Zytokinsezernierende T-Helfer-Zellen in Nabelschnurblut und peripherem Blut Erwachsener: ein Vergleich
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis 3
Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis 3
1 Einleitung 6
2 Hintergrund 6
2.1 Definition und Epidemiologie von Allergien 6
2.2 Typ-I-Allergie und die Dichotomie von TH1 und Th2 auf der Ebene der
Zytokine 8
2.3 Die Dichotomie von TH1 und TH2 auf Ebene der Chemokinrezeptoren
(CKR) 9
2.4 In utero priming 10
2.5 Probleme der verschiedenen Methoden der Zytokinmessung in
Nabelschnurblut 10
3 Zielsetzung 13
4 Material und Methoden 14
4.1 Probanden- und Gruppeneinteilung 14
4.2 Probengewinnung 15
4.3 Routineblutbild und Bestimmung der Immunglobuline 15
4.4 Immunophänotypisierung 15
4.5 Zellkultur 16
4.5.1 Präparation der mononukleären Zellen (PBMC) 16
4.5.2 Stimulation mit Staphylokokkenenterotoxin B (SEB) 17
4.6 Cytometric Bead Array (BD Biosciences) 18
4.7 Zytokin Sekretions Assay (Miltenyi Biotech) 20
4.8 Magnetische Anreicherung IL-4, IL-10 sezemierender Zellen 22
4.9 Durchflusszytometrische Messung 24
4.10 Statistische Auswertung 25
4.11 Material 26
4.11.1 Glas-und Plastikmaterial 26
4.11.2 Apparative Einrichtungen 26
4.11.3 Reagenzien 27
4.11.4 Antikörper 27
4.11.5 Zytokin Sekretions Assay (Miltenyi Biotech) 27
4.11.6 Cytometric Bead Array (BD Biosciences) 28
4 Inhaltsverzeichnis
5 Ergebnisse 29
5.1 Gruppen 29
5.1.1 Erwachsene 29
5.1.2 Neugeborene 29
5.2 CD4- und CD8-positive T-Zellen 31
5.3 CD45RO-positive T-Zellen 31
5.4 CD 19-positive B-Zellen 32
5.5 Chemokinrezeptoren 32
5.5.1 CCR5 33
5.5.2 CXCR3 34
5.5.3 CCR4 36
5.5.4 CCR3 37
5.6 Zytokin Sekretions Assay (Miltenyi Biotech) 38
5.6.1 Kinetik 38
5.6.2 Intra Assay Kontrolle 39
5.6.3 Interferon Gamma (IFN-y) 39
5.6.4 Interleukin 4 (IL-4) 41
5.6.5 Interleukin 10 (IL-10) 43 j
5.7 Cytometric Bead Array (BD Bioscienes) 45
5.7.1 Interferon Gamma (IFN-y) 45
5.7.2 Interleukin 4 (IL-4) 46
5.8 TH1/TH2-Quotient 46
5.8.1 Chemokinrezeptoren 47
5.8.2 Zytokin Sekretions Assay (Miltenyi Biotech) 47 ¦
5.8.3 Cytometric BeadArray (CBA) 48
6 Diskussion 50
6.1 Studienpopulation 50 j
6.2 Methodik 51 j
6.2.1 Durchflusszytometrie 51 I
6.2.2 Stimulation mit SEB und Zytokin Secretions Assay 51 j
6.2.3 Cytometric BeadArray (CBA) 53 j
6.3 Ergebnisse der Immunophänotypisierung 53 i
6.3.1 CD4- und CD8-positive Zellen, sowie CD4/CD8-Ratio 53 j
6.3.2 CD19-positive B-Zellen 54 ;
Inhaltsverzeichnis 5
6.3.3 CD45RO-positive Memory-Zellen 54
6.3.4 Chemokinrezeptor CCR5 und CXCR3 55
6.3.5 Chemokinrezeptor CCR4 55
¦ 6.4 Ergebnisse der Zytokinmessungen 56
j 6.4.1 Interferon v 56
6.4.2 Interleukin4 57
6.4.3 Interleukin 10 58
6.5 Zeigt Nabelschnurblut eine balancierte Immunantwort vor und nach
Stimulation mit SEB? 59
i 6.5.1 TH1/TH2-Quotient auf Ebene der Chemokinrezeptoren 60
6.5.2 TH1/TH2-Quotient auf Ebene der Zytokinsekretion 60
| 7 Zusammenfassung 62
l Abbildungsverzeichnis 65
Abkürzungsverzeichnis 66
Tabellenverzeichnis 67
Bibliographie 68
Lebenslauf 78
i
|
| adam_txt |
Inhaltsverzeichnis 3
Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis 3
1 Einleitung 6
2 Hintergrund 6
2.1 Definition und Epidemiologie von Allergien 6
2.2 Typ-I-Allergie und die Dichotomie von TH1 und Th2 auf der Ebene der
Zytokine 8
2.3 Die Dichotomie von TH1 und TH2 auf Ebene der Chemokinrezeptoren
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2.4 In utero priming 10
2.5 Probleme der verschiedenen Methoden der Zytokinmessung in
Nabelschnurblut 10
3 Zielsetzung 13
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5 Ergebnisse 29
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