Ouabaintransporter in Leber und Nebenniere von Ratte und Rind: Klonierung, Gewebeexpression, Substratcharakterisierung und funktionelle Bedeutung
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Wettenberg
VVB Laufersweiler
2005
|
| Ausgabe: | 1. Aufl. |
| Schriftenreihe: | Edition scientifique
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | XII, 305 S. Ill., graph. Darst. 22 cm |
| ISBN: | 389687456X |
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis
Verzeichnis der Abbildungen
Verzeichnis der Tabellen VIII
Verzeichnis der Abkürzungen
1. Literaturübersicht 1
.,
1
1.3 Die Protein-Superf amilie der
1.3.1 Die SLCO-Superfamilic der
1.3.2 Die Proteinfamilie der natriumabhängigen Gallensäuretransporter (SLC 10) 14
1.3.3 Die Proteinfamilie der Transporter für organische
1.4 Die Familie der ATP-Bindina
1.4.1 Das Phänomen der
1.4.2 Die
1.4.3 Die ABCC-Subfamilie(MRPl-MRP3) 32
1.5 Physiologische und pharmakoloaischc Bedeutung einzelner
Membrantransport in verschiedenen Geweben_____________________________________37
1.5.1 Der enterohepatische Kreislaufder Gallensalze 38
1
1.5.3 ArzneistotTtransport an der Niere 47
1.5.4 Bedeutung von Membrantransportern
1.5.5 Transportvorgänge an der Blut-llirn-Sehranke 51
1.5.6 Transportvorgänge am
1.6 Ouabain: Herzwirksames Glvkosid und endogenes Steroidhormon_____________________5_7
1.6.1 Herzwirksame Glykoside im Tier- und Pflanzenreich 57
1.6.2 Phartnakologische Wirkung und Pharmakokinetik herzwirksamer Glykoside 58
1
1.6.4 Ouabain als Modellsubstanz für die hepatobiliäre Elimination 61
1
2. Material 64
2.1 Materialien für die Molekularbiologie____________________________________________64
2.1.1 Bakterienstämme 64
2.1.2 Vektoren 64
2.1.3 Kommerziell erhältliches Material und Kits 66
2.1.4 Enzyme 67
2.2 Chemische Substanzen________________________________________________________68
2.2.1 Reagenzien
68
2.2.2 Radioaktive Substanzen
70
2.3 Puffer und Medien
70
2.3.1 Kulturmedien 70
2.3.2 Durchmusterung einer cDNA-Bibliothek 71
2.3.3 Heterologe Expression in Xenopus laevis Oozyten 72
2.3.4
2.3.5 Denaturierende Agarose-Gelelektrophorese
2.3.6 Sequenzierung 73
2.4 Geräte
74
2.5 Verbrauchsmittel
75
2.6 Versuchstiere
75
2.7
75
2.8 Datenbanken und Portale
77
Inhaltsverzeichnis
3. Methoden 78
3.1 Allgemeine Methoden in der Molekularbiologie____________________________________78
3.1.1 Phenol/Chloroform-Extraktion proteinhaltiger Lösungen 78
3.1.2 Präzipitation von Nukleinsäuren mit
3.1.3 Aufreinigung von PCR-Amplifikaten 79
3.1.4 Restriktion von DNA 79
3.2 PCR-Methoden________________________________________________________________80
3.2.1 Primerauswahl 80
3.2.2 Verwendete DNA-Polymerasen 83
3.2.3 Touchdown-PCR 84
3.2.4 cDNA-Synthesc und RT-PCR 85
3.2.5 RACE-PCR 86
3.2.6
3.2.7 Gerichtete Mutagenese 91
3.3 Agarose-Gelelektronhorese______________________________________________________92
3.3.1 Analytische Agarosc-Gelelektrophorese 92
3.3.2 Präparative Agarose-Gelelektrophorese 93
3.3.3 Autreinigung von DNA-Fragmenten aus Agarosegelen 93
3.3.4 Denaturierende Agarosegele (RNA-Gele) 94
3.4 DNA-Klonierung______________________________________________________________95
3.4.1 Ligation 95
3.4.2 Dephosphorylierung von Schnittenden mit
3.4.3 Transformation 96
3.4.4 Blau/weiß-Selektion positiver Klone 97
3.4.5 Colony-PCR zur Klonierungskontrolle 97
3.4.6 Animpfen einer Übernachtkultur 98
3.4.7 Anlegen von Glycerinkulturen (Glycerinstabs) 98
3.5 Isolierung von Plasmid-DNA aus Bakterienkulturen_________________________________98
3.5.1 Isolierung von Plasmid-DNA im Mini-Maßstab 99
3.5.2 Isolierung von Plasmid-DNA im Midi-Maßstab 99
3.5.3 Konzentrationsbestimmung von DNA 100
3.6 Isolierung von PolvA -RNA aus tierischem Gewebe________________________________]Q±
3.6.1 Isolierung von Total-RN
3.6.2 Isolierung von Total-RNA (Flüssigphasen-Separation) 102
3.6.3 Aufreinigung von PolyA-RNA aus Total-RNA 102
3.6.4 Konzentrationsbestimmung von
3.7
3.7.1 Sequenzierreaktion 104
3.7.2 Polyacrylamid-Gelelektophorese und Einlesen der Sequenz 105
3.7.3 Auswahl von Sequenzierprimern 106
3.8 Durchmusterung einer X-Phagcn cDNA-Bibliothek_________________________________107
3.8.1 Synthese Digoxigenin-markierter DNA-Sonden 107
3.8.2
3.8.3 Anlegen permanenter SOLR und XL 1-Blue Kulturen 109
3.8.4 Titer-Bestimmung des ^.-Phagen 109
3.8.5 Titer-Bestimmung des Helfer-Phagen ExAssist 110
3.8.6 Ausplattieren der cDNA-Bibliothek (1. Runde) Hl
3.8.7 Plaquelift und DNA-Fixierung 1 ]
3.8.8 Hybridisierung mit DIG-inarkierten Sonden 112
3.8.9 Detektion der hybridisierten DNA-Sonden 113
3.8.10 Ausplattieren der cDNA-Bibliothek (2. Runde) 114
3.8.1
Inhaltsverzeichnis
3.9
3.9.1 Linearisierung der Plasmid-DNA 116
3.9.2 Abschneiden überhängender
3.9.3 cRNA-Synthesc 118
3.9.4 Entnahme und Aufbereitung der Oozyten 119
3.9.5 Mikroinjektion der Xcnopus laevis Oozyten 120
3.9.6 Transportmessungen an Oozyten 121
3.9.7 Statistische Auswertung der Transportmessungen 122
3.10 In situ Hvbridisierung der Nebenniere der Ratte____________________________________123
3.10.1 Auswahl einer geeigneten Sonde und Klonierung 123
3.10.2 Synthese der markierten cRNA-Sonde und Hybridisierung 124
3.11 Ganztierautoradiografie________________________________________________________125
3.11.1 Applikation, Einbetten und Schneiden der Versuchstiere 125
3.11.2 Auswertung der Radioaktivitätsverteilung 126
3.12 In situ Galleausscheidung_______________________________________________________L27
3.12.1 Versuchsdurchführung und Applikation der Testsubstanz 127
3.12.2 Aufrangen und Aufarbeitung der Galleproben 127
4. Ergebnisse 129
4. l Ouabaintransport an der Rattenleber {in vivo Modelle)_______________________________L29
4.1.1 Ganztierautoradiografie der Ratte nach [ lIJOuabain-Applikation 129
4.1.2
4.2 Ouabaintransport an der Nebenniere der Ratte_____________________________________
4.2.1 Expressionsprofilc der Oatps der Ratte 143
4.2.2 Klonierung von Oatpla4 aus der Nebenniere der Ratte mittels RACE-PCR 144
4.2.3 Quantifizierung der Oatpla4-Expression durch
4.2.4 Transportmessungen mit dem adrenalen Oatpla4 in Xenopus laevis Oozyten 148
4.2.5 Insitu Hybridisierung der Nebenniere der Ratte mit einer Oatpl 34-Sonde 150
4.3 Klonierung eines Oatpla4-ähпlicheп Transporters aus der Nebennierenrinde des Rindes 153
4.3.1 Klonierungsstrategie 153
4.3.2 RT-PCR mit homologen Primern 154
4.3.3 Sequenzanalyse des klonierten bovinen Oatpla2 155
4.3.4 Expressionsanalyse der klonierten Oatpla2-Spleißingvarianten 159
4.3.5 Proteinsequenzanalyse des bovinen Oatpla2 160
4.3.6 Zusammenfassung derOatpla2 Sequenz- und Expressionsanalyse 163
4.3.7
4.3.8 Generierung von Oatpla2 Oatp^-Chimären zur Lokalisation der Ouabain-
Bindungsdomäne im Oatpl a4 der Ratte
4.4 Klonierung weiterer OATP- und OAT-Transporter des Rindes________________________
4.4.1 Klonierung von Oatp2bl aus einer cDNA-Bibliothek des Rindes 172
4.4.2 Klonierung von Oatp3al aus einer cDNA-Bibliothek des Rindes 173
4.4.3
4.4.4 Klonierung von Oatl. Oat2 und Oat3 aus der Niere des Rindes 175
4.4.5 Expressionsanalyse des Ouabaincarriers OATP4CI/Oatp4cl 178
4.5 Identifizierung und Klonierung neuer Mitglieder der SLCIO-Familie__________________179
4.5.1 Klonierungsstrategie 179
4.5.2 Identifizierung von fünf neuen Mitgliedern der SLCIO-Familie (P3-P7) 181
4.5.3 Expressionsanalyse der identifizierten Sequenzen bei der Ratte 184
4.5.4 Klonierung von P3. rP4. rP6 und mP7 in voller Länge 185
4.5.5
Inhaltsverzeichnis
5. Diskussion 191
5.1 Organverteilung und Pharmakokinetik des Ouabains bei der Ratte____________________L2i
5.I.1 Hepatobiliäre Ausscheidung von Ouabain in der Ganztierautoradiografie 191
5. ! .2 Renale Ausscheidung von Ouabain in der Ganztierautoradiografie
5.1.3 Enterale
5. l .4 Abgrenzung zwischen carriervermitteltem Transport und Bindung
an die NaVK+-ATPase 194
5.2 Ouabaintransport an der basolateralen Hepatozvtenmembran________________________198
5.3 Energetisierung des Ouaba
5.4 Ouabaintransport an der kanalikulären 1 lepatozvtenmembran________________________201
5.4.1 Transgene Tiermodelle zur Untersuchung der Eftluxtransporter Mdrl und Mrp2 202
5.4.2 Die Beteiligung von Mrp2 am kanalikulären Ouabaintransport 203
5.4.3 Kompensatorische Mechanismen bei Fehlen von Mrp2 203
5.5 Ouabaintransport an der Nebenniere der Ratte____________________________________205
5.5.1 Akkumulation von Ouabain in der Nebenniere der Ratte 205
5.5.2 Klonierung von Oatpla4 aus der Nebenniere der Ratte 206
5.5.3 Expression von Oatpla4 in der
5.5.4 Ouabaintransport durch Oatpla4 im nanomolaren Konzentrationsbereich 208
5.5.5 Hypothetisches Modell zur Bedeutung des Ouabaintransportes in der Nebenniere 209
5.6 Ouabaintransnort an der Nebenniere des Rindes___________________________________212
5.6.1 Ouabaintransport an isolierten Nebennierenrindenzellen des Rindes 212
5.6.2 Klonierungeines Oatp ^-ähnlichen Transporters aus der Nebenniere des Rindes 213
5.6.3 Oatpla2 ist nicht der gesuchte natriumunabhängige Ouabaintransporter
in der Nebenniere des Rindes 214
5.7 Lokalisierung der Ouabain-Bindungsdomäne im Oatpla4 der Ratte___________________214
5.8 Klonierung weiterer OATP- und OAT-Carrier des Rindes___________________________216
5.9 Phvlogenetische Besonderheiten der OATP/SLCO-Familie_________________________2J8
5.9.1 Entwicklung der OATP-Nomenklatur 218
5.9.2 Besonderheiten der Orthologien in den Subfamilien OATP 1
5.9.3 Oatpla4 ist mitverantwortlich
5.10 Entdeckung neuer Mitglieder der SLCIO-Transportert amilie________________________225
5.10.1 Die SLCIO-Familie besteht aus mindestens 7 Subfamilien 225
5.10.2 Verwandtschaftsanalyse der SLCIO-Gene 227
5.
5.11.1 SOAT ist kein Ouabain-oder Gallensäuretransporter 229
5.11.2 Lokalisation der Bindungsdomäne für Gallensäuren im NTCP und 1SBT 230
5 11.3 Die Östrogensynthese in der Plazenta 232
5.
6. Zusammenfassung 237
7.
8. Literaturverzeichnis 239
9. Anhang 276
9.1
9.2 Verwendete Primer 280
9.3 Datenblätter aller SLCIO-Mitglieder von Mensch, Ratte und Maus 286
Nachwort 303
Danksagung 304
IV
|
| adam_txt |
Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis
Verzeichnis der Abbildungen
Verzeichnis der Tabellen VIII
Verzeichnis der Abkürzungen
1. Literaturübersicht 1
.,
1
1.3 Die Protein-Superf'amilie der
1.3.1 Die SLCO-Superfamilic der
1.3.2 Die Proteinfamilie der natriumabhängigen Gallensäuretransporter (SLC 10) 14
1.3.3 Die Proteinfamilie der Transporter für organische
1.4 Die Familie der ATP-Bindina
1.4.1 Das Phänomen der
1.4.2 Die
1.4.3 Die ABCC-Subfamilie(MRPl-MRP3) 32
1.5 Physiologische und pharmakoloaischc Bedeutung einzelner
Membrantransport in verschiedenen Geweben_37
1.5.1 Der enterohepatische Kreislaufder Gallensalze 38
1
1.5.3 ArzneistotTtransport an der Niere 47
1.5.4 Bedeutung von Membrantransportern
1.5.5 Transportvorgänge an der Blut-llirn-Sehranke 51
1.5.6 Transportvorgänge am
1.6 Ouabain: Herzwirksames Glvkosid und endogenes Steroidhormon_5_7
1.6.1 Herzwirksame Glykoside im Tier- und Pflanzenreich 57
1.6.2 Phartnakologische Wirkung und Pharmakokinetik herzwirksamer Glykoside 58
1
1.6.4 Ouabain als Modellsubstanz für die hepatobiliäre Elimination 61
1
2. Material 64
2.1 Materialien für die Molekularbiologie_64
2.1.1 Bakterienstämme 64
2.1.2 Vektoren 64
2.1.3 Kommerziell erhältliches Material und Kits 66
2.1.4 Enzyme 67
2.2 Chemische Substanzen_68
2.2.1 Reagenzien
68
2.2.2 Radioaktive Substanzen
70
2.3 Puffer und Medien
70
2.3.1 Kulturmedien 70
2.3.2 Durchmusterung einer cDNA-Bibliothek 71
2.3.3 Heterologe Expression in Xenopus laevis Oozyten 72
2.3.4
2.3.5 Denaturierende Agarose-Gelelektrophorese
2.3.6 Sequenzierung 73
2.4 Geräte
74
2.5 Verbrauchsmittel
75
2.6 Versuchstiere
75
2.7
75
2.8 Datenbanken und Portale
77
Inhaltsverzeichnis
3. Methoden 78
3.1 Allgemeine Methoden in der Molekularbiologie_78
3.1.1 Phenol/Chloroform-Extraktion proteinhaltiger Lösungen 78
3.1.2 Präzipitation von Nukleinsäuren mit
3.1.3 Aufreinigung von PCR-Amplifikaten 79
3.1.4 Restriktion von DNA 79
3.2 PCR-Methoden_80
3.2.1 Primerauswahl 80
3.2.2 Verwendete DNA-Polymerasen 83
3.2.3 Touchdown-PCR 84
3.2.4 cDNA-Synthesc und RT-PCR 85
3.2.5 RACE-PCR 86
3.2.6
3.2.7 Gerichtete Mutagenese 91
3.3 Agarose-Gelelektronhorese_92
3.3.1 Analytische Agarosc-Gelelektrophorese 92
3.3.2 Präparative Agarose-Gelelektrophorese 93
3.3.3 Autreinigung von DNA-Fragmenten aus Agarosegelen 93
3.3.4 Denaturierende Agarosegele (RNA-Gele) 94
3.4 DNA-Klonierung_95
3.4.1 Ligation 95
3.4.2 Dephosphorylierung von Schnittenden mit
3.4.3 Transformation 96
3.4.4 Blau/weiß-Selektion positiver Klone 97
3.4.5 Colony-PCR zur Klonierungskontrolle 97
3.4.6 Animpfen einer Übernachtkultur 98
3.4.7 Anlegen von Glycerinkulturen (Glycerinstabs) 98
3.5 Isolierung von Plasmid-DNA aus Bakterienkulturen_98
3.5.1 Isolierung von Plasmid-DNA im Mini-Maßstab 99
3.5.2 Isolierung von Plasmid-DNA im Midi-Maßstab 99
3.5.3 Konzentrationsbestimmung von DNA 100
3.6 Isolierung von PolvA'-RNA aus tierischem Gewebe_]Q±
3.6.1 Isolierung von Total-RN
3.6.2 Isolierung von Total-RNA (Flüssigphasen-Separation) 102
3.6.3 Aufreinigung von PolyA-RNA aus Total-RNA 102
3.6.4 Konzentrationsbestimmung von
3.7
3.7.1 Sequenzierreaktion 104
3.7.2 Polyacrylamid-Gelelektophorese und Einlesen der Sequenz 105
3.7.3 Auswahl von Sequenzierprimern 106
3.8 Durchmusterung einer X-Phagcn cDNA-Bibliothek_107
3.8.1 Synthese Digoxigenin-markierter DNA-Sonden 107
3.8.2
3.8.3 Anlegen permanenter SOLR und XL 1-Blue Kulturen 109
3.8.4 Titer-Bestimmung des ^.-Phagen 109
3.8.5 Titer-Bestimmung des Helfer-Phagen ExAssist 110
3.8.6 Ausplattieren der cDNA-Bibliothek (1. Runde) Hl
3.8.7 Plaquelift und DNA-Fixierung 1 ]
3.8.8 Hybridisierung mit DIG-inarkierten Sonden 112
3.8.9 Detektion der hybridisierten DNA-Sonden 113
3.8.10 Ausplattieren der cDNA-Bibliothek (2. Runde) 114
3.8.1
Inhaltsverzeichnis
3.9
3.9.1 Linearisierung der Plasmid-DNA 116
3.9.2 Abschneiden überhängender
3.9.3 cRNA-Synthesc 118
3.9.4 Entnahme und Aufbereitung der Oozyten 119
3.9.5 Mikroinjektion der Xcnopus laevis Oozyten 120
3.9.6 Transportmessungen an Oozyten 121
3.9.7 Statistische Auswertung der Transportmessungen 122
3.10 In situ Hvbridisierung der Nebenniere der Ratte_123
3.10.1 Auswahl einer geeigneten Sonde und Klonierung 123
3.10.2 Synthese der markierten cRNA-Sonde und Hybridisierung 124
3.11 Ganztierautoradiografie_125
3.11.1 Applikation, Einbetten und Schneiden der Versuchstiere 125
3.11.2 Auswertung der Radioaktivitätsverteilung 126
3.12 In situ Galleausscheidung_L27
3.12.1 Versuchsdurchführung und Applikation der Testsubstanz 127
3.12.2 Aufrangen und Aufarbeitung der Galleproben 127
4. Ergebnisse 129
4. l Ouabaintransport an der Rattenleber {in vivo Modelle)_L29
4.1.1 Ganztierautoradiografie der Ratte nach ['lIJOuabain-Applikation 129
4.1.2
4.2 Ouabaintransport an der Nebenniere der Ratte_
4.2.1 Expressionsprofilc der Oatps der Ratte 143
4.2.2 Klonierung von Oatpla4 aus der Nebenniere der Ratte mittels RACE-PCR 144
4.2.3 Quantifizierung der Oatpla4-Expression durch
4.2.4 Transportmessungen mit dem adrenalen Oatpla4 in Xenopus laevis Oozyten 148
4.2.5 Insitu Hybridisierung der Nebenniere der Ratte mit einer Oatpl 34-Sonde 150
4.3 Klonierung eines Oatpla4-ähпlicheп Transporters aus der Nebennierenrinde des Rindes 153
4.3.1 Klonierungsstrategie 153
4.3.2 RT-PCR mit homologen Primern 154
4.3.3 Sequenzanalyse des klonierten bovinen Oatpla2 155
4.3.4 Expressionsanalyse der klonierten Oatpla2-Spleißingvarianten 159
4.3.5 Proteinsequenzanalyse des bovinen Oatpla2 160
4.3.6 Zusammenfassung derOatpla2 Sequenz- und Expressionsanalyse 163
4.3.7
4.3.8 Generierung von Oatpla2'Oatp^-Chimären zur Lokalisation der Ouabain-
Bindungsdomäne im Oatpl a4 der Ratte
4.4 Klonierung weiterer OATP- und OAT-Transporter des Rindes_
4.4.1 Klonierung von Oatp2bl aus einer cDNA-Bibliothek des Rindes 172
4.4.2 Klonierung von Oatp3al aus einer cDNA-Bibliothek des Rindes 173
4.4.3
4.4.4 Klonierung von Oatl. Oat2 und Oat3 aus der Niere des Rindes 175
4.4.5 Expressionsanalyse des Ouabaincarriers OATP4CI/Oatp4cl 178
4.5 Identifizierung und Klonierung neuer Mitglieder der SLCIO-Familie_179
4.5.1 Klonierungsstrategie 179
4.5.2 Identifizierung von fünf neuen Mitgliedern der SLCIO-Familie (P3-P7) 181
4.5.3 Expressionsanalyse der identifizierten Sequenzen bei der Ratte 184
4.5.4 Klonierung von P3. rP4. rP6 und mP7 in voller Länge 185
4.5.5
Inhaltsverzeichnis
5. Diskussion 191
5.1 Organverteilung und Pharmakokinetik des Ouabains bei der Ratte_L2i
5.I.1 Hepatobiliäre Ausscheidung von Ouabain in der Ganztierautoradiografie 191
5. ! .2 Renale Ausscheidung von Ouabain in der Ganztierautoradiografie
5.1.3 Enterale
5. l .4 Abgrenzung zwischen carriervermitteltem Transport und Bindung
an die NaVK+-ATPase 194
5.2 Ouabaintransport an der basolateralen Hepatozvtenmembran_198
5.3 Energetisierung des Ouaba
5.4 Ouabaintransport an der kanalikulären 1 lepatozvtenmembran_201
5.4.1 Transgene Tiermodelle zur Untersuchung der Eftluxtransporter Mdrl und Mrp2 202
5.4.2 Die Beteiligung von Mrp2 am kanalikulären Ouabaintransport 203
5.4.3 Kompensatorische Mechanismen bei Fehlen von Mrp2 203
5.5 Ouabaintransport an der Nebenniere der Ratte_205
5.5.1 Akkumulation von Ouabain in der Nebenniere der Ratte 205
5.5.2 Klonierung von Oatpla4 aus der Nebenniere der Ratte 206
5.5.3 Expression von Oatpla4 in der
5.5.4 Ouabaintransport durch Oatpla4 im nanomolaren Konzentrationsbereich 208
5.5.5 Hypothetisches Modell zur Bedeutung des Ouabaintransportes in der Nebenniere 209
5.6 Ouabaintransnort an der Nebenniere des Rindes_212
5.6.1 Ouabaintransport an isolierten Nebennierenrindenzellen des Rindes 212
5.6.2 Klonierungeines Oatp ^-ähnlichen Transporters aus der Nebenniere des Rindes 213
5.6.3 Oatpla2 ist nicht der gesuchte natriumunabhängige Ouabaintransporter
in der Nebenniere des Rindes 214
5.7 Lokalisierung der Ouabain-Bindungsdomäne im Oatpla4 der Ratte_214
5.8 Klonierung weiterer OATP- und OAT-Carrier des Rindes_216
5.9 Phvlogenetische Besonderheiten der OATP/SLCO-Familie_2J8
5.9.1 Entwicklung der OATP-Nomenklatur 218
5.9.2 Besonderheiten der Orthologien in den Subfamilien OATP 1
5.9.3 Oatpla4 ist mitverantwortlich
5.10 Entdeckung neuer Mitglieder der SLCIO-Transportert'amilie_225
5.10.1 Die SLCIO-Familie besteht aus mindestens 7 Subfamilien 225
5.10.2 Verwandtschaftsanalyse der SLCIO-Gene 227
5.
5.11.1 SOAT ist kein Ouabain-oder Gallensäuretransporter 229
5.11.2 Lokalisation der Bindungsdomäne für Gallensäuren im NTCP und 1SBT 230
5 11.3 Die Östrogensynthese in der Plazenta 232
5.
6. Zusammenfassung 237
7.
8. Literaturverzeichnis 239
9. Anhang 276
9.1
9.2 Verwendete Primer 280
9.3 Datenblätter aller SLCIO-Mitglieder von Mensch, Ratte und Maus 286
Nachwort 303
Danksagung 304
IV |
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