Der Einfluss fetaler Faktoren auf den hämatopoetischen Stammzellgehalt im Nabelschnurblut:
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Veröffentlicht: |
2006
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Beschreibung: | Frankfurt (Main), Univ., Diss., 2007 |
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 5
1.1 Zielsetzung der Arbeit 5
1.2 Hämatopoetische Stammzellen im Nabelschnurblut 6
1.3 Stammzellmarker 9
1.3.1 CD34 9
1.3.1.1 Geschichtlicher Überblick 9
1.3.1.2 Biochemie des CD34Antigens 10
1.3.1.3 Genetik und Zellzyklus 11
1.3.1.4 Epitope des CD34 13
1.3.1.5 Ausblick: Weitere Differenzierungsschritte CD34+ Zellen 14
1.3.2 CD133 16
1.3.2.1 Charakteristik des CD133 Antigens 16
1.3.2.2 Biochemie des CD 133 Antigens 16
1.3.2.3 Funktion 17
1.3.2.4 Weiterentwicklung CD133+Zellen 18
1.3.3 CD117 (c-kit) 19
1.3.3.1 Charakteristik des CD117 Antigens.... 19
1.3.3.2 Biochemie des CD117 Antigens 19
1.3.3.3 Funktion : 20
1.3.3.4 Weiterentwicklung CD117+Zellen 21
1.4 Differenzierungsschritte der Blutzellreifung 22
1.4.1 Funktion der Stammzelle 22
1.4.2 Weiterentwicklung der CFU-GEMM-Zellreihe 23
1.4.3 Weiterentwicklung der lymphatischen Zellreihe 24
2 Material und Methoden 27
2.1 Rahmenbedingungen der vorliegenden Arbeit 27
2.2 Auswahlkriterien der untersuchten Nabelschnurblutproben 27
2.3 Methode der Durchflusszytometrie 28
2.3.1 Eigenschaften des Messgerätes 29
2.3.2 Die Signalverarbeitung eines Durchflusszytometers 32
2.4 Probenaufbereitung 34
2.4.2 Material 34
2.4.2.1 Geräte 34
2.4.1.2 Einmalartikel 34
2.4.1.3 Chemische Vcrbrauchsmaterialien 34
2.4.1.4 Antikörper 35
2.4.2 Methodik der Probenaufbereitung 35
2.4.2.1 Blutentnahme 35
2.4.2.2 Zellzahlbestimmung 35
2.4.2.3 Antikörperbindung 36
2.4.2.4 Lyse 37
2.4.2.5 Zentrifuge, Absaugung, Puffer 37
2.5 Durchflusszytometrische Erfassung der untersuchten Proben 38
2.5.1 Material 38
2.5.2 Methodik der FACS-Analyse 38
2.5.2.1 Farbstoffdiskrimination 38
2.5.2.2 Zellanalyse 41
3
2.6 Auswertung der Messdaten 42
2.6.1 Quantitative Auswertung der Messdaten 42
2.6.2 Klassifikation der untersuchten Proben 45
2.7 Statistische Auswertung 47
2.7.1 Nullhypothese 47
2.7.2 David-Test 47
2.7.3 Statistische Signifikanz, p-Wert 47
2.7.4 Wilcoxon-Mann-Whitney-Test 47
2.7.5 Kruskal-Wallis-Test 49
2.7.6 Software 49
3 Ergebnisse 50
3.1 Gesamtdatenauswertung 50
3.2 Auswertung nach Leukozytenzahl 51
3.3 Auswertung nach Schwangerschaftswoche 52
3.4 Auswertung nach Geburtsgewicht 53
3.5 Auswertung nach Geschlecht des Kindes 54
3.6 Auswertung nach Geburtsmodus 54
3.7 Auswertung nach Fetal Outcome (Nabelarterien-pH) 54
3.9 Zusammenfassung der Ergebnisse 57
4 Diskussion 60
4.1 Biochemische Zusammenhänge zwischen Zellzyklus, erhöhtem Stammzellgchalt und
Hypoxie 61
4.2 Biochemische Zusammenhänge zwischen Stammzellgehalt und Leukozytose 66
4.3 Geburtshilfliche Einflussfaktoren auf den Stammzellgehalt im Nabelschnurblut 68
4.4 Erhöhter Gehalt an CD117+ Zellen im untersuchten Patientengut 71
5 Zusammenfassung (in deutscher und englischer Sprache) 72
6 Einwilligungserklärung über die Entnahme von Nabelschnurblut 74
7 Literaturverzeichnis 75
8 Bildnachweis 83
9 Tabellennachweis 84
10 Glossar und Abkürzungen 86
11 Danksagung 87
12 Lebenslauf. 88
13 Ehrenwörtliche Erklärung 89
4
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Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 5
1.1 Zielsetzung der Arbeit 5
1.2 Hämatopoetische Stammzellen im Nabelschnurblut 6
1.3 Stammzellmarker 9
1.3.1 CD34 9
1.3.1.1 Geschichtlicher Überblick 9
1.3.1.2 Biochemie des CD34Antigens 10
1.3.1.3 Genetik und Zellzyklus 11
1.3.1.4 Epitope des CD34 13
1.3.1.5 Ausblick: Weitere Differenzierungsschritte CD34+ Zellen 14
1.3.2 CD133 16
1.3.2.1 Charakteristik des CD133 Antigens 16
1.3.2.2 Biochemie des CD 133 Antigens 16
1.3.2.3 Funktion 17
1.3.2.4 Weiterentwicklung CD133+Zellen 18
1.3.3 CD117 (c-kit) 19
1.3.3.1 Charakteristik des CD117 Antigens. 19
1.3.3.2 Biochemie des CD117 Antigens 19
1.3.3.3 Funktion : 20
1.3.3.4 Weiterentwicklung CD117+Zellen 21
1.4 Differenzierungsschritte der Blutzellreifung 22
1.4.1 Funktion der Stammzelle 22
1.4.2 Weiterentwicklung der CFU-GEMM-Zellreihe 23
1.4.3 Weiterentwicklung der lymphatischen Zellreihe 24
2 Material und Methoden 27
2.1 Rahmenbedingungen der vorliegenden Arbeit 27
2.2 Auswahlkriterien der untersuchten Nabelschnurblutproben 27
2.3 Methode der Durchflusszytometrie 28
2.3.1 Eigenschaften des Messgerätes 29
2.3.2 Die Signalverarbeitung eines Durchflusszytometers 32
2.4 Probenaufbereitung 34
2.4.2 Material 34
2.4.2.1 Geräte 34
2.4.1.2 Einmalartikel 34
2.4.1.3 Chemische Vcrbrauchsmaterialien 34
2.4.1.4 Antikörper 35
2.4.2 Methodik der Probenaufbereitung 35
2.4.2.1 Blutentnahme 35
2.4.2.2 Zellzahlbestimmung 35
2.4.2.3 Antikörperbindung 36
2.4.2.4 Lyse 37
2.4.2.5 Zentrifuge, Absaugung, Puffer 37
2.5 Durchflusszytometrische Erfassung der untersuchten Proben 38
2.5.1 Material 38
2.5.2 Methodik der FACS-Analyse 38
2.5.2.1 Farbstoffdiskrimination 38
2.5.2.2 Zellanalyse 41
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2.6 Auswertung der Messdaten 42
2.6.1 Quantitative Auswertung der Messdaten 42
2.6.2 Klassifikation der untersuchten Proben 45
2.7 Statistische Auswertung 47
2.7.1 Nullhypothese 47
2.7.2 David-Test 47
2.7.3 Statistische Signifikanz, p-Wert 47
2.7.4 Wilcoxon-Mann-Whitney-Test 47
2.7.5 Kruskal-Wallis-Test 49
2.7.6 Software 49
3 Ergebnisse 50
3.1 Gesamtdatenauswertung 50
3.2 Auswertung nach Leukozytenzahl 51
3.3 Auswertung nach Schwangerschaftswoche 52
3.4 Auswertung nach Geburtsgewicht 53
3.5 Auswertung nach Geschlecht des Kindes 54
3.6 Auswertung nach Geburtsmodus 54
3.7 Auswertung nach Fetal Outcome (Nabelarterien-pH) 54
3.9 Zusammenfassung der Ergebnisse 57
4 Diskussion 60
4.1 Biochemische Zusammenhänge zwischen Zellzyklus, erhöhtem Stammzellgchalt und
Hypoxie 61
4.2 Biochemische Zusammenhänge zwischen Stammzellgehalt und Leukozytose 66
4.3 Geburtshilfliche Einflussfaktoren auf den Stammzellgehalt im Nabelschnurblut 68
4.4 Erhöhter Gehalt an CD117+ Zellen im untersuchten Patientengut 71
5 Zusammenfassung (in deutscher und englischer Sprache) 72
6 Einwilligungserklärung über die Entnahme von Nabelschnurblut 74
7 Literaturverzeichnis 75
8 Bildnachweis 83
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10 Glossar und Abkürzungen 86
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