Genomische Veränderungen im Bereich des BRCA1- und des BRCA2-Gens auf den Chromosomen 17 und 13 in Ovarialkarzinomen:
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2006
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis A
1. Einleitung 1
1.1. Das Ovarialkarzinom 1
1.1.1. Ätiologie und Risikofaktoren 1
1.1.2. Klinisches Bild, Verlauf und Therapie 5
1.2. Tumorgenese 8
1.3. Die Tumorsuppressorgene BRCA1 und BRCA2 11
1.4. FISH als spezielle Detektionstechnik chromosomaler Imbalancen 14
1.5. Ziele der Arbeit 16
2. Material und Methoden 18
2.1. Materialien 18
2.1.1. Patientenkollektiv 18
2.1.2. Chemikalien 20
2.1.3. Arbeitsgeräte 21
2.1.4. Verbrauchsmaterialien 22
2.1.5. Puffer, Lösungen und Kits 22
2.1.6. Selbst hergestellte FISH-Proben 25
2.2. Methoden 25
2.2.1. Anfertigung von Touch- Präparaten 25
2.2.2. DNA- Proben 25
2.2.2.1. Herstellung der DNA- Proben 26
2.2.2.2. Markierung der DNA 27
2.2.3. FISH (Fluoreszenz- in- situ- Hybridisierung) 29
2.2.3.1. Vorbereitung 29
2.2.3.2. Hybridiesierung 29
2.2.3.3. Waschung und Eindeckelung 29
2.2.3.4. Auswertung der FISH 30
2.2.4. Bestimmung der Grenzwerte 30
3. Ergebnisse 32
3.1. Etablierung eines Interphase FISH- Essays zum Nachweis von
Veränderungen im Bereich der Tumorsupressorgene BRCA 1 und BRCA 2 32
Inhaltsverzeichnis II
3.1.1. Auswahl der Sonden 32
3.1.2. Kontrolluntersuchungen 34
3.2. Ergebnisse der Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) und Vergleich mit
Resultaten aus der Comparativen Genomhybridisierung (CGH) und anderen
Verfahren 36
3.2.1. BRCA1 39
3.2.1.1. FISH Ergebnisse für BRCA-1 39
3.2.1.2. Vergleich der Ergebnisse für BRCA-1 mit der CGH 41
3.2.1.3. Korrelation der gewonnenen BRCA1- Ergebnisse mit DHPLC-
Daten 43
3.2.2. BRCA2 43
3.2.2.1. FISH Ergebnisse für BRCA-2 43
3.2.2.2. Vergleich der Ergebnisse für BRCA- 2 mit der CGH 46
3.2.2.3. Vergleich der BRCA2- Ergebnisse mit LOH- Daten 48
3.2.3. Zusammenfassender Vergleich der Ergebnisse für BRCA1 und BRCA2
untereinander 49
3.3. Korrelation der Ergebnisse aus der FISH- Analyse mit klinischen Daten 49
4. Diskussion 52
4.1. Verifizierung der FISH- Ergebnisse 53
4.2. Klinische Relevanz von Veränderungen der Tumorsuppressorgene BRCA1
und BRCA2 58
4.3. Abschließende Erkenntnisse und Ausblick 60
5. Zusammenfassung 62
6. Literaturverzeichnis 64
7. Danksagung 73
8. Curriculum Vitae 74
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Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis A
1. Einleitung 1
1.1. Das Ovarialkarzinom 1
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1.1.2. Klinisches Bild, Verlauf und Therapie 5
1.2. Tumorgenese 8
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1.5. Ziele der Arbeit 16
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2.2.4. Bestimmung der Grenzwerte 30
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3.1. Etablierung eines Interphase FISH- Essays zum Nachweis von
Veränderungen im Bereich der Tumorsupressorgene BRCA 1 und BRCA 2 32
Inhaltsverzeichnis II
3.1.1. Auswahl der Sonden 32
3.1.2. Kontrolluntersuchungen 34
3.2. Ergebnisse der Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) und Vergleich mit
Resultaten aus der Comparativen Genomhybridisierung (CGH) und anderen
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3.2.1.3. Korrelation der gewonnenen BRCA1- Ergebnisse mit DHPLC-
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4.1. Verifizierung der FISH- Ergebnisse 53
4.2. Klinische Relevanz von Veränderungen der Tumorsuppressorgene BRCA1
und BRCA2 58
4.3. Abschließende Erkenntnisse und Ausblick 60
5. Zusammenfassung 62
6. Literaturverzeichnis 64
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