Nachweis der Telomerasseaktivität bei Pateinten mit Tumoren im Kopf-Hals-Bereich:
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2007
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Seite
Zusammenfassung 1
1. Einleitung 2
1.1 Tumorerkrankungen im Kopf-Hals-Bereich 3
1.1.1 Epidemiologie 3
1.1.2 Ätiologie 4
1.1.3 Tumorklassifikation und Prognose von Kopf-Hals-Tumoren 5
1.2 Die Telomere 7
1.2.1 Struktur und Funktion 7
1.2.2 Rolle der Telomere in der Zellalterung, des Zelltodes,
der Zellimmortalisation und der Onkogenese 10
1.3 Das Enzym Telomerase 11
1.3.1 Struktur und Funktion 11
1.3.2 Regulation der Telomerase, Rolle in der Zellalterung,
des Zelltodes, der Zellimmortalisation und der Onkogenese 13
1.4 Nachweisverfahren der Telomeraseaktivität 18
1.5 Diagnostisches und prognostisches Potential des
Nachweises von Telomeraseaktivität allgemein 19
1.6 Diagnostisches und prognostisches Potential des
Nachweises von Telomeraseaktivität im Kopf-Hals-Bereich 23
1.7 Therapeutisches Potential der Telomeraseinhibierung 25
1.8 Eigene Arbeit 28
2. Material und Methoden 29
2.1 Proteingewinnung aus den Gewebeproben 29
2.2 Telomerasereaktion 31
2.3 Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 32
2.4 Gelelektrophorese 32
2.5 Positivkontrollen 33
2.5.1 Interner Standard 33
2.5.2 Externer Standard 34
2.6 Negativkontrolle 35
2.7 Zusätzliche Untersuchungen 35
2.7.1 RNAase-Behandlung 35
2.7.2 Untersuchung zum Verlust an Enzymaktivität 35
2.7.3 Messung der Hämoglobinkonzentration 36
2.8 Auswertung der Ergebnisse 37
3. Ergebnisse 39
3.1 Positivkontrollen 43
3.1.1 Interner Standard 43
3.1.2 Externer Standard 45
3.2 Negativkontrolle 46
3.3 Zusätzliche Untersuchungen 47
3.3.1 RNAase-Behandlung 47
3.3.2 Untersuchung zum Verlust an Enzymaktivität 47
3.3.3 Messung der Hämoglobinkonzentration 48
3.4 Ergebnisse der Gewebeproben 51
3.4.1 Ergebnisse der Proben der Mundschleimhaut 51
3.4.2 Ergebnisse der Proben der Tumorgewebe 52
3.4.3 Ergebnisse der Proben der Resektionsränder 56
3.4.3.1 Fälle mit telomerasepositiven Resektionsrändern (R+) 59
3.4.3.2 Fälle mit telomerasenegativen Resektionsrändern (R-) 63
3.4.3.3 Vergleich zwischen Fällen mit telomerasepositiven und
telomerasenegativen Resektionsrändern 66
3.4.3.4 Vergleich zwischen hoch- bzw. niedrigtelomerasepositiven
Tumoren und den entsprechenden Resektionsrändern 68
3.4.4 Ergebnisse der Proben der Lymphknotengewebe 69
3.4.4.1 Fälle mit nachgewiesenen Lymphknotenmetastasen (N+) 71
3.4.4.2 Fälle ohne Nachweis von Lymphknotenmetastasen (NO) 75
3.4.4.3 Vergleich zwischen Fällen mit Lymphknotenmetastasen (N+)
und ohne Lymphknotenmetastasen (NO) 80
3.4.5 Ergebnisse der Fälle nach dem Rezidiwerhalten 82
3.4.5.1 Fälle mit Auftreten eines Rezidivs 82
3.4.5.2 Fälle ohne Auftreten eines Rezidivs 88
3.4.5.3 Vergleich zwischen Rezidivfällen und rezidivfreien Fällen 94
4. Diskussion 97
4.1 Bewertung der Methodik 97
4.1.1 Das TRAP-Assay 97
4.1.2 Qualitätskontrollen 99
4.1.2.1 Interner Standard 99
4.1.2.2 Externer Standard 100
4.1.2.3 Negativkontrolle 100
4.1.3 Untersuchung zum Verlust an Enzymaktivität 101
4.1.4 Messung der Hämoglobinkonzentration 101
4.1.5 Quantifizierung der Telomeraseaktivität 101
4.2 Bewertung der Untersuchungsergebnisse 102
4.2.1 Mundschleimhaut 102
4.2.2 Tumoren 103
4.2.3 Resektionsränder 107
4.2.4 Lymphknoten 109
4.3 Rezidiv-Verhalten der Fälle 110
4.4 Diagnostisches und prognostisches Potential des Nachweises von
Telomeraseaktivität im Kopf-Hals-Bereich 111
4.5 Ausblicke zum therapeutischen Potential
der Telomeraseinhibierung 112
5. Schlussfolgerungen 114
6. Literatur
Anhang
Ehrenwörtliche Erklärung
Danksagung
Lebenslauf
|
| adam_txt |
Inhaltsverzeichnis
Seite
Zusammenfassung 1
1. Einleitung 2
1.1 Tumorerkrankungen im Kopf-Hals-Bereich 3
1.1.1 Epidemiologie 3
1.1.2 Ätiologie 4
1.1.3 Tumorklassifikation und Prognose von Kopf-Hals-Tumoren 5
1.2 Die Telomere 7
1.2.1 Struktur und Funktion 7
1.2.2 Rolle der Telomere in der Zellalterung, des Zelltodes,
der Zellimmortalisation und der Onkogenese 10
1.3 Das Enzym Telomerase 11
1.3.1 Struktur und Funktion 11
1.3.2 Regulation der Telomerase, Rolle in der Zellalterung,
des Zelltodes, der Zellimmortalisation und der Onkogenese 13
1.4 Nachweisverfahren der Telomeraseaktivität 18
1.5 Diagnostisches und prognostisches Potential des
Nachweises von Telomeraseaktivität allgemein 19
1.6 Diagnostisches und prognostisches Potential des
Nachweises von Telomeraseaktivität im Kopf-Hals-Bereich 23
1.7 Therapeutisches Potential der Telomeraseinhibierung 25
1.8 Eigene Arbeit 28
2. Material und Methoden 29
2.1 Proteingewinnung aus den Gewebeproben 29
2.2 Telomerasereaktion 31
2.3 Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 32
2.4 Gelelektrophorese 32
2.5 Positivkontrollen 33
2.5.1 Interner Standard 33
2.5.2 Externer Standard 34
2.6 Negativkontrolle 35
2.7 Zusätzliche Untersuchungen 35
2.7.1 RNAase-Behandlung 35
2.7.2 Untersuchung zum Verlust an Enzymaktivität 35
2.7.3 Messung der Hämoglobinkonzentration 36
2.8 Auswertung der Ergebnisse 37
3. Ergebnisse 39
3.1 Positivkontrollen 43
3.1.1 Interner Standard 43
3.1.2 Externer Standard 45
3.2 Negativkontrolle 46
3.3 Zusätzliche Untersuchungen 47
3.3.1 RNAase-Behandlung 47
3.3.2 Untersuchung zum Verlust an Enzymaktivität 47
3.3.3 Messung der Hämoglobinkonzentration 48
3.4 Ergebnisse der Gewebeproben 51
3.4.1 Ergebnisse der Proben der Mundschleimhaut 51
3.4.2 Ergebnisse der Proben der Tumorgewebe 52
3.4.3 Ergebnisse der Proben der Resektionsränder 56
3.4.3.1 Fälle mit telomerasepositiven Resektionsrändern (R+) 59
3.4.3.2 Fälle mit telomerasenegativen Resektionsrändern (R-) 63
3.4.3.3 Vergleich zwischen Fällen mit telomerasepositiven und
telomerasenegativen Resektionsrändern 66
3.4.3.4 Vergleich zwischen hoch- bzw. niedrigtelomerasepositiven
Tumoren und den entsprechenden Resektionsrändern 68
3.4.4 Ergebnisse der Proben der Lymphknotengewebe 69
3.4.4.1 Fälle mit nachgewiesenen Lymphknotenmetastasen (N+) 71
3.4.4.2 Fälle ohne Nachweis von Lymphknotenmetastasen (NO) 75
3.4.4.3 Vergleich zwischen Fällen mit Lymphknotenmetastasen (N+)
und ohne Lymphknotenmetastasen (NO) 80
3.4.5 Ergebnisse der Fälle nach dem Rezidiwerhalten 82
3.4.5.1 Fälle mit Auftreten eines Rezidivs 82
3.4.5.2 Fälle ohne Auftreten eines Rezidivs 88
3.4.5.3 Vergleich zwischen Rezidivfällen und rezidivfreien Fällen 94
4. Diskussion 97
4.1 Bewertung der Methodik 97
4.1.1 Das TRAP-Assay 97
4.1.2 Qualitätskontrollen 99
4.1.2.1 Interner Standard 99
4.1.2.2 Externer Standard 100
4.1.2.3 Negativkontrolle 100
4.1.3 Untersuchung zum Verlust an Enzymaktivität 101
4.1.4 Messung der Hämoglobinkonzentration 101
4.1.5 Quantifizierung der Telomeraseaktivität 101
4.2 Bewertung der Untersuchungsergebnisse 102
4.2.1 Mundschleimhaut 102
4.2.2 Tumoren 103
4.2.3 Resektionsränder 107
4.2.4 Lymphknoten 109
4.3 Rezidiv-Verhalten der Fälle 110
4.4 Diagnostisches und prognostisches Potential des Nachweises von
Telomeraseaktivität im Kopf-Hals-Bereich 111
4.5 Ausblicke zum therapeutischen Potential
der Telomeraseinhibierung 112
5. Schlussfolgerungen 114
6. Literatur
Anhang
Ehrenwörtliche Erklärung
Danksagung
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