Linienspezifische Chimärismusuntersuchungen im peripheren Blut bei Patienten nach allogener hämatopoetischer Zelltransplantation:
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2008
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
2. Material und Methoden 9
2.1. Patienten 9
2.2. Messung dendritischer Zellen im peripheren Blut 11
2.2.1. Vorbemerkung II
2.2.2. Probengewinnung 12
2.2.3. Probenverarbeitung 12
2.2.4. Probenmessung 13
2.3. Isolierung dendritischer Zellen 13
2.3.1. Probengewinnung 13
2.3.2. Probenverarbeitung 15
2.3.3. Isolierung von DC1 und DC2 mittels Cellsorting 15
2.3.4. Morphologie von isolierten dendritischen Zellen 16
2.3.4.1. Pappenheim-Färbung 16
2.3.4.2. Morphologie nach Kultivierung mit TNF-a 16
2.3.4.3. Transmissionselektronenmikroskopische Aufnahme
nach Kultivierung mit TNF-a 19
2.4. Isolieren der T-Zellen 22
2.4.1. Probengewinnung 22
2.4.2. Probenverarbeitung 22
2.4.3. Isolieren von T-Zellen mit dem Miltenyi-System 23
2.4.4. Chimärismusanalyse von T-Zellen 23
2.5. Chimärismusanalysen 24
2.5.1. Fluoreszenz-in-Situ-Hybridisierung 24
2.5.2. Polymerasekettenreaktion von Short-Tandem-Repeats 28
2.5.3. Definitionen 30
2.6. Datenauswertung 31
-I-
3. Ergebnisse 32
3.1. Patienten 32
3.2. Kinetik der Chimärismen nach allogener hämatopoetischer
Zelltransplantation 36
3.2.1. Kinetik der Chimärismen beim Engraftment 36
3.2.1.1. Kinetik des Dendritenchimärismus 36
3.2.1.2. Kinetik des T-Zell-Chimärismus 38
3.2.2. Kinetik der Chimärismen nach sechs Monaten 40
3.2.2.1. Vorbemerkungen 40
3.2.2.2. Kinetik des Dendritenchimärismus 40
3.2.2.3. Kinetik des T-Zell-Chimärismus 42
3.2.3. Kinetik der Chimärismen nach zwölf Monaten 42
3.2.3.1. Kinetik des Dendritenchimärismus 42
3.2.3.2. Kinetik des T-Zell-Chimärismus 43
3.2.4. Verlauf der Chimärismen 43
3.3. Einfluss der Chimärismen auf den klinischen Verlauf nach allogener
hämatopoetischer Zelltransplantation 54
3.3.1. Chimärismus der Population DC1 54
3.3.2. Chimärismus der Population DC2 55
3.3.3. Chimärismus der T-Zellen 56
3.3.4. Patienten ohne Chimärismus beim Engraftment 57
3.3.5. DC Chimärismus sechs und zwölf Monate nach Transplantation 59
3.3.6. Patienten mit Unterschieden in den Chimärismen 65
4. Diskussion 67
4.1. Kinetik der Chimärismen 67
4.2. Einfluss der Chimärismen auf den klinischen Verlauf 68
4.2.1. DC1-Chimärismus 68
4.2.2. DC2-Chimärismus 70
4.2.3. T-Zell-Chimärismus 71
4.2.4. Einzelkasuistiken 71
-II-
4.2.5. Das Zusammenspiel von dendritischen und T-Zellen
hinsichtlich GvHD 73
4.3. Ausblick 83
5. Zusammenfassung 87
6. Literaturverzeichnis 89
7. Danksagung 104
8. Lebenslauf 106
-III-
|
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
2. Material und Methoden 9
2.1. Patienten 9
2.2. Messung dendritischer Zellen im peripheren Blut 11
2.2.1. Vorbemerkung II
2.2.2. Probengewinnung 12
2.2.3. Probenverarbeitung 12
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2.3.3. Isolierung von DC1 und DC2 mittels Cellsorting 15
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2.3.4.1. Pappenheim-Färbung 16
2.3.4.2. Morphologie nach Kultivierung mit TNF-a 16
2.3.4.3. Transmissionselektronenmikroskopische Aufnahme
nach Kultivierung mit TNF-a 19
2.4. Isolieren der T-Zellen 22
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2.4.2. Probenverarbeitung 22
2.4.3. Isolieren von T-Zellen mit dem Miltenyi-System 23
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2.5.2. Polymerasekettenreaktion von Short-Tandem-Repeats 28
2.5.3. Definitionen 30
2.6. Datenauswertung 31
-I-
3. Ergebnisse 32
3.1. Patienten 32
3.2. Kinetik der Chimärismen nach allogener hämatopoetischer
Zelltransplantation 36
3.2.1. Kinetik der Chimärismen beim Engraftment 36
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3.2.2. Kinetik der Chimärismen nach sechs Monaten 40
3.2.2.1. Vorbemerkungen 40
3.2.2.2. Kinetik des Dendritenchimärismus 40
3.2.2.3. Kinetik des T-Zell-Chimärismus 42
3.2.3. Kinetik der Chimärismen nach zwölf Monaten 42
3.2.3.1. Kinetik des Dendritenchimärismus 42
3.2.3.2. Kinetik des T-Zell-Chimärismus 43
3.2.4. Verlauf der Chimärismen 43
3.3. Einfluss der Chimärismen auf den klinischen Verlauf nach allogener
hämatopoetischer Zelltransplantation 54
3.3.1. Chimärismus der Population DC1 54
3.3.2. Chimärismus der Population DC2 55
3.3.3. Chimärismus der T-Zellen 56
3.3.4. Patienten ohne Chimärismus beim Engraftment 57
3.3.5. DC Chimärismus sechs und zwölf Monate nach Transplantation 59
3.3.6. Patienten mit Unterschieden in den Chimärismen 65
4. Diskussion 67
4.1. Kinetik der Chimärismen 67
4.2. Einfluss der Chimärismen auf den klinischen Verlauf 68
4.2.1. DC1-Chimärismus 68
4.2.2. DC2-Chimärismus 70
4.2.3. T-Zell-Chimärismus 71
4.2.4. Einzelkasuistiken 71
-II-
4.2.5. Das Zusammenspiel von dendritischen und T-Zellen
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4.3. Ausblick 83
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