Strahlenprotektive Effekte von Vitamin C bei externer Bestrahlung durch einen Linearbeschleuniger: Untersuchungen an einem in-vitro-Zellmodell
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2007
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung und Fragestellung 10
2. Theoretische Grundlagen
2.1. Grundlagen zum Schilddrüsenkarzinom und dessen Therapie
2.1.1. Das Schilddrüsen Karzinom 11
2.1.2. Therapieoptionen beim Schilddrüsenkarzinom 12
unter besonderer Berücksichtigung der externen
Strahlentherapie
2.2. Strahlenbiologische Aspekte
2.2.1. Grundlagen der Strahlenwirkung 14
2.2.2. DNA Schäden und ihre Reparatur 16
2.3. Vitamin C als Radioprotektor 20
3. Material und Methoden
3.1. Materialien und Geräte
3.1.1. Zelllinie 22
3.1.2. In der Zellkultur verwendete (Plastik) Materialien 23
3.1.3. In der Zellkultur verwendete Lösungen und Chemikalien 24
3.1.4. Für die Zellkultur verwendete Geräte 24
3.1.5. Für den WST 1 Proliferationstest verwendete Materialien
und Geräte 25
3.1.6. Für die FADU verwendete Materialien und Geräte 26
3.2. Methoden
3.2.1. Zellkultivierung 27
3.2.2. Vorbereitung der Versuchsansätze 27
3.2.3. Bestrahlung mit dem Linearbeschleuniger 28
3.2.4. Nachweis von Zellproliferation mit dem
Zellproliferationstest WST 1 29
3.2.5. Analyse der DNA Schäden mittels der FADU Methode
(Fluorescent Analysis of DNA Unwinding) 32
3.3. Statistik und Auswertung 37
7
4. Ergebnisse
4.1. Veränderung der Proliferationsrate
4.1.1. Proliferationstest WST 1 ohne Vitamin C 38
4.1.2. Proliferationstest WST 1 mit Vitamin C 40
4.1.3 Vergleich der Ergebnisse mit und ohne Vitamin C 43
4.2. Analyse aufgetretener DNA Schäden mit der FADU Methode
direkt nach Bestrahlung
4.2.1. Auftreten von DNA Strangbrüchen ohne Vitamin C 44
4.2.2. Auftreten von DNA Strangbrüchen mit Vitamin C 45
4.2.3. Vergleich der Ergebnisse mit und ohne Vitamin C 46
4.3. Analyse aufgetretener DNA Schäden mit der FADU Methode
18 Stunden nach Bestrahlung
4.3.1. Reparatur von DNA Strangbrüchen ohne Vitamin C 47
4.3.2. Reparatur von DNA Strangbrüchen mit Vitamin C 48
4.3.3. Reparatur von DNA Strangbrüchen Vergleich der
Ergebnisse mit und ohne Vitamin C Zugabe 49
5. Diskussion
5.1. Methodenwahl
5.1.1. Die Wahl der Vitamin C Konzentration 51
5.1.2. Der Zellproliferationstest WST 1 52
5.1.3. Die FADU Methode 52
5.2. Zellproliferationstest WST 1 53
5.3. Analyse der DNA Schäden mit der FADU Methode 56
5.4. (.Imitationen des Modells 58
5.5. Schlussfolgerungen 59
6. Zusammenfassung 60
7. Literaturverzeichnis 62
8. Lebenslauf 68
|
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung und Fragestellung 10
2. Theoretische Grundlagen
2.1. Grundlagen zum Schilddrüsenkarzinom und dessen Therapie
2.1.1. Das Schilddrüsen Karzinom 11
2.1.2. Therapieoptionen beim Schilddrüsenkarzinom 12
unter besonderer Berücksichtigung der externen
Strahlentherapie
2.2. Strahlenbiologische Aspekte
2.2.1. Grundlagen der Strahlenwirkung 14
2.2.2. DNA Schäden und ihre Reparatur 16
2.3. Vitamin C als Radioprotektor 20
3. Material und Methoden
3.1. Materialien und Geräte
3.1.1. Zelllinie 22
3.1.2. In der Zellkultur verwendete (Plastik) Materialien 23
3.1.3. In der Zellkultur verwendete Lösungen und Chemikalien 24
3.1.4. Für die Zellkultur verwendete Geräte 24
3.1.5. Für den WST 1 Proliferationstest verwendete Materialien
und Geräte 25
3.1.6. Für die FADU verwendete Materialien und Geräte 26
3.2. Methoden
3.2.1. Zellkultivierung 27
3.2.2. Vorbereitung der Versuchsansätze 27
3.2.3. Bestrahlung mit dem Linearbeschleuniger 28
3.2.4. Nachweis von Zellproliferation mit dem
Zellproliferationstest WST 1 29
3.2.5. Analyse der DNA Schäden mittels der FADU Methode
(Fluorescent Analysis of DNA Unwinding) 32
3.3. Statistik und Auswertung 37
7
4. Ergebnisse
4.1. Veränderung der Proliferationsrate
4.1.1. Proliferationstest WST 1 ohne Vitamin C 38
4.1.2. Proliferationstest WST 1 mit Vitamin C 40
4.1.3 Vergleich der Ergebnisse mit und ohne Vitamin C 43
4.2. Analyse aufgetretener DNA Schäden mit der FADU Methode
direkt nach Bestrahlung
4.2.1. Auftreten von DNA Strangbrüchen ohne Vitamin C 44
4.2.2. Auftreten von DNA Strangbrüchen mit Vitamin C 45
4.2.3. Vergleich der Ergebnisse mit und ohne Vitamin C 46
4.3. Analyse aufgetretener DNA Schäden mit der FADU Methode
18 Stunden nach Bestrahlung
4.3.1. Reparatur von DNA Strangbrüchen ohne Vitamin C 47
4.3.2. Reparatur von DNA Strangbrüchen mit Vitamin C 48
4.3.3. Reparatur von DNA Strangbrüchen Vergleich der
Ergebnisse mit und ohne Vitamin C Zugabe 49
5. Diskussion
5.1. Methodenwahl
5.1.1. Die Wahl der Vitamin C Konzentration 51
5.1.2. Der Zellproliferationstest WST 1 52
5.1.3. Die FADU Methode 52
5.2. Zellproliferationstest WST 1 53
5.3. Analyse der DNA Schäden mit der FADU Methode 56
5.4. (.Imitationen des Modells 58
5.5. Schlussfolgerungen 59
6. Zusammenfassung 60
7. Literaturverzeichnis 62
8. Lebenslauf 68 |
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