Der Einfluss von Thrombin auf die wachstumsmodulierenden Eigenschaften von Thrombomodulin und vier seiner synthetischen Mutanten in vitro:
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2007
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis 5
Abbildungs und Tabellenverzeichnis 7
Abkürzungsverzeichnis 8
1. Einleitung 9
1.1. Einführung 9
1.2. Die Pathophysiologie der Restenose 10
1.2.1. Intimale Hyperplasie 12
1.2.2. Murale Thrombusformation und Organisation 13
1.2.3. Akuter Lumenverlust durch elastisches Recoil 13
1.3. Thrombomodulin 14
1.4 Ziele und Fragestellungen 18
2. Materialien und Methoden 19
2.1. Materialien für das Zellkultursystem 19
2.1.I.Zellen 19
2.1.2. Vier synthetische Mutanten des TMs 20
2.2. Methoden für das Zellkultursystem 23
2.2.1. Kultivierung / Subkultiverung der SMCs 23
2.3. Methoden der einzelnen Versuche 25
2.3.1. Kolonie Bildungs Assay (KoBi) 25
2.3.2. BrdU enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) 26
6
2.4. Statistik 30
3. Ergebnisse 31
3.1. Koloniebildungsassays 31
3.2. BrdUELISA 35
4. Diskussion 40
4.1. Zusammenfassung der wichtigsten Ergebnisse 40
4.2. Zusammenfassung der wichtigsten Daten in der Literatur 41
4.3. TM Überexpression hemmt die Proliferation 41
4.4. Mutante M2 hemmt die Proliferation stärker als Mutante ML..43
4.5. M3 reagiert stärker auf Thrombin als auf PDGF und hat
höchste Koloniebildungsfähigkeit 45
4.6. M4 proliferiert am wenigsten; reagiert relativ stark auf
Thrombin 47
4.7. Conclusio 49
5. Zusammenfassung 52
Literaturverzeichnis 53
Danksagung 57
Lebenslauf 58
7
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
Abbildung 1: Arterienwand 11
Abbildung 2: Schematische Darstellung der Protein C Aktivierung durch TM .14
Abbildung 3: Schematische Darstellung der Struktur von TM 15
Abbildung 4: Schematische Darstellung der Struktur von TM mit
Kennzeichnung der Mutationen (M1 M4) 22
Abbildung 5: Koloniebildungsassay (n=3), Mittelwerte mit
Standardabweichung 32
Abbildung 6: Koloniebildungsassay, exemplarische Abbildung jeder
Zellsorte (V, S, M1 4) 34
Abbildung 7: BrdU ELISA, Zellproliferation mit Thrombininkubation,
ohne Thrombininkubation und mit PDGF Inkubation 37
TABELLENVERZEICHNIS
Tabelle 1: Die verwendeten Zellen 21
Tabelle 2: Ergebnisse der Koloniebildungsassays 32
Tabelle 3: Statistische Signifikanz der unterschiedlichen
Koloniebildungsfähigkeit 33
Tabelle 4: Ergebnisse des BrdU ELISA 35
Tabelle 5 BrdU ELISA, Vergleich ITS vs. ITS+Thrombin vs. ITS+PDGF36
Tabelle 6: BrdU ELISA, Proliferationssteigerung nach Inkubation mit
Thrombin 38
Tabelle 7: BrdU ELISA, statistische Signifikanz des Vergleiches der
Proliferationssteigerung unter den Zelllinien 38
Tabelle 8: BrdU ELISA, V im Vergleich zu den anderen Klonen 39
|
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Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis 5
Abbildungs und Tabellenverzeichnis 7
Abkürzungsverzeichnis 8
1. Einleitung 9
1.1. Einführung 9
1.2. Die Pathophysiologie der Restenose 10
1.2.1. Intimale Hyperplasie 12
1.2.2. Murale Thrombusformation und Organisation 13
1.2.3. Akuter Lumenverlust durch elastisches Recoil 13
1.3. Thrombomodulin 14
1.4 Ziele und Fragestellungen 18
2. Materialien und Methoden 19
2.1. Materialien für das Zellkultursystem 19
2.1.I.Zellen 19
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2.2. Methoden für das Zellkultursystem 23
2.2.1. Kultivierung / Subkultiverung der SMCs 23
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4.1. Zusammenfassung der wichtigsten Ergebnisse 40
4.2. Zusammenfassung der wichtigsten Daten in der Literatur 41
4.3. TM Überexpression hemmt die Proliferation 41
4.4. Mutante M2 hemmt die Proliferation stärker als Mutante ML.43
4.5. M3 reagiert stärker auf Thrombin als auf PDGF und hat
höchste Koloniebildungsfähigkeit 45
4.6. M4 proliferiert am wenigsten; reagiert relativ stark auf
Thrombin 47
4.7. Conclusio 49
5. Zusammenfassung 52
Literaturverzeichnis 53
Danksagung 57
Lebenslauf 58
7
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
Abbildung 1: Arterienwand 11
Abbildung 2: Schematische Darstellung der Protein C Aktivierung durch TM .14
Abbildung 3: Schematische Darstellung der Struktur von TM 15
Abbildung 4: Schematische Darstellung der Struktur von TM mit
Kennzeichnung der Mutationen (M1 M4) 22
Abbildung 5: Koloniebildungsassay (n=3), Mittelwerte mit
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Abbildung 6: Koloniebildungsassay, exemplarische Abbildung jeder
Zellsorte (V, S, M1 4) 34
Abbildung 7: BrdU ELISA, Zellproliferation mit Thrombininkubation,
ohne Thrombininkubation und mit PDGF Inkubation 37
TABELLENVERZEICHNIS
Tabelle 1: Die verwendeten Zellen 21
Tabelle 2: Ergebnisse der Koloniebildungsassays 32
Tabelle 3: Statistische Signifikanz der unterschiedlichen
Koloniebildungsfähigkeit 33
Tabelle 4: Ergebnisse des BrdU ELISA 35
Tabelle 5 BrdU ELISA, Vergleich ITS vs. ITS+Thrombin vs. ITS+PDGF36
Tabelle 6: BrdU ELISA, Proliferationssteigerung nach Inkubation mit
Thrombin 38
Tabelle 7: BrdU ELISA, statistische Signifikanz des Vergleiches der
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