Hemmung der Thrombozytenaktivierung durch Natrium-4-methyl-piperidyl-diazeniumdiolat:
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2007
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Zusammenfassung 6
2. Einleitung 8
2.1 Blutplättchen g
2.1.1 Struktur und Funktion der Blutplättchen 8
2.1.1.1 Plättchenaktivierung 8
2.1.1.2 Ablauf der Aggregation 10
2.1.1.3 Bedeutung von CD62P und Plättchen Leukozyten Konjugaten 11
2.1.2 Physiologische und medikamentöse Inhibitoren der Plättchenfunktion 12
2.1.3 Erkrankungen mit Plättchenhyperreaktivität oder Endotheldysfunktion 15
2.2 NO 15
2.2.1 NO Wirkung 15
2.2.2 Klinisch verwendete NO Donatoren 17
2.2.3 Diazeniumdiolate 18
2.2.4 Einsatz von NO Donatoren zur Plättchenhemmung 19
3. Zielsetzung 20
4. Methodik 21
4.1 Material 21
4.1.1 Substanzen 21
4.1.2 Geräte 21
4.2 Methoden 22
4.2.1 Blutentnahme und Herstellung von plättchenreichem und
plättchenarmem Plasma 22
4.2.2 Gebrauchslösungen der Plättcheninhibitoren und aktivatoren und
anderer Testsubstanzen 22
4.2.3 Inkubation von PRP und Vollblut mit 4 MEPI NO und SNP 23
4.2.4 Turbidimetrische Messung der Plättchenaggregation 23
4.2.5 Durchflusszytometrie 24
4.2.5.1 Aggregation im Vollblut und PRP 25
4.2.5.2 Expression von CD62P auf der Plättchenoberfläche 25
4.2.5.3 Bildung von Plättchen Leukozyten Konjugaten 26
4
4.2.6 ELISA zur Bestimmung der cGMP Spiegel 26
4.3 Statistik 27
5. Ergebnisse 28
5.1 Hemmung der Piättchenaggregation und Plättchenaktivierung 28
5.1.1 Hemmung der ADP und Collagen induzierten Aggregation
im PRP durch 4 MEPI NO im Vergleich zu SNP 28
5.1.2 Hemmung der Mikro und Makroaggregatbildung im PRP 32
5.1.3 Vergleichende Messung der Hemmung der Aggregation
im Vollblut und im PRP 35
5.1.4 Vergleich der Messung der Aggregation im PRP
mittels PAP4C und Durchflusszytometrie 37
5.1.5 Hemmung der CD62P Expression im Vollblut und PRP und Hemmung
der Bildung von Plättchen Leukozyten Konjugaten 38
5.2 Untersuchungen zur Wirkdauer und zum Wirkmechanismus 43
5.2.1 Hemmung der Aggregation durch 4 MEPI NO nach Inkubation
im Vollblut sowie Langzeitinkubation im PRP 43
5.2.2 Plasmatauschexperimente 45
5.2.3 Rolle der Guanylatzyklase für die Hemmung der Piättchenaggregation
durch 4 MEPI NO und SNP 47
5.2.3.1 Einfluss von ODQ auf die Wirkung von SNP und 4 MEPI NO
im PRP 47
5.2.3.2 Einfluss von ODQ auf die cGMP Spiegel nach 4 MEPI NO
oder SNP Stimulation 49
6. Diskussion 50
7. Schlussfolgerungen 68
8. Literaturverzeichnis 69
9. Anhang 76
5
|
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Inhaltsverzeichnis
1. Zusammenfassung 6
2. Einleitung 8
2.1 Blutplättchen g
2.1.1 Struktur und Funktion der Blutplättchen 8
2.1.1.1 Plättchenaktivierung 8
2.1.1.2 Ablauf der Aggregation 10
2.1.1.3 Bedeutung von CD62P und Plättchen Leukozyten Konjugaten 11
2.1.2 Physiologische und medikamentöse Inhibitoren der Plättchenfunktion 12
2.1.3 Erkrankungen mit Plättchenhyperreaktivität oder Endotheldysfunktion 15
2.2 NO 15
2.2.1 NO Wirkung 15
2.2.2 Klinisch verwendete NO Donatoren 17
2.2.3 Diazeniumdiolate 18
2.2.4 Einsatz von NO Donatoren zur Plättchenhemmung 19
3. Zielsetzung 20
4. Methodik 21
4.1 Material 21
4.1.1 Substanzen 21
4.1.2 Geräte 21
4.2 Methoden 22
4.2.1 Blutentnahme und Herstellung von plättchenreichem und
plättchenarmem Plasma 22
4.2.2 Gebrauchslösungen der Plättcheninhibitoren und aktivatoren und
anderer Testsubstanzen 22
4.2.3 Inkubation von PRP und Vollblut mit 4 MEPI NO und SNP 23
4.2.4 Turbidimetrische Messung der Plättchenaggregation 23
4.2.5 Durchflusszytometrie 24
4.2.5.1 Aggregation im Vollblut und PRP 25
4.2.5.2 Expression von CD62P auf der Plättchenoberfläche 25
4.2.5.3 Bildung von Plättchen Leukozyten Konjugaten 26
4
4.2.6 ELISA zur Bestimmung der cGMP Spiegel 26
4.3 Statistik 27
5. Ergebnisse 28
5.1 Hemmung der Piättchenaggregation und Plättchenaktivierung 28
5.1.1 Hemmung der ADP und Collagen induzierten Aggregation
im PRP durch 4 MEPI NO im Vergleich zu SNP 28
5.1.2 Hemmung der Mikro und Makroaggregatbildung im PRP 32
5.1.3 Vergleichende Messung der Hemmung der Aggregation
im Vollblut und im PRP 35
5.1.4 Vergleich der Messung der Aggregation im PRP
mittels PAP4C und Durchflusszytometrie 37
5.1.5 Hemmung der CD62P Expression im Vollblut und PRP und Hemmung
der Bildung von Plättchen Leukozyten Konjugaten 38
5.2 Untersuchungen zur Wirkdauer und zum Wirkmechanismus 43
5.2.1 Hemmung der Aggregation durch 4 MEPI NO nach Inkubation
im Vollblut sowie Langzeitinkubation im PRP 43
5.2.2 Plasmatauschexperimente 45
5.2.3 Rolle der Guanylatzyklase für die Hemmung der Piättchenaggregation
durch 4 MEPI NO und SNP 47
5.2.3.1 Einfluss von ODQ auf die Wirkung von SNP und 4 MEPI NO
im PRP 47
5.2.3.2 Einfluss von ODQ auf die cGMP Spiegel nach 4 MEPI NO
oder SNP Stimulation 49
6. Diskussion 50
7. Schlussfolgerungen 68
8. Literaturverzeichnis 69
9. Anhang 76
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