Untersuchungen zur Regulation des homöotischen Blütengens DEFICIENS in Antirrhinum majus:
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
2. Material und Methoden 12
2.1. Chemikalien, Enzyme, Radioisotope und andere Materialien 12
2.2. Medien, Puffer und Lösungen 13
2.3. Bakterienstämme, Hefestämme und Pflanzenlinien 14
2.4. Plasmide 16
2.5. Allgemeine Methoden 17
2.6. Isolierung und Manipulation von DNA 17
2.7. Isolierung und Manipulation von RNA 20
2.8. Herstellung und Manipulation von Proteinen 22
2.9. Hefetechniken 27
2.10. Transformation von Arabidopsis thaliana 31
2.11. Durchmustern von genomischen und cDNA Phagenbibliotheken 32
2.12. Transiente Transformation von Pflanzenmaterial durch Beschuss mit DNA be¬
schichteten Goldpartikeln 33
3. Ergebnisse 35
3.1. Isolierung von Interaktoren des DiJF-Promotors mittels Hefe One-Hybrid-Screen 35
3.2. Hefe One-Hybrid-Assays grenzen das AmTCPl Bindungsmotiv weiter ein 39
3.3. Isolierung der vollständigen cDNA von AmTCPl und strukturelle Charakterisierung 41
3.4. TCP-Bindemotive im DEF- und /IPi-Promotor 46
3.5. Hefe One-Hybrid-Assays mit AmTCP-Fragmenten und verwandten TCP-Proteinen 48
3.6. Die AmTCPl-mRUA ist in allen A. majus Organen exprimiert 50
3.7. In vitro Bindungsassay von AmTCPl 51
3.8. Hefe Two-Hybrid-Experimente 66
3.9. Durchmustern einer Transposon-mutagenisierten/iM/wWi/num-Population 71
3.10. Überexpression von AmTCPl in A. thaliana 73
3.11. Transiente Expression von AmTCPl in Arabidopsis-Blättem 76
4. Diskussion 78
4.1. Struktur und Funktion von AmTCPl 78
4.2. Produktion von rekombinantem AmTCPl -Protein in E. coli 80
4.3. Analyse der DNA-Bindungsfähigkeit von AmTCPl 82
4.4. Identifizierung der Dimerisierungsdomäne von AmTCPl 87
4.5. Kontrolle der ^mrCPy-Expression durch miRNAs 92
4.6. Ausblick 96
5. Zusammenfassung - Summnry 98
6. Literaturverzeichnis 101
7. Anhang 111
7.1. Abkürzungen 111
7.2. Liste der Verwendeteten Primer 113
7.3 Patdistrib.pl 117
Erklärung 123
Danksagung 124
Lebenslauf 125
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
2. Material und Methoden 12
2.1. Chemikalien, Enzyme, Radioisotope und andere Materialien 12
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4.1. Struktur und Funktion von AmTCPl 78
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4.6. Ausblick 96
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