Wirkung von IGF-I und IGF-II auf die Proliferation und Migration von Glioblastomen:
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2006
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis III
Abkürzungsverzeichnis V
Abbildungsverzeichnis VII
Tabellenverzeichnis VIII
1. Einleitung 1
1.1 Gliome 1
1.2 Das IGF System 4
1.2.1 Geschichte des IGF Systems 4
1.2.2 DieIGFs 5
1.2.2.1 IGF I 6
1.2.2.2 IGF II 6
1.2.3 Die IGF Rezeptoren 8
1.2.3.1 Der IGF I Rezeptor 8
1.2.3.2 Der IGF II/Mannose 6 Phosphat Rezeptor 9
1.2.4 Die Bindungsproteine 11
2. Fragestellung 15
3. Material und Methoden 16
3.1 Zelllinien und Zellkultur 16
3.1.1 Zelllinien 19
3.1.2 Zellkultur 19
3.1.2.1 Anzucht der Zellen 19
3.1.2.2 Subkultivierung 19
3.1.2.3 Einfrieren der Zellen 20
3.2 RNA Isolierung und cDNA Synthese 20
3.2.1 RNA Isolierung 20
3.2.2 cDNA Synthese 20
3.3 Polymerase Kettenreaktion und Gelelektrophorese 21
3.4 Proliferationstest (MTT) 23
3.5 Migrationstest (Boyden Chamber) 25
3.6 Statistik 26
4. Ergebnisse
4.1 mRNA Expression der IGFs, IGF Rezeptoren und IGFBPs 27
4.1.1 Die IGF Rezeptoren 27
4.1.2 DieIGFs 27
III
4.1.3 DieIGFBPs 27
4.2 Einfluss der IGFs auf die Proliferation von Glioblastomzellen 33
4.2.1 Vorteste zur Ermittlung der benötigten FKS Konzentrationen 33
4.2.1.1 Benötigte FKS Konzentration zur Absiedlung der Zellen 33
4.2.1.2 FKS Konzentration, bei der die Zellen gerade nicht mehr wachsen 33
4.2.2 Einfluss der IGFs auf die Proliferation von T98G 35
4.2.3 Einfluss der IGFs auf die Proliferation von 86HG39 35
4.2.4 Einfluss der IGFs auf die Proliferation von AI 72 35
4.3 Einfluss der IGFs auf die Migration von Glioblastomen 39
4.3.1 Einfluss der IGFs auf die Migration von T98G 39
4.3.2 Einfluss der IGFs auf die Migration von 86HG39 43
4.3.3 Einfluss der IGFs auf die Migration von AI 72 43
5. Diskussion 44
5.1 Das IGF System der Glioblastomzelle 44
5.1.1 Die Rezeptoren 45
5.1.2 Die IGFs 46
5.1.3 Die Bindungsproteine 47
5.2 Wirkung der IGFs auf die Proliferation 49
5.3 Wirkung der IGFs auf die Migration 52
5.4 Schlussbetrachtung 58
6. Zusammenfassung 59
7. Literatur 63
8. Erklärung über die Eigenständigkeit der Arbeit 79
9. Lebenslauf 80
IV
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Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis III
Abkürzungsverzeichnis V
Abbildungsverzeichnis VII
Tabellenverzeichnis VIII
1. Einleitung 1
1.1 Gliome 1
1.2 Das IGF System 4
1.2.1 Geschichte des IGF Systems 4
1.2.2 DieIGFs 5
1.2.2.1 IGF I 6
1.2.2.2 IGF II 6
1.2.3 Die IGF Rezeptoren 8
1.2.3.1 Der IGF I Rezeptor 8
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1.2.4 Die Bindungsproteine 11
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3. Material und Methoden 16
3.1 Zelllinien und Zellkultur 16
3.1.1 Zelllinien 19
3.1.2 Zellkultur 19
3.1.2.1 Anzucht der Zellen 19
3.1.2.2 Subkultivierung 19
3.1.2.3 Einfrieren der Zellen 20
3.2 RNA Isolierung und cDNA Synthese 20
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3.2.2 cDNA Synthese 20
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3.5 Migrationstest (Boyden Chamber) 25
3.6 Statistik 26
4. Ergebnisse
4.1 mRNA Expression der IGFs, IGF Rezeptoren und IGFBPs 27
4.1.1 Die IGF Rezeptoren 27
4.1.2 DieIGFs 27
III
4.1.3 DieIGFBPs 27
4.2 Einfluss der IGFs auf die Proliferation von Glioblastomzellen 33
4.2.1 Vorteste zur Ermittlung der benötigten FKS Konzentrationen 33
4.2.1.1 Benötigte FKS Konzentration zur Absiedlung der Zellen 33
4.2.1.2 FKS Konzentration, bei der die Zellen gerade nicht mehr wachsen 33
4.2.2 Einfluss der IGFs auf die Proliferation von T98G 35
4.2.3 Einfluss der IGFs auf die Proliferation von 86HG39 35
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4.3 Einfluss der IGFs auf die Migration von Glioblastomen 39
4.3.1 Einfluss der IGFs auf die Migration von T98G 39
4.3.2 Einfluss der IGFs auf die Migration von 86HG39 43
4.3.3 Einfluss der IGFs auf die Migration von AI 72 43
5. Diskussion 44
5.1 Das IGF System der Glioblastomzelle 44
5.1.1 Die Rezeptoren 45
5.1.2 Die IGFs 46
5.1.3 Die Bindungsproteine 47
5.2 Wirkung der IGFs auf die Proliferation 49
5.3 Wirkung der IGFs auf die Migration 52
5.4 Schlussbetrachtung 58
6. Zusammenfassung 59
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