In-vitro-Testung neuer HIV-Replikationsinhibitoren im Vergleich mit etablierten Substanzen:
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2007
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsübersicht M
Inhaltsübersicht
Danksagung I
Inhaltsübersicht II
Inhaltsverzeichnis III
Abkürzungsverzeichnis VI
1 Einleitung 1
2 Material und Methoden 16
3 Versuchsaufbau und- ablauf «. ..... 28
4 Ergebnisse ......... 34
5 Diskussion „ 55
6 Zusammenfassung 62
Literatur- und Quellenverzeichnis VIII
Abbildungsverzeichnis XVI
Curriculum Vitae XVIII
Inhaltsverzeichnis III
Inhaltsverzeichnis
Danksagung I
Inhaltsübersicht II
Inhaltsverzeichnis III
Abkürzungsverzeichnis VI
1 Einleitung — 1
1.1 Epidemiologie der HIV-Infektion 1
1.2 Übertragungswege 2
1.3 Diagnostik 2
1.4 Herkunft und Heterogenität der Humanen Immundefizienzviren 3
1.5 Der natürliche Verlauf der HIV-Infektion ohne Therapie 4
1.6 Viruslast und CD4-Zellzahl 4
1.7 Morphologie von HIV-1 4
1.8 Organisation des viralen Genoms 6
1.9 Replikationszyklus des HI-Virus 8
1.10 Reverse Transkriptase 9
1.11 Protease 11
1.12 Bisherige Angriffspunkte in der HIV-Therapie und neue Ansatzpunkte 12
1.12.1 NRTIs 12
1.12.2 NNRTIs 12
1.12.3 PIs 13
1.12.4 Neue Ansatzpunkte in der HIV-Therapie 13
1.13 Fragestellung und Zielsetzung 14
2 Material und Methoden 16
2.1 HUT 78- und V 79-ZeIlen 16
2.2 Viren 17
2.3 RT-Test (Reverse Transkriptase-Test, nicht radioaktiv) und Prinzip 17
Inhaltsverzeichnis IV
2.4 Replikationsinhibitoren 18
2.4.1 Potentielle Protease-Inhibitoren 18
2.4.2 Potentielle Rev-Inhibitoren 19
2.4.3 Reverse Transkriptase-Inhibitoren 21
2.4.3.1. RT-Inhibitor-Konzentrationen bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 21
2.4.3.2 RT-Inhibitor-Konzentrationen bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 23
2.5 Statistische Auswertung 24
2.6 Toxizitätstest: Trypanblau Assay 24
2.7 Lyse-Puffer und Pipetten 27
3 Versuchsaufbau und- ablauf 28
3.1 Versuchsaufbau von Protease-, Rev- und RT-Inhibitoren bei chronisch infizierten
HUT 78-Zellen 28
3.1.1 Versuchsablauf (Versuch I) 30
3.2 Versuchsauftau von RT-Inhibitoren bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 31
3.2.1 Versuchsablauf (Versuch II) 32
3.3 RT-Messung von Versuch I und II (3.1.1 und 3.2.1) 33
4 Ergebnisse 34
4.1 Neue Replikationsinhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 34
4.1.1 Uvaol (Substanz #1,PI) bei HIV-l/M 34
4.1.2 Uvaol (Substanz #1,PI) bei HIV-l/O 36
4.1.3 Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV- l/M 37
4.1.4 Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV-I/O 38
4.1.5 Coumermycin (Susbstanz #4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/M 39
4.1.6 Coumermycin (Susbstanz #4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/O 40
4.1.7 Nr. 1445896 (Substanz #7, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/M 41
4.1.8 Nr. 1445896 (Substanz#7. Rev-Inhibitor) bei HIV-l/O 42
4.2 RT-Inhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 43
4.2.1 AZT bei HIV-l/M 43
4.2.2 AZT bei HIV-l/O 44
4.2.3 DDC bei HIV-l/M 45
4.2.4 DDCbeiHlV-1/O 46
4.2.5 DDI bei HIV-l/M 47
4.2.6 DDI bei HIV-l/O 48
Inhaltsverzeichnis V
4.2.7 NVP bei HIV-l/M 49
4.2.8 NVP bei HIV-l/0 50
4.3 RT-Inhibitoren bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 51
4.3.1 AZTbeiHfV-1/M 51
4.3.2 DDI bei HIV-l/M 52
4.3.3 NVP bei HIV-l/M 53
5 Diskussion 55
5.1 Vergleich neuer Replikationsinhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen... 56
5.2 Vergleich RT-Inhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 58
5.3 Vergleich RT-Inhibitoren bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 60
6 Zusammenfassung . . . ¦•—62
Literatur-und Quellenverzeichnis VIII
Abbildungsverzeichnis XVI
Curriculum Vitae XVIII
Abbildungsverzeichnis _^___^__ XVI
Abbildungsverzeichnis
Abb. 1.1: HlV-Prävalenz bei Erwachsenen.
Abb. 1.2: Aufbau des HlV-Partikels.
Abb. 1.3: Schematische Darstellung des HIV-1 Genom.
Abb. 1.4: Replikationszyklus eines Virus innerhalb einer CD4-Zielzelle.
Abb. 1.5: Reverse Transkriptase.
Abb. 1.6: Protease.
Abb. 2.1: Chemilumineszens-Testprinzip.
Abb. 2.2: AZT: Strukturformel.
Abb. 2.3: DDC: Strukturformel.
Abb. 2.4: DDI: Strukturformel.
Abb. 2.5: NVP: Strukturformel.
Abb. 2.6: Toxizitätsergebnis Uvaol.
Abb. 2.7: Toxizitätsergebnis Nandrolon.
Abb. 2.8: Toxizitätsergebnis Coumermycin.
Abb. 2.9: Toxizitätsergebnis Nr. 1445896.
Abb. 3.1: HIV-l/M. Plattenbelegung: Potentielle Protease- und Rev- Inhibitoren.
Abb. 3.2: HIV-I/O. Plattenbelegung: Potentielle Protease- und Rev- Inhibitoren.
Abb. 3.3: HIV- l/M. Plattenbelegung: RT-Inhibitoren.
Abb. 3.4: HIV-I/O. Plattenbelegung: RT-Inhibitoren.
Abb. 3.5: HIV-l/M. Plattenbetegung: RT-Inhibitoren bei frisch infizierten
Zellen.
Abb. 4.1: Ergebnis: Uvaol (Substanz #1, PDbei HIV-l/M.
Abb. 4.2: Ergebnis: Uvaol (Substanz #1, PI) bei HIV-I/O.
Abb. 4.3: Ergebnis: Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV-l/M.
Abb. 4.4: Ergebnis: Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV-l/O.
Abb. 4.5: Ergebnis: Coumermycin (Susbstanz #4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/M.
Abb. 4.6: Ergebnis: Coumermycin (Susbstanz#4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/O.
Abbildungsverzeichnis XVII
Abb. 4.7: Ergebnis: Nr. 1445896 (Substanz #7, Rev-lnhibitor) bei HIV-l/M.
Abb. 4.8: Ergebnis: Nr. 1445896 (Substanz #7, Rev-lnhibitor) bei HIV-I/O.
Abb. 4.9: Ergebnis: AZT: HIV-l/M bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.10: Ergebnis: AZT: HIV- I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.11: Ergebnis: DDC: HIV- l/M bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.12: Ergebnis: DDC: HIV- I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.13: Ergebnis: DDI: HIV-l/M bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.14: Ergebnis: DDI: HIV-I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb.4.15: Ergebnis: NVP: HIV- l/M bei chron. infizierten Zellen.
I Abb. 4.16: Ergebnis: NVP: HIV-I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.17: Ergebnis: AZT: HIV-l/M bei frisch infizierten Zellen.
Abb. 4.18: Ergebnis: DDI: HIV-l/M bei frisch infizierten Zellen.
Abb. 4.19: Ergebnis: NVP: HIV- l/M bei frisch infizierten Zellen.
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| adam_txt |
Inhaltsübersicht M
Inhaltsübersicht
Danksagung I
Inhaltsübersicht II
Inhaltsverzeichnis III
Abkürzungsverzeichnis VI
1 Einleitung 1
2 Material und Methoden 16
3 Versuchsaufbau und- ablauf «. . 28
4 Ergebnisse . 34
5 Diskussion „ 55
6 Zusammenfassung 62
Literatur- und Quellenverzeichnis VIII
Abbildungsverzeichnis XVI
Curriculum Vitae XVIII
Inhaltsverzeichnis III
Inhaltsverzeichnis
Danksagung I
Inhaltsübersicht II
Inhaltsverzeichnis III
Abkürzungsverzeichnis VI
1 Einleitung — 1
1.1 Epidemiologie der HIV-Infektion 1
1.2 Übertragungswege 2
1.3 Diagnostik 2
1.4 Herkunft und Heterogenität der Humanen Immundefizienzviren 3
1.5 Der natürliche Verlauf der HIV-Infektion ohne Therapie 4
1.6 Viruslast und CD4-Zellzahl 4
1.7 Morphologie von HIV-1 4
1.8 Organisation des viralen Genoms 6
1.9 Replikationszyklus des HI-Virus 8
1.10 Reverse Transkriptase 9
1.11 Protease 11
1.12 Bisherige Angriffspunkte in der HIV-Therapie und neue Ansatzpunkte 12
1.12.1 NRTIs 12
1.12.2 NNRTIs 12
1.12.3 PIs 13
1.12.4 Neue Ansatzpunkte in der HIV-Therapie 13
1.13 Fragestellung und Zielsetzung 14
2 Material und Methoden 16
2.1 HUT 78- und V 79-ZeIlen 16
2.2 Viren 17
2.3 RT-Test (Reverse Transkriptase-Test, nicht radioaktiv) und Prinzip 17
Inhaltsverzeichnis IV
2.4 Replikationsinhibitoren 18
2.4.1 Potentielle Protease-Inhibitoren 18
2.4.2 Potentielle Rev-Inhibitoren 19
2.4.3 Reverse Transkriptase-Inhibitoren 21
2.4.3.1. RT-Inhibitor-Konzentrationen bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 21
2.4.3.2 RT-Inhibitor-Konzentrationen bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 23
2.5 Statistische Auswertung 24
2.6 Toxizitätstest: Trypanblau Assay 24
2.7 Lyse-Puffer und Pipetten 27
3 Versuchsaufbau und- ablauf 28
3.1 Versuchsaufbau von Protease-, Rev- und RT-Inhibitoren bei chronisch infizierten
HUT 78-Zellen 28
3.1.1 Versuchsablauf (Versuch I) 30
3.2 Versuchsauftau von RT-Inhibitoren bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 31
3.2.1 Versuchsablauf (Versuch II) 32
3.3 RT-Messung von Versuch I und II (3.1.1 und 3.2.1) 33
4 Ergebnisse 34
4.1 Neue Replikationsinhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 34
4.1.1 Uvaol (Substanz #1,PI) bei HIV-l/M 34
4.1.2 Uvaol (Substanz #1,PI) bei HIV-l/O 36
4.1.3 Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV- l/M 37
4.1.4 Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV-I/O 38
4.1.5 Coumermycin (Susbstanz #4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/M 39
4.1.6 Coumermycin (Susbstanz #4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/O 40
4.1.7 Nr. 1445896 (Substanz #7, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/M 41
4.1.8 Nr. 1445896 (Substanz#7. Rev-Inhibitor) bei HIV-l/O 42
4.2 RT-Inhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 43
4.2.1 AZT bei HIV-l/M 43
4.2.2 AZT bei HIV-l/O 44
4.2.3 DDC bei HIV-l/M 45
4.2.4 DDCbeiHlV-1/O 46
4.2.5 DDI bei HIV-l/M 47
4.2.6 DDI bei HIV-l/O 48
Inhaltsverzeichnis V
4.2.7 NVP bei HIV-l/M 49
4.2.8 NVP bei HIV-l/0 50
4.3 RT-Inhibitoren bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 51
4.3.1 AZTbeiHfV-1/M 51
4.3.2 DDI bei HIV-l/M 52
4.3.3 NVP bei HIV-l/M 53
5 Diskussion 55
5.1 Vergleich neuer Replikationsinhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen. 56
5.2 Vergleich RT-Inhibitoren bei chronisch infizierten HUT 78-Zellen 58
5.3 Vergleich RT-Inhibitoren bei frisch infizierten HUT 78-Zellen 60
6 Zusammenfassung . . . ¦•—62
Literatur-und Quellenverzeichnis VIII
Abbildungsverzeichnis XVI
Curriculum Vitae XVIII
Abbildungsverzeichnis _^_^_ XVI
Abbildungsverzeichnis
Abb. 1.1: HlV-Prävalenz bei Erwachsenen.
Abb. 1.2: Aufbau des HlV-Partikels.
Abb. 1.3: Schematische Darstellung des HIV-1 Genom.
Abb. 1.4: Replikationszyklus eines Virus innerhalb einer CD4-Zielzelle.
Abb. 1.5: Reverse Transkriptase.
Abb. 1.6: Protease.
Abb. 2.1: Chemilumineszens-Testprinzip.
Abb. 2.2: AZT: Strukturformel.
Abb. 2.3: DDC: Strukturformel.
Abb. 2.4: DDI: Strukturformel.
Abb. 2.5: NVP: Strukturformel.
Abb. 2.6: Toxizitätsergebnis Uvaol.
Abb. 2.7: Toxizitätsergebnis Nandrolon.
Abb. 2.8: Toxizitätsergebnis Coumermycin.
Abb. 2.9: Toxizitätsergebnis Nr. 1445896.
Abb. 3.1: HIV-l/M. Plattenbelegung: Potentielle Protease- und Rev- Inhibitoren.
Abb. 3.2: HIV-I/O. Plattenbelegung: Potentielle Protease- und Rev- Inhibitoren.
Abb. 3.3: HIV- l/M. Plattenbelegung: RT-Inhibitoren.
Abb. 3.4: HIV-I/O. Plattenbelegung: RT-Inhibitoren.
Abb. 3.5: HIV-l/M. Plattenbetegung: RT-Inhibitoren bei frisch infizierten
Zellen.
Abb. 4.1: Ergebnis: Uvaol (Substanz #1, PDbei HIV-l/M.
Abb. 4.2: Ergebnis: Uvaol (Substanz #1, PI) bei HIV-I/O.
Abb. 4.3: Ergebnis: Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV-l/M.
Abb. 4.4: Ergebnis: Nandrolon (Substanz #3, PI) bei HIV-l/O.
Abb. 4.5: Ergebnis: Coumermycin (Susbstanz #4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/M.
Abb. 4.6: Ergebnis: Coumermycin (Susbstanz#4, Rev-Inhibitor) bei HIV-l/O.
Abbildungsverzeichnis XVII
Abb. 4.7: Ergebnis: Nr. 1445896 (Substanz #7, Rev-lnhibitor) bei HIV-l/M.
Abb. 4.8: Ergebnis: Nr. 1445896 (Substanz #7, Rev-lnhibitor) bei HIV-I/O.
Abb. 4.9: Ergebnis: AZT: HIV-l/M bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.10: Ergebnis: AZT: HIV- I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.11: Ergebnis: DDC: HIV- l/M bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.12: Ergebnis: DDC: HIV- I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.13: Ergebnis: DDI: HIV-l/M bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.14: Ergebnis: DDI: HIV-I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb.4.15: Ergebnis: NVP: HIV- l/M bei chron. infizierten Zellen.
I Abb. 4.16: Ergebnis: NVP: HIV-I/O bei chron. infizierten Zellen.
Abb. 4.17: Ergebnis: AZT: HIV-l/M bei frisch infizierten Zellen.
Abb. 4.18: Ergebnis: DDI: HIV-l/M bei frisch infizierten Zellen.
Abb. 4.19: Ergebnis: NVP: HIV- l/M bei frisch infizierten Zellen. |
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