Proatherogene Wirkung von Akute-Phase-Proteinen und Steroidhormonen auf humane vaskuläre und neovaskuläre Zellen in vitro:
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2006
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 1
1.1 Pathogenese der Atherosklerose 1
1.1.1 Atherosklerose als inflammatorische Erkrankung 1
1.1.2 Entstehung der atherosklerotischen Gefäßläsion 2
1.1.2.1 Atherogene Lipoproteine und Störung der Endothelzellfunktion 2
1.1.2.2 Pathophyslologlsche Rolle glatter Muskelzellen 3
1.1.3 Einfluss inflammatorischer Proteine auf die Atherosklerose
entstehung 4
1.1.3.1 C reaktives Protein 4
1.1.3.2 Serum Amyloid A 5
1.1.4 Einfluss natürlicher und synthetischer Sexualsteroide auf die
Atheroskleroseentstehung 6
1.1.4.1 Testosteron 6
1.1.4.2 Estradiol 7
1.1.4.3 Synthetische Östrogenrezeptor Agonisten Tamoxifen 8
1.2 Die vaskulären Wachstumsfaktor Rezeptoren der VEGF Familie 9
1.2.1 Physiologische und pathophysiologische Funktion der VEGF
Rezeptoren 9
1.2.2 Aufbau und Signaltransduktion der Tyrosin Kinase Rezeptoren der
VEGF Familie 10
1.2.2.1 Duale Funktion des membranständigen und löslichen VEGFR
1/Flt 1 in der Atherogenese 14
1.2.2.2 Bedeutung von VEGFR 2/KDR in der Atherogenese 15
1.3 VEGF und VEGF Rezeptoren beeinflussen das Wachstum
neovaskulärer Kaposi Sarkom Zellen 16
1.4 Fragestellung 17
2 MATERIAL UND METHODEN 19
2.1 Zellkultur 19
2.2 RNA Isolierung 21
2.3 Polymerasekettenreaktion (PCR) 22
2.3.1 Konventionelle PCR mit dem Thermocycler bzw. Gradienten PCR22
2.3.2 Real time PCR mit dem LightCycler® 23
2.4 Expressionsanalyse mit dem LightCycler* 26
2.5 Agarosegele 30
2.6 Sequenzierung der PCR Produkte zur Qualitätssicherung 30
3 ERGEBNISSE 34
III
3.1 Basale Expression derTyrosin Kinase Rezeptoren VEGFR 1/FH 1,
sVEGFR 1/sFlt 1 und VEGFR 2/KDR auf humanen vaskulären
glatten Muskelzellen und Endothelzellen 34
3.1.1 Heterogene Expressionsmuster von Tyrosin Kinase Rezeptoren auf
humanen vaskulären glatten Muskelzellen 34
3.1.2 Variable basale Expression von VEGF Rezeptoren auf humanen
vaskulären Endothelzellen 36
3.2 Natürliche und synthetische Sexualsteroide beeinflussen die
Expression von Tyrosin Kinase Rezeptoren auf vaskulären glatten
Muskel (VSMC) und Endothelzellen sowie auf neovaskulären
Kaposi Sarkom Zellen 38
3.2.1 Potentere Induktion von VEGF Rezeptoren auf vaskulären Zellen
durch Androgene im Vergleich zu Östrogenen 38
3.2.2 Testosteron, aber auch Estradiol induzieren die Expression von
VEGF Rezeptoren auf neovaskulären Kaposi Sarkom Zellen 43
3.3 Ausgeprägte Induktion der Expression von Tyrosin Kinase
Rezeptoren auf glatten Gefäßmuskel , Endothel und Kaposi
Sarkom Zellen durch Akute Phase Proteine 44
3.3.1 SAA induziert die Expression von VEGF Rezeptoren auf vaskulären
Zellen stärker als CRP 44
3.3.2 Induktion der Expression von VEGF Rezeptoren auf neovaskulären
Kaposi Sarkom Zellen durch Akute Phase Proteine 49
3.4 Expression von VEGFR 1/FIM, sVEGFR 1/sFlt 1 und VEGFR 2/KDR
auf VSMC und Endothelzellen nach Koinkubation von Androgenen
mit Akute Phase Protelnen 50
3.4.1 Synergistische Wirkung von Testosteron und CRP auf die
Expression von sVEGFR 1/sFlt 1 und VEGFR 2/KDR auf VSMC 51
3.4.2 Die Koinkubation mit CRP führt zu einer Abnahme der Testosteron
induzierten Expression von VEGF Rezeptoren auf Endothelzellen.52
3.5 Expression nuklearer Steroidhormonrezeptoren durch vaskuläre
und neovaskuläre Zellen 54
4 DISKUSSION 55
5 ZUSAMMENFASSUNG 64
6 LITERATURVERZEICHNIS 66
8 LEBENSLAUF 82
9 DANKSAGUNG 83
IV
|
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Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 1
1.1 Pathogenese der Atherosklerose 1
1.1.1 Atherosklerose als inflammatorische Erkrankung 1
1.1.2 Entstehung der atherosklerotischen Gefäßläsion 2
1.1.2.1 Atherogene Lipoproteine und Störung der Endothelzellfunktion 2
1.1.2.2 Pathophyslologlsche Rolle glatter Muskelzellen 3
1.1.3 Einfluss inflammatorischer Proteine auf die Atherosklerose
entstehung 4
1.1.3.1 C reaktives Protein 4
1.1.3.2 Serum Amyloid A 5
1.1.4 Einfluss natürlicher und synthetischer Sexualsteroide auf die
Atheroskleroseentstehung 6
1.1.4.1 Testosteron 6
1.1.4.2 Estradiol 7
1.1.4.3 Synthetische Östrogenrezeptor Agonisten Tamoxifen 8
1.2 Die vaskulären Wachstumsfaktor Rezeptoren der VEGF Familie 9
1.2.1 Physiologische und pathophysiologische Funktion der VEGF
Rezeptoren 9
1.2.2 Aufbau und Signaltransduktion der Tyrosin Kinase Rezeptoren der
VEGF Familie 10
1.2.2.1 Duale Funktion des membranständigen und löslichen VEGFR
1/Flt 1 in der Atherogenese 14
1.2.2.2 Bedeutung von VEGFR 2/KDR in der Atherogenese 15
1.3 VEGF und VEGF Rezeptoren beeinflussen das Wachstum
neovaskulärer Kaposi Sarkom Zellen 16
1.4 Fragestellung 17
2 MATERIAL UND METHODEN 19
2.1 Zellkultur 19
2.2 RNA Isolierung 21
2.3 Polymerasekettenreaktion (PCR) 22
2.3.1 Konventionelle PCR mit dem Thermocycler bzw. Gradienten PCR22
2.3.2 Real time PCR mit dem LightCycler® 23
2.4 Expressionsanalyse mit dem LightCycler* 26
2.5 Agarosegele 30
2.6 Sequenzierung der PCR Produkte zur Qualitätssicherung 30
3 ERGEBNISSE 34
III
3.1 Basale Expression derTyrosin Kinase Rezeptoren VEGFR 1/FH 1,
sVEGFR 1/sFlt 1 und VEGFR 2/KDR auf humanen vaskulären
glatten Muskelzellen und Endothelzellen 34
3.1.1 Heterogene Expressionsmuster von Tyrosin Kinase Rezeptoren auf
humanen vaskulären glatten Muskelzellen 34
3.1.2 Variable basale Expression von VEGF Rezeptoren auf humanen
vaskulären Endothelzellen 36
3.2 Natürliche und synthetische Sexualsteroide beeinflussen die
Expression von Tyrosin Kinase Rezeptoren auf vaskulären glatten
Muskel (VSMC) und Endothelzellen sowie auf neovaskulären
Kaposi Sarkom Zellen 38
3.2.1 Potentere Induktion von VEGF Rezeptoren auf vaskulären Zellen
durch Androgene im Vergleich zu Östrogenen 38
3.2.2 Testosteron, aber auch Estradiol induzieren die Expression von
VEGF Rezeptoren auf neovaskulären Kaposi Sarkom Zellen 43
3.3 Ausgeprägte Induktion der Expression von Tyrosin Kinase
Rezeptoren auf glatten Gefäßmuskel , Endothel und Kaposi
Sarkom Zellen durch Akute Phase Proteine 44
3.3.1 SAA induziert die Expression von VEGF Rezeptoren auf vaskulären
Zellen stärker als CRP 44
3.3.2 Induktion der Expression von VEGF Rezeptoren auf neovaskulären
Kaposi Sarkom Zellen durch Akute Phase Proteine 49
3.4 Expression von VEGFR 1/FIM, sVEGFR 1/sFlt 1 und VEGFR 2/KDR
auf VSMC und Endothelzellen nach Koinkubation von Androgenen
mit Akute Phase Protelnen 50
3.4.1 Synergistische Wirkung von Testosteron und CRP auf die
Expression von sVEGFR 1/sFlt 1 und VEGFR 2/KDR auf VSMC 51
3.4.2 Die Koinkubation mit CRP führt zu einer Abnahme der Testosteron
induzierten Expression von VEGF Rezeptoren auf Endothelzellen.52
3.5 Expression nuklearer Steroidhormonrezeptoren durch vaskuläre
und neovaskuläre Zellen 54
4 DISKUSSION 55
5 ZUSAMMENFASSUNG 64
6 LITERATURVERZEICHNIS 66
8 LEBENSLAUF 82
9 DANKSAGUNG 83
IV |
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