Immunhistochemische Untersuchung der Proteine Calretinin und BMP-4 auf humanen Zahnkeimschnitten:
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2007
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 LITERATURÜBERSICHT 2
2.1 EKTOMESENCirYMUNDEKTODERMALSZAMNBlLDENDEGEWF.BE 2
2.2 HISTOLOGIE DER ZAHNENTWICKI.UNG 5
2.2.1 Die Zahnleiste - Dentale I-amina 5
2.2.2 Das Knospenstadium 6
2.2.3 Das Kappenstadium 6
2.2.4 Das Glockenstadium 8
2.2.5 Schmelz-und Dcnanbildung 9
2.2.6 Wurzelbildung/ Zahnhalteapparat 10
2.3 Aktueller Forsci iunosstand bezüglich der Zai inentwicklung auf der
genetischen Ebene 11
2.3.1 Oberblick II
2.3.2 BMP, FGF, WNT und SHH- Wichtige Signalmolcküle der Zahnentwicklung 13
2.3.2.1 SHH 13
2.3.2.2 WNT 14
2.3.2.3 BMP 15
2.3.2.4 FGF 17
2.3.3 Stadienspezifische Darstellung der genetischen Ebene der Zahnentwicklung mit
besonderer Berücksichtigung des Antagonismus FGF/ BMP 18
2.33.1 Initiation 18
2.3.3.2 Morphogenese 20
2.3.3.3 Differenzierung- das Charakfehstikum des Glocleenstadiums 24
2.3.3.4 Schmelz- und Dentinbildung 26
2.3.3.5 Bildung des Zahnhalteapparates 28
2.3.4 Die intrazellulären Signalwege in der Zahnentwicklung 29
3 FRAGESTELLUNG 33
4 MATERIAL UND METHODE 36
4.1 Das zu untersuchende Gewebe- humane Zahnke/me 36
4.2 immunhistociiemischf. anfärbung 36
4.2.1 Verwendete Materialien, Reagenzien und Geräte 36
4.2.2 Ablauf der Gewebcvorbchandlung und der Färbung 37
4.2.2.1 Venwndett Anlikoipe 38
42.2.2 Falbeprotokoll für Rabbit-anh Calretinm (manuelle Technik) 39
4.2.2.3 Falbeprotokoll fiir BMP- 4 (manuelle Technik) 40
4.2.2.4 Farbeprotokoll für BMP-4 (maschinelle Technik) 41
4.2.3 Kontrolle der Richtigkeit der Anfärbungen 43
5 ERGEBNISSE 44
5.1 Calrrtinin 44
5.2 BMP-4 51
6 DISKUSSION 57
u
6.1 Methodik 57
6.2 immunhistochemischk darstellung der expression von calretinin im humanen
Zahnkeim 58
6.2.1 Bestimmung der optimalen Antikörperverdünnung 58
6.2.2 Durchgeführte Kontrollen 58
6.2.3 Interpretation unseres Ergebnisses 58
6.2.4 Vergleich mit anderen Studien 59
6.2.5 Schlussfolgerung 60
6.3 immunhistochemische darstellung der expression von bmp-4 im humanen
Zahnkeim 60
6.3.1 Bestimmung der optimalen Antikörperverdünnung 60
6.3.2 Durchgeführte Kontrollen 60
6.3.3 Interpretation unserer Ergebnisse 60
6.3.4 Vergleich mit anderen Studien 61
6.3.5 Schlussfolgerung 63
6.4 Ausblick: Tissue Engineering und Stammzelleniorschung- Das Züchten von
Zahnen als Ziel der Forschung im Bereich der Zahnentwicklung 63
6.4.1 Stammzellen, Morphogene und sog. Scaffolds- die Trias des tissue engineering 64
6.4.2 Möglichkeiten und Gren2en in der Therapie mit Stammzellen und Wachstumsfaktoren
im dentalen Bereich 66
6.4.2.1 Aktueller Stand im tissue engineering von Z hnen 66
6.4.2.2 Wachstumsfaktoren zur potentiellen Anwendung in der Zahnheilkunde 66
6.4.2.3 Emdogain - ein porcines Amelogenin zur Regeneration parodomaler Defekte 6
6.4.2.4 Membranen- Ein mechanisches Hilfsmittel zur Regeneration parodontaler Defekte 71
7 ZUSAMMENFASSUNG 73
8 LITERATUR. 74
9 DANKSAGUNGEN 87
10 LEBENSLAUF 88
|
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 LITERATURÜBERSICHT 2
2.1 EKTOMESENCirYMUNDEKTODERMALSZAMNBlLDENDEGEWF.BE 2
2.2 HISTOLOGIE DER ZAHNENTWICKI.UNG 5
2.2.1 Die Zahnleiste - Dentale I-amina 5
2.2.2 Das Knospenstadium 6
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2.2.4 Das Glockenstadium 8
2.2.5 Schmelz-und Dcnanbildung 9
2.2.6 Wurzelbildung/ Zahnhalteapparat 10
2.3 Aktueller Forsci iunosstand bezüglich der Zai inentwicklung auf der
genetischen Ebene 11
2.3.1 Oberblick II
2.3.2 BMP, FGF, WNT und SHH- Wichtige Signalmolcküle der Zahnentwicklung 13
2.3.2.1 SHH 13
2.3.2.2 WNT 14
2.3.2.3 BMP 15
2.3.2.4 FGF 17
2.3.3 Stadienspezifische Darstellung der genetischen Ebene der Zahnentwicklung mit
besonderer Berücksichtigung des Antagonismus FGF/ BMP 18
2.33.1 Initiation 18
2.3.3.2 Morphogenese 20
2.3.3.3 Differenzierung- das Charakfehstikum des Glocleenstadiums 24
2.3.3.4 Schmelz- und Dentinbildung 26
2.3.3.5 Bildung des Zahnhalteapparates 28
2.3.4 Die intrazellulären Signalwege in der Zahnentwicklung 29
3 FRAGESTELLUNG 33
4 MATERIAL UND METHODE 36
4.1 Das zu untersuchende Gewebe- humane Zahnke/me 36
4.2 immunhistociiemischf. anfärbung 36
4.2.1 Verwendete Materialien, Reagenzien und Geräte 36
4.2.2 Ablauf der Gewebcvorbchandlung und der Färbung 37
4.2.2.1 Venwndett Anlikoipe' 38
42.2.2 Falbeprotokoll für Rabbit-anh Calretinm (manuelle Technik) 39
4.2.2.3 Falbeprotokoll fiir BMP- 4 (manuelle Technik) 40
4.2.2.4 Farbeprotokoll für BMP-4 (maschinelle Technik) 41
4.2.3 Kontrolle der Richtigkeit der Anfärbungen 43
5 ERGEBNISSE 44
5.1 Calrrtinin 44
5.2 BMP-4 51
6 DISKUSSION 57
u
6.1 Methodik 57
6.2 immunhistochemischk darstellung der expression von calretinin im humanen
Zahnkeim 58
6.2.1 Bestimmung der optimalen Antikörperverdünnung 58
6.2.2 Durchgeführte Kontrollen 58
6.2.3 Interpretation unseres Ergebnisses 58
6.2.4 Vergleich mit anderen Studien 59
6.2.5 Schlussfolgerung 60
6.3 immunhistochemische darstellung der expression von bmp-4 im humanen
Zahnkeim 60
6.3.1 Bestimmung der optimalen Antikörperverdünnung 60
6.3.2 Durchgeführte Kontrollen 60
6.3.3 Interpretation unserer Ergebnisse 60
6.3.4 Vergleich mit anderen Studien 61
6.3.5 Schlussfolgerung 63
6.4 Ausblick: Tissue Engineering und Stammzelleniorschung- Das Züchten von
Zahnen als Ziel der Forschung im Bereich der Zahnentwicklung 63
6.4.1 Stammzellen, Morphogene und sog. Scaffolds- die Trias des tissue engineering 64
6.4.2 Möglichkeiten und Gren2en in der Therapie mit Stammzellen und Wachstumsfaktoren
im dentalen Bereich 66
6.4.2.1 Aktueller Stand im tissue engineering von Z hnen 66
6.4.2.2 Wachstumsfaktoren zur potentiellen Anwendung in der Zahnheilkunde 66
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6.4.2.4 Membranen- Ein mechanisches Hilfsmittel zur Regeneration parodontaler Defekte 71
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