Endothelin-1 erhöht die Palmitinsäureaufnahme in Alveolar-Typ-II-Zellen:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
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Veröffentlicht: |
2006
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adam_text | Titel: Endothelin-1 erhöht die Palmitinsäureaufnahme in Alveolar-Typ-II-Zellen
Autor: Weber, Sven Christian
Jahr: 2006
Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung. 7
1.1 Surfactant 7
1.2Endothelin-l 15
2. Aufgabenstellung 19
3. Material und Methoden 20
3.1. Chemikalien 20
3.2 Geräte und Hilfsmittel 20
3.3 Methoden 21
3.3.1 AT-II-Zellen-Isolierung 21
3.3.2 Applikation der Signaltransduktionsmodulatoren 22
3.3.3 Palmitinsäureaufnahmeexperimente 22
3.3.4 Pulse-Chase -Experimente 24
3.3.5 Messung der ß-Oxidation 26
3.3.6 Proteinbestimmung 27
3.3.7 Membranpräparation 27
3.3.8 SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) 29
3.3.9 Western-Blot 30
3.4 Statistik 32
4. Ergebnisse 53
4.1 Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen 33
4.2 Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 34
4.3 Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 und dem
EndothelinA- Rezeptor-Antagonisten BQ-123 34
4.4 Regulation der durch ET-1 erhöhten Palmitinsäureufnahme in Maus-AT-II-Zellen 35
4.5 Palmitinsäureaufnahme in AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 und PMA 37
4.6 Palmitinsäureeinbau in komplexe Lipide von AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 und
PMA 38
4.7 Effekt von ET-1 und PMA auf die ß-Oxidation frisch aufgenommener Palmitinsäure in
AT-II-Zellen 39
4.8 Einfluss von ET-1 auf die Expression von PKC-Isoformen in AT-II-Zellen 40
4.9 FAT/CD36-Nachweis durch Western-Blot 43
5. Diskussion 44
5.1 Palmitinsäureaufnahme 44
5.2 ET-1-Effekt auf die Fettsäureaufnahme 44
5.3 Signaltransduktionsweg des ET-1 46
5.4FAT/CD36 49
5.5 Effekt von ET-1 und PMA auf den Palmitinsäureeinbau in komplexe Lipide von
AT-II-Zellen 50
3
6. Zusammenfassung 52
7. Literatur 53
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 1: AT-II-Zelle EM modifiziert nach Kolleck et al. (16) 9
Abbildung 2: Surfactantsynthese und Sekretion modifiziert nach Creuwels et al. (13) 13
Abbildung 3: Regulation der Surfactant-Sekretion modifiziert nach Rooney (70) 14
Abbildung 4: Struktur ET-1 modifiziert nach Ortega et al. (73) 75
Abbildung 5: Zeitlicher Ablauf der Pulse-Chase-Experimente 25
Abbildung 6: Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen 33
Abbildung 7: Palmitinsäureaufnahme in Gegenwart von ET-1 und unter Zusatz eines ET-1-
Rezeptorantagonisten 35
Abbildung 8: Palmitinsäureaufnahme in AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 undPMA 37
Abbildung 9: Effekt von ET-1 und PMA auf den Palmitinsäureeinbau in komplexe Lipide von
AT-II-Zellen 39
Abbildung 10: Nachweis der PKC-Isoformen PKC ju und PKC 8 nach Zugabe von ET-1- und
PMA in AT-II-Zellen 41
Abbildung 11: ET-1- und PMA-Wirkung auf Palmitinsäureaufnahme und Aktivierung der PKC 8
in AT-II-Zellen 42
Abbildung 12: Effekt von ET-1 und von PMA auf die Verteilung von FAT/CD36 zwischen
Cytosol und Membranfraktion von AT-II-Zellen 43
Abbildung 13: Übersicht des Signaltransduktionswegs von ET-1 in Maus-AT-II-Zellen 47
4
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Titel: Endothelin-1 erhöht die Palmitinsäureaufnahme in Alveolar-Typ-II-Zellen
Autor: Weber, Sven Christian
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1.1 Surfactant 7
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4. Ergebnisse 53
4.1 Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen 33
4.2 Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 34
4.3 Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 und dem
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4.6 Palmitinsäureeinbau in komplexe Lipide von AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 und
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4.7 Effekt von ET-1 und PMA auf die ß-Oxidation frisch aufgenommener Palmitinsäure in
AT-II-Zellen 39
4.8 Einfluss von ET-1 auf die Expression von PKC-Isoformen in AT-II-Zellen 40
4.9 FAT/CD36-Nachweis durch Western-Blot 43
5. Diskussion 44
5.1 Palmitinsäureaufnahme 44
5.2 ET-1-Effekt auf die Fettsäureaufnahme 44
5.3 Signaltransduktionsweg des ET-1 46
5.4FAT/CD36 49
5.5 Effekt von ET-1 und PMA auf den Palmitinsäureeinbau in komplexe Lipide von
AT-II-Zellen 50
3
6. Zusammenfassung 52
7. Literatur 53
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 1: AT-II-Zelle EM modifiziert nach Kolleck et al. (16) 9
Abbildung 2: Surfactantsynthese und Sekretion modifiziert nach Creuwels et al. (13) 13
Abbildung 3: Regulation der Surfactant-Sekretion modifiziert nach Rooney (70) 14
Abbildung 4: Struktur ET-1 modifiziert nach Ortega et al. (73) 75
Abbildung 5: Zeitlicher Ablauf der Pulse-Chase-Experimente 25
Abbildung 6: Palmitinsäureaufnahme in Maus-AT-II-Zellen 33
Abbildung 7: Palmitinsäureaufnahme in Gegenwart von ET-1 und unter Zusatz eines ET-1-
Rezeptorantagonisten 35
Abbildung 8: Palmitinsäureaufnahme in AT-II-Zellen in Gegenwart von ET-1 undPMA 37
Abbildung 9: Effekt von ET-1 und PMA auf den Palmitinsäureeinbau in komplexe Lipide von
AT-II-Zellen 39
Abbildung 10: Nachweis der PKC-Isoformen PKC ju und PKC 8 nach Zugabe von ET-1- und
PMA in AT-II-Zellen 41
Abbildung 11: ET-1- und PMA-Wirkung auf Palmitinsäureaufnahme und Aktivierung der PKC 8
in AT-II-Zellen 42
Abbildung 12: Effekt von ET-1 und von PMA auf die Verteilung von FAT/CD36 zwischen
Cytosol und Membranfraktion von AT-II-Zellen 43
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