Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2007
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Leipzig, Univ., Diss., 2007 |
| Beschreibung: | XIII, 96, XIV - XXXI S. Ill., graph. Darst. |
Internformat
MARC
| LEADER | 00000nam a2200000 c 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | BV023171181 | ||
| 003 | DE-604 | ||
| 005 | 20090406 | ||
| 007 | t | ||
| 008 | 080219s2007 ad|| m||| 00||| ger d | ||
| 035 | |a (OCoLC)227347327 | ||
| 035 | |a (DE-599)BVBBV023171181 | ||
| 040 | |a DE-604 |b ger |e rakwb | ||
| 041 | 0 | |a ger | |
| 049 | |a DE-355 | ||
| 082 | 0 | |a 615.3 |2 22/ger | |
| 084 | |a 610 |2 sdnb | ||
| 100 | 1 | |a Solignac, Pascal-François |d 1971- |e Verfasser |0 (DE-588)134070097 |4 aut | |
| 245 | 1 | 0 | |a Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern |c eingereicht von Pascal-François Solignac |
| 264 | 1 | |c 2007 | |
| 300 | |a XIII, 96, XIV - XXXI S. |b Ill., graph. Darst. | ||
| 336 | |b txt |2 rdacontent | ||
| 337 | |b n |2 rdamedia | ||
| 338 | |b nc |2 rdacarrier | ||
| 500 | |a Leipzig, Univ., Diss., 2007 | ||
| 655 | 7 | |0 (DE-588)4113937-9 |a Hochschulschrift |2 gnd-content | |
| 856 | 4 | 2 | |m HBZ Datenaustausch |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=016357850&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Inhaltsverzeichnis |
| 999 | |a oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-016357850 | ||
Datensatz im Suchindex
| _version_ | 1804137433416073216 |
|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Bibliographische Beschreibung HI
Referat m
Inhaltsverzeichnis IV
Abkürzungsverzeichnis VIII
Abbildungsverzeichnis XI
Tabellenverzeichnis XII
1. Einleitung 1
1.1 Allgemeine Funktionen des Immunsystems 1
1.2 Die T-Zelle und ihre Funktion im Immunsystem 2
1.3 Aktivierung und Regulierung der CD4+ T-Zelle 3
1.3.1 Aktivierung der T-Zelle und Funktion des CD4-Moleküls 4
1.3.2 Toleranz und Immunmodulation 9
1.4 Ziel der Arbeit 12
2. Material 13
2.1 Lymphozyten für den zellulären Hemmtest 13
2.2 Antikörper 13
2.2.1 Anti-CD4 Antikörper 13
2.2.2 Detektionsantikörper 14
2.3 Phage Dispaly PCR-Primer 15
2.4 Synthetische Peptide und rekombinante Proteine 15
2.5 Chemikalien 16
2.6 Pepscan-Membranen 16
2.7 Geräte 16
2.8 Kunststoffartikel und sonstige Verbrauchsmaterialien 26
2.9 Puffer 17
2.9.1 DNS-Elektrophorese Puffer 17
2.9.2 Pepscan Puffer 17
IV
2.9.3 Phagenbank Puffer 17
2.9.4 CD4-Elisa Puffer 18
2.9.5 FACS-Puffer 18
2.10 Zellkulturmedien 19
2.10.1 Kommerzielle Zellkulturmedien 19
2.10.2 hergestellte Zellkulturmedien 19
2.10.3 Bakteriologische Medien 19
2.10.4 Solide Bakterienkulturen 19
2.11 Programme/Software 20
3. Methoden 21
3.1 Aufreinigungsmethode der Lymphozyten
für den MAX16H5-Bindungshemmtest 21
3.1.1 Prinzip der Lymphozyten Aufreinigung 21
3.1.2 Aufreinigungsprotokoll 22
3.2 Durchflusszytometrie 22
3.2.1 Prinzip 22
3.2.2 FACS-Einstellungsparameter 23
3.3 MAX16H5-Bindungshemmtest durch Peptidsequenzen 24
3.3.1 Prinzip des Bindungshemmtests 24
3.3.2 Bindungshemmtest Protokoll 26
3.4 Mengenabhängigkeit der Peptidhemmung 26
3.4.1 Prinzip 26
3.4.2 Peptid Austitrationsprotokoll 27
3.5 Pepscan-Methode 27
3.5.1 Prinzip des Pepscans 27
3.5.2 Pepscan-Protokoll mit aufgereinigten anti-CD4 Antikörpern 28
3.5.3 Pepscan-Protokoll mit nicht aufgereinigten anti-CD4 Antikörpern 29
3.5.4 Membran-Reaktivierungs-Protokoll 29
3.6 Phagenbank-Methode 30
3.6.1 Prinzip der Phagenbank-Methode 30
3.6.2 Protokoll der Phagenbank-Methode 31
3.63 PCR-Amplifikation der DNS-Proben 32
V
3.6.4 Sequenzdatenanalyse 32
3.7 ELISA 34
3.8 Grafische Darstellung und statistische Auswertung 35
4. Ergebnisse 36
4.1 Epitop-screening 36
4.1.1 Pepscan 36
4.1.2 Phage Display 41
4.2 MAX16H5-Bindungshemmtest 47
4.2.1 MAX 16H5-Austitration 47
4.2.2 Validitätskontrolle 50
4.2.3 Unabhängige Peptidkontrollen 53
4.2.4 Bindungshemmtest durch Peptid 2 58
4.2.5 Bindungshemmtest durch Peptid 10 61
4.2.6 Bindungshemmtest durch Peptid 11 64
4.3 Austitrirung der Hemmpeptide 67
4.3.1 Validitätskontrollen 67
4.3.2 Austitrierung von Peptid 10 69
4.3.3 Austitrierung von Peptid 11 70
5. Diskussion 71
5.1 CD4-Pepscan von anti-CD4 Antikörpern 71
5.1.1 Pepscan-Bindungsgruppen 71
5.1.2 Pepscan-Bindungsstrukturen 71
5.1.3 Antikörper mit mehreren Pepscan Bindungssequenzen 72
5.1.4 Pescan-Sequenzen mit einer hohen Bindungsfrequenz 73
5.1.5 Bindungsunterschied in Abhängigkeit der Antikörperform 74
5.2 Phagotop-Bindung von anti-CD4 Antikörpern 76
5.2.1 anti-CD4 Antikörper Konsenssequenzen 76
5.2.2 Sequenzeigenschaften der Phagotope 78
5.2.3 Zuordnung der Konsenssequenzen auf dem CD4-Molekül 79
VI
5.3 MAX16H5-Bindungshemmtest 80
5.3.1 Positivkontrolle 81
5.3.2 Unabhängige Testpeptide 82
5.3.3 MAX16H5-Bindungshemrnung durch Pepscan-Peptide 83
5.3.4 MAXI6H5-Bindungshemmung durch Phage Display-Peptide 83
5.3.5 Spezifität der Bindungshemmung 85
5.3.6 Eigenschaften der Hemmpeptide 85
5.3.7 Bedeutung der linearen CD4-Sequenzausschnitte 88
5.3.8 Hypothese über den MAX16H5-Wirkungsmechanismus 90
5.4 Ausblicke 92
6. Zusammenfassung der Arbeit 94
Literaturverzeichnis XIV
Anhang-I XXII
Anhang-II XXIII
Anhang-III XXIV
Anhang-IV XXVI
Anhang-V XXVII
Anhang-VI XXVIII
Danksagung XXIX
Erklärung über die eingeständige Abfassung der Arbeit XXX
Persönlicher und beruflicher Werdegang XXXI
VII
Abbildungsverzeichnis
Abb. 1.1: Schematische Darstellung des CD4-Moleküls. 5
Abb. 1.2: Schematische Darstellung des T-Zelle Rezeptor Komplexes (TCR). 6
Abb. 1.3: Zusammenfassung der Signaltransduktion in der CD4 T-Zelle. 8
Abb. 3.1: Schematische Darstellung der Phasenverteilung bei der Aufreinigung der Lymphozyten
aus einem Buffy Coat. 21
Abb. 3.2: Bildliche Darstellung des MAX16H5-Bindungshemmtests. 25
Abb. 3.3: Schematische Darstellung des Aufbaues einer Pepscan-Membran. 28
Abb. 3.4: Schematische Darstellung des M13-Bakteriophagen mit veränderten Oberflächenprotein VIII. 30
Abb. 3.5: Schematische Darstellung des Selektionsablaufes einer 7er-Phagen Bank durch anti-CD4
Antikörper (Abb. nach New England Biolabs). 31
Abb. 3.6: Anwendungsbeispiel der BLOSUM62-Matrize. 33
Abb. 4.1: Darstellung eines positiven Pepscan-Expcriments. 37
Abb. 4.2: Schematische Darstellung einer durchlusszytometrischcn MAX 16H5-Austitrierung. 48
Abb. 4.3: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des MaxI6H5-FITC durch huC D4s
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender 11 und 111). 52
Abb. 4.4: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Maxl6H5-FITC durch Peptid 18
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und 111). 54
Abb. 4.5: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Max 16H5-KITC durch Peptid 19
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 56
Abb. 4.6: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Max 16H5-F1TC durch Peptid 2
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 60
Abb. 4.7: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Maxl6H5-FITC durch Peptid 10
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 63
Abb. 4.8: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Max 16H5-FITC durch Peptid 11
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 66
Abb. 4.9: Graphische Darstellung der Austitrierung der huCD4s-Hemmung. 68
Abb. 4.10: Graphische Darstellung der Austitrierung der Peptid 18-Hemmung. 68
Abb. 4.11: Graphische Darstellung der Austitrierung der Peptid 102-Hemmung. 69
Abb. 4.12: Graphische Darstellung der Austitrierung der Peptid 1 h-Hemmung. 70
Abb. 5.1: Abbildung der gpl20 interagierenden CD4-Domäne-D,. 86
Abb. 5.2: Schematische Darstellung des möglichen MAXI6H5-Hcmmungsmechanismus
durch Peptid 10 und 11. 87
Abb. 5.3: Schematische Darstellung der Verteilung der linearen synthetischen
CD4-Peptide 2, 18 und 19. 89
Abb. 5.4: Schematische Zusammenfassung der MHC-IJ/CD4-lnteraktionsbereiche. 91
XI
Tabellenverzeichnis
Tab. 2.1: Buffy Coat Spender 3
Tab. 2.2: Liste der aufgereinigten murinen anti-CD4 Antikörper. 14
Tab. 2.3: Zusammenfassung der eingesetzten Detektionsantikörper 14
Tab. 2.4: Zusammenfassung der untersuchten synthetischen Peptide und huCD4s. 15
Tab. 2.5: Zusammenstellung der synthetisierten CD4-Pepscan-Membranen. 16
Tab. 2.6: Liste der eingesetzten Software/Programme 20
Tab. 3.1: Einstellparameter des FACS-Geräts 23
Tab. 3.2: Auflistung der in Bindungshemmtest untersuchten Peptide. 26
Tab. 3.3: Zusammenfassung der aufgestellten Verdünnungsreihen der untersuchten Hemmpeptide
bzw. huCD4s und deren entsprechenden Mengen. 27
Tab. 3.4: Regressionssätze zur Bestimmung des Signifikanzniveaus im Bindungshemmtest 35
Tab. 4.1: Zusammenfassung der Pepscan-Erghebnisse. 39
Tab. 4.2: Anti-CD4 Antikörper-Bindungsgruppen. 40
Tab. 4.3: Verteilung der anti-CD4 Antikörpern gebundenen Sekundärstrukturelemente auf dem
CD4-Molekül. 41
Tab. 4.4: Zusammenfassung mit der 7CT-Phagenbank selektierten MAX 16H5-Sequenzen. 42
Tab. 4.5: Zusammenfassung mit der 7er-Phagenbank selektierten MAX5C4-Sequenzen. 43
Tab. 4.6: Zusammenfassung der mit der 7cr-Phagenbank selektierten MAX7D2-Sequenzen. 43
Tab. 4.7: Zusammenfassung der mit der 7CT-Phagenbank selektierten MAX 2E6-Sequenzen. 44
Tab. 4.8: Zusammenfassung der mit der 7 -Phagenbank Selektierten 20C7-Sequenzen. 44
Tab. 4.9: Zusammenfassung der mit der 7er-Phagenbank selektierten MAX22G9-Sequenzen. 45
Tab. 4.10: Zusammenfassung der mit der 7er-Phagenbank selektierten MAX 12F6-Sequenzen. 45
Tab. 4.11: Zusammenfassung der Ergebnisse der MAX16H5-FITC-Austitrierung. 49
Tab. 4.12: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante huCD4s-Menge. 50
Tab. 4.13: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und des huCD4s-Bindungshemmtests. 51
Tab. 4.14: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch Peptid 18. 53
Tab. 4.15Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-FITC
an CD4 T-Zellen durch Peptid 19. 55
Tab. 4.16: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle und
der Peptiden 18 und 19-Bindungshemmteste. 57
XII
Tab. 4.17: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-FITC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante Peptid 2-Menge. 59
Tab. 4.18: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und der Peptid 2-Bindungshemmtests. 59
Tab. 4.19: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante Peptid 10-Menge. 62
Tab. 4.20: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und der Peptid 10-Bindungshemmtests. 62
Tab. 4.21: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX 16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante Peptid 11-Menge. 65
Tab. 4.22: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und der Peptid 11-Bindungshemmtests. 65
Tab. 4.23: Datenzusammenstellung aus den Austitrirungsexperimenten von huCD4s und des Peptid 18. 67
Tab. 4.24: Datenzusammenstellung der Peptid 102-Austitrirungsexperimenten. 69
Tab. 4.25: Zusammenstellung der Daten aus den Austitrirungsexperimenten von Peptid 112. 70
Tab. 5.1: Konsenssequenzen aus der 7er-Phagenbank. 77
XIII
|
| adam_txt |
Inhaltsverzeichnis
Bibliographische Beschreibung HI
Referat m
Inhaltsverzeichnis IV
Abkürzungsverzeichnis VIII
Abbildungsverzeichnis XI
Tabellenverzeichnis XII
1. Einleitung 1
1.1 Allgemeine Funktionen des Immunsystems 1
1.2 Die T-Zelle und ihre Funktion im Immunsystem 2
1.3 Aktivierung und Regulierung der CD4+ T-Zelle 3
1.3.1 Aktivierung der T-Zelle und Funktion des CD4-Moleküls 4
1.3.2 Toleranz und Immunmodulation 9
1.4 Ziel der Arbeit 12
2. Material 13
2.1 Lymphozyten für den zellulären Hemmtest 13
2.2 Antikörper 13
2.2.1 Anti-CD4 Antikörper 13
2.2.2 Detektionsantikörper 14
2.3 Phage Dispaly PCR-Primer 15
2.4 Synthetische Peptide und rekombinante Proteine 15
2.5 Chemikalien 16
2.6 Pepscan-Membranen 16
2.7 Geräte 16
2.8 Kunststoffartikel und sonstige Verbrauchsmaterialien 26
2.9 Puffer 17
2.9.1 DNS-Elektrophorese Puffer 17
2.9.2 Pepscan Puffer 17
IV
2.9.3 Phagenbank Puffer 17
2.9.4 CD4-Elisa Puffer 18
2.9.5 FACS-Puffer 18
2.10 Zellkulturmedien 19
2.10.1 Kommerzielle Zellkulturmedien 19
2.10.2 hergestellte Zellkulturmedien 19
2.10.3 Bakteriologische Medien 19
2.10.4 Solide Bakterienkulturen 19
2.11 Programme/Software 20
3. Methoden 21
3.1 Aufreinigungsmethode der Lymphozyten
für den MAX16H5-Bindungshemmtest 21
3.1.1 Prinzip der Lymphozyten Aufreinigung 21
3.1.2 Aufreinigungsprotokoll 22
3.2 Durchflusszytometrie 22
3.2.1 Prinzip 22
3.2.2 FACS-Einstellungsparameter 23
3.3 MAX16H5-Bindungshemmtest durch Peptidsequenzen 24
3.3.1 Prinzip des Bindungshemmtests 24
3.3.2 Bindungshemmtest Protokoll 26
3.4 Mengenabhängigkeit der Peptidhemmung 26
3.4.1 Prinzip 26
3.4.2 Peptid Austitrationsprotokoll 27
3.5 Pepscan-Methode 27
3.5.1 Prinzip des Pepscans 27
3.5.2 Pepscan-Protokoll mit aufgereinigten anti-CD4 Antikörpern 28
3.5.3 Pepscan-Protokoll mit nicht aufgereinigten anti-CD4 Antikörpern 29
3.5.4 Membran-Reaktivierungs-Protokoll 29
3.6 Phagenbank-Methode 30
3.6.1 Prinzip der Phagenbank-Methode 30
3.6.2 Protokoll der Phagenbank-Methode 31
3.63 PCR-Amplifikation der DNS-Proben 32
V
3.6.4 Sequenzdatenanalyse 32
3.7 ELISA 34
3.8 Grafische Darstellung und statistische Auswertung 35
4. Ergebnisse 36
4.1 Epitop-screening 36
4.1.1 Pepscan 36
4.1.2 Phage Display 41
4.2 MAX16H5-Bindungshemmtest 47
4.2.1 MAX 16H5-Austitration 47
4.2.2 Validitätskontrolle 50
4.2.3 Unabhängige Peptidkontrollen 53
4.2.4 Bindungshemmtest durch Peptid 2 58
4.2.5 Bindungshemmtest durch Peptid 10 61
4.2.6 Bindungshemmtest durch Peptid 11 64
4.3 Austitrirung der Hemmpeptide 67
4.3.1 Validitätskontrollen 67
4.3.2 Austitrierung von Peptid 10 69
4.3.3 Austitrierung von Peptid 11 70
5. Diskussion 71
5.1 CD4-Pepscan von anti-CD4 Antikörpern 71
5.1.1 Pepscan-Bindungsgruppen 71
5.1.2 Pepscan-Bindungsstrukturen 71
5.1.3 Antikörper mit mehreren Pepscan Bindungssequenzen 72
5.1.4 Pescan-Sequenzen mit einer hohen Bindungsfrequenz 73
5.1.5 Bindungsunterschied in Abhängigkeit der Antikörperform 74
5.2 Phagotop-Bindung von anti-CD4 Antikörpern 76
5.2.1 anti-CD4 Antikörper Konsenssequenzen 76
5.2.2 Sequenzeigenschaften der Phagotope 78
5.2.3 Zuordnung der Konsenssequenzen auf dem CD4-Molekül 79
VI
5.3 MAX16H5-Bindungshemmtest 80
5.3.1 Positivkontrolle 81
5.3.2 Unabhängige Testpeptide 82
5.3.3 MAX16H5-Bindungshemrnung durch Pepscan-Peptide 83
5.3.4 MAXI6H5-Bindungshemmung durch Phage Display-Peptide 83
5.3.5 Spezifität der Bindungshemmung 85
5.3.6 Eigenschaften der Hemmpeptide 85
5.3.7 Bedeutung der linearen CD4-Sequenzausschnitte 88
5.3.8 Hypothese über den MAX16H5-Wirkungsmechanismus 90
5.4 Ausblicke 92
6. Zusammenfassung der Arbeit 94
Literaturverzeichnis XIV
Anhang-I XXII
Anhang-II XXIII
Anhang-III XXIV
Anhang-IV XXVI
Anhang-V XXVII
Anhang-VI XXVIII
Danksagung XXIX
Erklärung über die eingeständige Abfassung der Arbeit XXX
Persönlicher und beruflicher Werdegang XXXI
VII
Abbildungsverzeichnis
Abb. 1.1: Schematische Darstellung des CD4-Moleküls. 5
Abb. 1.2: Schematische Darstellung des T-Zelle Rezeptor Komplexes (TCR). 6
Abb. 1.3: Zusammenfassung der Signaltransduktion in der CD4 T-Zelle. 8
Abb. 3.1: Schematische Darstellung der Phasenverteilung bei der Aufreinigung der Lymphozyten
aus einem Buffy Coat. 21
Abb. 3.2: Bildliche Darstellung des MAX16H5-Bindungshemmtests. 25
Abb. 3.3: Schematische Darstellung des Aufbaues einer Pepscan-Membran. 28
Abb. 3.4: Schematische Darstellung des M13-Bakteriophagen mit veränderten Oberflächenprotein VIII. 30
Abb. 3.5: Schematische Darstellung des Selektionsablaufes einer 7er-Phagen Bank durch anti-CD4
Antikörper (Abb. nach New England Biolabs). 31
Abb. 3.6: Anwendungsbeispiel der BLOSUM62-Matrize. 33
Abb. 4.1: Darstellung eines positiven Pepscan-Expcriments. 37
Abb. 4.2: Schematische Darstellung einer durchlusszytometrischcn MAX 16H5-Austitrierung. 48
Abb. 4.3: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des MaxI6H5-FITC durch huC'D4s
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender 11 und 111). 52
Abb. 4.4: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Maxl6H5-FITC durch Peptid 18
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und 111). 54
Abb. 4.5: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Max 16H5-KITC durch Peptid 19
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 56
Abb. 4.6: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Max 16H5-F1TC durch Peptid 2
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 60
Abb. 4.7: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Maxl6H5-FITC durch Peptid 10
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 63
Abb. 4.8: Graphisch dargestellt sind die Bindungshemmteste des Max 16H5-FITC durch Peptid 11
an zwei unterschiedlichen Lymphozyten-Chargen (Spender II und III). 66
Abb. 4.9: Graphische Darstellung der Austitrierung der huCD4s-Hemmung. 68
Abb. 4.10: Graphische Darstellung der Austitrierung der Peptid 18-Hemmung. 68
Abb. 4.11: Graphische Darstellung der Austitrierung der Peptid 102-Hemmung. 69
Abb. 4.12: Graphische Darstellung der Austitrierung der Peptid 1 h-Hemmung. 70
Abb. 5.1: Abbildung der gpl20 interagierenden CD4-Domäne-D,. 86
Abb. 5.2: Schematische Darstellung des möglichen MAXI6H5-Hcmmungsmechanismus
durch Peptid 10 und 11. 87
Abb. 5.3: Schematische Darstellung der Verteilung der linearen synthetischen
CD4-Peptide 2, 18 und 19. 89
Abb. 5.4: Schematische Zusammenfassung der MHC-IJ/CD4-lnteraktionsbereiche. 91
XI
Tabellenverzeichnis
Tab. 2.1: Buffy Coat Spender '3
Tab. 2.2: Liste der aufgereinigten murinen anti-CD4 Antikörper. 14
Tab. 2.3: Zusammenfassung der eingesetzten Detektionsantikörper 14
Tab. 2.4: Zusammenfassung der untersuchten synthetischen Peptide und huCD4s. 15
Tab. 2.5: Zusammenstellung der synthetisierten CD4-Pepscan-Membranen. 16
Tab. 2.6: Liste der eingesetzten Software/Programme 20
Tab. 3.1: Einstellparameter des FACS-Geräts 23
Tab. 3.2: Auflistung der in Bindungshemmtest untersuchten Peptide. 26
Tab. 3.3: Zusammenfassung der aufgestellten Verdünnungsreihen der untersuchten Hemmpeptide
bzw. huCD4s und deren entsprechenden Mengen. 27
Tab. 3.4: Regressionssätze zur Bestimmung des Signifikanzniveaus im Bindungshemmtest 35
Tab. 4.1: Zusammenfassung der Pepscan-Erghebnisse. 39
Tab. 4.2: Anti-CD4 Antikörper-Bindungsgruppen. 40
Tab. 4.3: Verteilung der anti-CD4 Antikörpern gebundenen Sekundärstrukturelemente auf dem
CD4-Molekül. 41
Tab. 4.4: Zusammenfassung mit der 7CT-Phagenbank selektierten MAX 16H5-Sequenzen. 42
Tab. 4.5: Zusammenfassung mit der 7er-Phagenbank selektierten MAX5C4-Sequenzen. 43
Tab. 4.6: Zusammenfassung der mit der 7cr-Phagenbank selektierten MAX7D2-Sequenzen. 43
Tab. 4.7: Zusammenfassung der mit der 7CT-Phagenbank selektierten MAX 2E6-Sequenzen. 44
Tab. 4.8: Zusammenfassung der mit der 7"-Phagenbank Selektierten 20C7-Sequenzen. 44
Tab. 4.9: Zusammenfassung der mit der 7er-Phagenbank selektierten MAX22G9-Sequenzen. 45
Tab. 4.10: Zusammenfassung der mit der 7er-Phagenbank selektierten MAX 12F6-Sequenzen. 45
Tab. 4.11: Zusammenfassung der Ergebnisse der MAX16H5-FITC-Austitrierung. 49
Tab. 4.12: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante huCD4s-Menge. 50
Tab. 4.13: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und des huCD4s-Bindungshemmtests. 51
Tab. 4.14: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch Peptid 18. 53
Tab. 4.15Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-FITC
an CD4 T-Zellen durch Peptid 19. 55
Tab. 4.16: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle und
der Peptiden 18 und 19-Bindungshemmteste. 57
XII
Tab. 4.17: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-FITC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante Peptid 2-Menge. 59
Tab. 4.18: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und der Peptid 2-Bindungshemmtests. 59
Tab. 4.19: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante Peptid 10-Menge. 62
Tab. 4.20: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und der Peptid 10-Bindungshemmtests. 62
Tab. 4.21: Zusammenfassung der Ergebnisse aus dem Bindungshemmtest des MAX 16H5-F1TC
an CD4+ T-Zellen durch eine konstante Peptid 11-Menge. 65
Tab. 4.22: Signifikanzberechnung der Unterschiede zwischen den Regressionswerten der Kontrolle
und der Peptid 11-Bindungshemmtests. 65
Tab. 4.23: Datenzusammenstellung aus den Austitrirungsexperimenten von huCD4s und des Peptid 18. 67
Tab. 4.24: Datenzusammenstellung der Peptid 102-Austitrirungsexperimenten. 69
Tab. 4.25: Zusammenstellung der Daten aus den Austitrirungsexperimenten von Peptid 112. 70
Tab. 5.1: Konsenssequenzen aus der 7er-Phagenbank. 77
XIII |
| any_adam_object | 1 |
| any_adam_object_boolean | 1 |
| author | Solignac, Pascal-François 1971- |
| author_GND | (DE-588)134070097 |
| author_facet | Solignac, Pascal-François 1971- |
| author_role | aut |
| author_sort | Solignac, Pascal-François 1971- |
| author_variant | p f s pfs |
| building | Verbundindex |
| bvnumber | BV023171181 |
| ctrlnum | (OCoLC)227347327 (DE-599)BVBBV023171181 |
| dewey-full | 615.3 |
| dewey-hundreds | 600 - Technology (Applied sciences) |
| dewey-ones | 615 - Pharmacology and therapeutics |
| dewey-raw | 615.3 |
| dewey-search | 615.3 |
| dewey-sort | 3615.3 |
| dewey-tens | 610 - Medicine and health |
| discipline | Medizin |
| discipline_str_mv | Medizin |
| format | Book |
| fullrecord | <?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><collection xmlns="http://www.loc.gov/MARC21/slim"><record><leader>01179nam a2200301 c 4500</leader><controlfield tag="001">BV023171181</controlfield><controlfield tag="003">DE-604</controlfield><controlfield tag="005">20090406 </controlfield><controlfield tag="007">t</controlfield><controlfield tag="008">080219s2007 ad|| m||| 00||| ger d</controlfield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(OCoLC)227347327</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(DE-599)BVBBV023171181</subfield></datafield><datafield tag="040" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-604</subfield><subfield code="b">ger</subfield><subfield code="e">rakwb</subfield></datafield><datafield tag="041" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">ger</subfield></datafield><datafield tag="049" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-355</subfield></datafield><datafield tag="082" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">615.3</subfield><subfield code="2">22/ger</subfield></datafield><datafield tag="084" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">610</subfield><subfield code="2">sdnb</subfield></datafield><datafield tag="100" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">Solignac, Pascal-François</subfield><subfield code="d">1971-</subfield><subfield code="e">Verfasser</subfield><subfield code="0">(DE-588)134070097</subfield><subfield code="4">aut</subfield></datafield><datafield tag="245" ind1="1" ind2="0"><subfield code="a">Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern</subfield><subfield code="c">eingereicht von Pascal-François Solignac</subfield></datafield><datafield tag="264" ind1=" " ind2="1"><subfield code="c">2007</subfield></datafield><datafield tag="300" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">XIII, 96, XIV - XXXI S.</subfield><subfield code="b">Ill., graph. Darst.</subfield></datafield><datafield tag="336" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">txt</subfield><subfield code="2">rdacontent</subfield></datafield><datafield tag="337" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">n</subfield><subfield code="2">rdamedia</subfield></datafield><datafield tag="338" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">nc</subfield><subfield code="2">rdacarrier</subfield></datafield><datafield tag="500" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">Leipzig, Univ., Diss., 2007</subfield></datafield><datafield tag="655" ind1=" " ind2="7"><subfield code="0">(DE-588)4113937-9</subfield><subfield code="a">Hochschulschrift</subfield><subfield code="2">gnd-content</subfield></datafield><datafield tag="856" ind1="4" ind2="2"><subfield code="m">HBZ Datenaustausch</subfield><subfield code="q">application/pdf</subfield><subfield code="u">http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=016357850&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA</subfield><subfield code="3">Inhaltsverzeichnis</subfield></datafield><datafield tag="999" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-016357850</subfield></datafield></record></collection> |
| genre | (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content |
| genre_facet | Hochschulschrift |
| id | DE-604.BV023171181 |
| illustrated | Illustrated |
| index_date | 2024-07-02T19:57:46Z |
| indexdate | 2024-07-09T21:12:13Z |
| institution | BVB |
| language | German |
| oai_aleph_id | oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-016357850 |
| oclc_num | 227347327 |
| open_access_boolean | |
| owner | DE-355 DE-BY-UBR |
| owner_facet | DE-355 DE-BY-UBR |
| physical | XIII, 96, XIV - XXXI S. Ill., graph. Darst. |
| publishDate | 2007 |
| publishDateSearch | 2007 |
| publishDateSort | 2007 |
| record_format | marc |
| spelling | Solignac, Pascal-François 1971- Verfasser (DE-588)134070097 aut Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern eingereicht von Pascal-François Solignac 2007 XIII, 96, XIV - XXXI S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Leipzig, Univ., Diss., 2007 (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content HBZ Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=016357850&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Solignac, Pascal-François 1971- Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern |
| subject_GND | (DE-588)4113937-9 |
| title | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern |
| title_auth | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern |
| title_exact_search | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern |
| title_exact_search_txtP | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern |
| title_full | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern eingereicht von Pascal-François Solignac |
| title_fullStr | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern eingereicht von Pascal-François Solignac |
| title_full_unstemmed | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern eingereicht von Pascal-François Solignac |
| title_short | Epitop-Charakterisierung von therapeutisch relevanten anti-humanen-Cd4 Antikörpern |
| title_sort | epitop charakterisierung von therapeutisch relevanten anti humanen cd4 antikorpern |
| topic_facet | Hochschulschrift |
| url | http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=016357850&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |
| work_keys_str_mv | AT solignacpascalfrancois epitopcharakterisierungvontherapeutischrelevantenantihumanencd4antikorpern |