungenfunktionsanalyse und Schweregradeinteilung II
1.3.3 Ergänzende diagnostische Untersuchungen 14
1.4 Pathologie der COPD 15
1.4.1 Morphologische Veränderungen 16
1.4.2 Zytokine 17
1.4.3 Oxidativer Stress 18
1.4.4 Proteasen-Antiproteasen-Imbalance 19
1.4.5 Pathophysiologie der COPD 21
1.1 Molekulargenetischer Hintergrund 22
1.1.1 A disintegrin and metalloproteinase 33 (ADAM33) 23
1.1.2 Acid Mammalian Chitinase (AMCase) 26
1.2 Zielsetzung und Fragestellung der Arbeit 27
2. Material und Methoden 28
2.1 Probanden 28
2.2 Materialien 29
2.2.1 Chemikalien 29
2.2.2 Gerate 29
2.2.3 DNA-Polymerase 29
2.2.4 Primer 30
2.2.5 Restriktionsenzyme 31
2.3 Durchführung der Untersuchungen 31
2.3.1 Blutentnahme 31
2.3.2 Isolierung genomischer DNA aus Vollblut 32
6
2.3.3 DNA-Amplifikation durch PCR 32
2.3.4 Gelelektrophorese 34
2.3.5 Restriktionsendonuklease-Verdau der PCR-Produkte 35
2.3.6 Statistik 36
3. Ergebnisse 37
3.1 Interpretation der Restriktions-Fragment-Längen-Polymorphismen 37
3.1.1 ADAM33F+1-Polymorphismus 37
3.1.2 ADAM33 S_2-Polymorphismus 39
3.1.3 AMCasers3818822-Polymorphismus 40
3.2 Statistische Datenanalyse 42
3.2.1 Demographische Basisdaten 42
3.2.2 Verteilung von Genotypen und Allelfrequenzen 43
3.2.2.1 ADAM33 F+1-Polymorphismus 44
3.2.2.2 ADAM33 S_2-Polymorphismus 47
3.2.2.3 Assoziationsanalyse des F+l- und S_2-Polymorphismus 51
3.2.2.4 rs 3818822-Polymorphismus des AMCase-Gens 52
4. Diskussion 55
4.1 F+l- und S_2-Polymorphismus im ADAM33-Gen 56
4.2 rs3818822-Polymorphismus im AMCase-Gen 61
5. Zusammenfassung 64
6. Literaturverzeichnis 66
7. Danksagung __ 74
8. Lebenslauf 75
|
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5
INHALTSVERZEICHNIS
Abkürzungsverzeichnis 7
1. Einleitung 9
1.1 Definition der COPD 9
1.2 Epidemiologie und sozioökonomische Bedeutung der COPD 9
1.3 Symptomatik und Diagnostik der COPD 10
1.3.1 Anamnese II
1.3.2 Lungenfunktionsanalyse und Schweregradeinteilung II
1.3.3 Ergänzende diagnostische Untersuchungen 14
1.4 Pathologie der COPD 15
1.4.1 Morphologische Veränderungen 16
1.4.2 Zytokine 17
1.4.3 Oxidativer Stress 18
1.4.4 Proteasen-Antiproteasen-Imbalance 19
1.4.5 Pathophysiologie der COPD 21
1.1 Molekulargenetischer Hintergrund 22
1.1.1 "A disintegrin and metalloproteinase 33" (ADAM33) 23
1.1.2 "Acid Mammalian Chitinase" (AMCase) 26
1.2 Zielsetzung und Fragestellung der Arbeit 27
2. Material und Methoden 28
2.1 Probanden 28
2.2 Materialien 29
2.2.1 Chemikalien 29
2.2.2 Gerate 29
2.2.3 DNA-Polymerase 29
2.2.4 Primer 30
2.2.5 Restriktionsenzyme 31
2.3 Durchführung der Untersuchungen 31
2.3.1 Blutentnahme 31
2.3.2 Isolierung genomischer DNA aus Vollblut 32
6
2.3.3 DNA-Amplifikation durch PCR 32
2.3.4 Gelelektrophorese 34
2.3.5 Restriktionsendonuklease-Verdau der PCR-Produkte 35
2.3.6 Statistik 36
3. Ergebnisse 37
3.1 Interpretation der Restriktions-Fragment-Längen-Polymorphismen 37
3.1.1 ADAM33F+1-Polymorphismus 37
3.1.2 ADAM33 S_2-Polymorphismus 39
3.1.3 AMCasers3818822-Polymorphismus 40
3.2 Statistische Datenanalyse 42
3.2.1 Demographische Basisdaten 42
3.2.2 Verteilung von Genotypen und Allelfrequenzen 43
3.2.2.1 ADAM33 F+1-Polymorphismus 44
3.2.2.2 ADAM33 S_2-Polymorphismus 47
3.2.2.3 Assoziationsanalyse des F+l- und S_2-Polymorphismus 51
3.2.2.4 rs 3818822-Polymorphismus des AMCase-Gens 52
4. Diskussion 55
4.1 F+l- und S_2-Polymorphismus im ADAM33-Gen 56
4.2 rs3818822-Polymorphismus im AMCase-Gen 61
5. Zusammenfassung 64
6. Literaturverzeichnis 66
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