Einflussfaktoren auf den Verlauf der Neutrophilenaktivierung während der extrakorporalen Zirkulation unter besonderer Berücksichtigung verschiedener Formen der Myokardprotektion:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2006
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Regensburg, Univ., Diss., 2006 |
| Beschreibung: | 170 Bl. Ill., graph. Darst. |
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| adam_text | Titel: Einflussfaktoren auf den Verlauf der Neutrophilenaktivierung während der extrakorporalen Zirkulatio
Autor: Brünger, Frank
Jahr: 2006
Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 7
1.1 Kardioplegieverfahren 7
1.1.1 Bretschneider-Kardioplegie 8
1.1.2 Blutkardioplegie Buckberg 9
1.1.3 Hot-Shot-Verfahren 9
1.2 Neutrophile Granuloryttn 9
1.3 Zielsetzung 12
1.4 Studiendesign 13
2 MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 Patientenselektion 15
2.1.1 Einschlusskriterien IS
2.1.2 Ausschlusskriterien 15
2.1.3 Aufklärung 15
2.2 Rudombierung 16
2.3 Studienumfang und Einteilung der Patienten 16
2.4 Datenerfassung 17
2.4.1 Patientendaten 17
2.4.2 Probenentnahme und Entnahmezeitpunkt 17
2.5 Operationsverfahren 19
2.5.1 Narkose 19
2.5.1.1 Prämedikarion 19
2.5.1.2 Narkoseeinleitung 19
2.5.1.3 Narkosefortfuhrung 19
2.5.2 Operationstechnik 19
2.5.3 Extrakorporale Zirkulation und Herz-Lungen-Maschine 20
2.5.3.1 Ausstattung 20
2.5.3.2 Priming 20
2.5.3.3 Oxygenierung 2t
2.5.3.4 Perfusion und Hypothermie 21
2.5.3.5 Aufbau der extrakorporalen Zirkulation 21
2.5.4 Induktion des Herzstillstandes und Myokardprotektion 22
1
Inhaltsverzeichnis
2.5.4.1 Kardioplegie nach Breischneider 22
2.5.4.2 Kardioplegie nach Buckberg (Blulkardioplegie) 23
2.5.4 3 Kardioplegie mit Hot-Shot 24
2.5.5 Cellsaver 25
2.6 Statistik 2S
2.6.1 Verwendete Slatistikverfahren 25
2.6.2 Analyse der Abnahmezeitpunktc 27
2.6.3 Zeitlicher Verlauf 27
2.6.4 Einfluss der Narkose 27
2.6.5 Einfluss der Ischttmiezeit, der Dauer der cxtrakorporalen Zirkulation und der KF 28
2.6.6 Zusammenhang arterieller und coronar venöser Messwerte 28
2.7 Laboranarytik 29
2.7.1 Reagenzien 29
2.7.2 Verfahrensbeschreibung der Durctvflusszytomelrie 30
2.7.2.1 Aufbau des Durchflusszytometers 31
2 7.2.2 Testprinzip „Oxidativer Burst 32
2.7.3 Durchführung der durchflusszytometrischen Messung 34
2.7.3.1 Probenaufarbeitung 34
2.7.32 Inkubation 35
2.7.3.3 Durchflusszytometrische Datenanalyse 37
2.7.3.4 Gatingparamcter 37
2.7.4 Aufbereitung der durchflusszytometrischen Messdaten 39
3 ERGEBNISSE 43
3 1 Patimtenkolkktiv 43
3 2 Ergcbniaw der Durchfluiaiytometxle 44
3.2.1 Oxidativer Burst der neutrophilen Granulozylen vor extrakorporaler Zirkulation (TI) 45
3 2 11 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen (AI) und coronar-sinus (CSI) Proben 45
3.2.1.2 Mittlere Fluoreszenz(MF) der arteriellen (AI) und coronar-smus (CSI) Proben 47
3.2 2 Oxidativer Burst der neutrophilen Granulozytcn nach Ischamiezeit (T2) 49
3.2.2.1 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen (A2) und coronar-smus (CS2) Proben 49
3.2 2 2 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A2) und coronar-smus (CS2) Proben 51
3.2.3 Oxtdativer Burst der neutrophiien Granulozytcn nach extrakorporaler Zirkulation (T3) 54
3.2.3. l Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen (A3) und coronar-smus (CS3) Proben 54
3 2 3 2 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A3) und coronar-smus (CS3) Proben 56
3 2 4 Einfluss der Narkose 58
3.2.4.1 Narkosecinfluss auf die Anzahl aktivierter Zellen 58
2
Inhaltsverzeichnis
3.2.4.2 Narkoseeinfluss auf die mittlere Fluoreszenz 61
3.2.5 Einfluss der Variablen Ischämiezeit, Dauer der extrakorporalen Zirkulation und EF 63
3.2.6 Zeitlicher Verlauf 66
3 2.6.1 Zeillicher Verlauf des Anteils aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und coronar-
sinus (CSI-CS3) Proben 66
3.2.6.1 I Anteil aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS 1-CS3)
Proben ohne Stimulatiort 66
3.2.6.1.2 Anteil aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und corona/-sinus(CSl-CS3)
Proben unter Stimulation mit FMLP 67
3.2 6.13 Anteil aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS I-CS3)
Proben unter Stimulation mit TNF-a und FMLP 68
3.2 6.2 Zeitlicher Verlauf der Mittleren Fluoreszenz der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben 69
3.2.6.2.1 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS1-CS3)
Proben ohne Stimulation (S-NULL) 69
3.2.6.2 2 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS1-CS3)
Proben unter Stimulation mit FMLP (S-FMLP) 70
3.26 2 3 Mittlere Fluoreszenz mit TNF-a und FMLP 71
3.2.6.2 4 Mittlere Fluoreszenz mit PMA 72
3.2.6.3 Zusammenfassung der Ergebnisse zum zeitlichen Verlauf 72
3.2.7 Zusammenhang arterieller und coronar venöser Messwerte 73
3.2.7.1 Zusammenhang des Anteils aktivierter Zellen arteriell und coronarvenös 73
3.2.7.1.1 Anteil aktivierter Zellen ohne Stimulation 73
3.2 7.1.2 Anteil aktiviertet Zellen mit FMLP 74
3.27 13 Anteil aktivierter Zellen mit TNF-a und FMLP 76
3.2.7.2 Zusammenhang der Mittleren Fluoreszenz arteriell und coronarvenös 77
3 2.7 2 1 Minlere Fluoreszenz ohne Stimulation 77
3.2.7.2.2 Mittlere Fluoreszenz mit FMLP 78
3 2 7.2 3 Minlere Fluoreszenz mit TNF-a und FMLP 80
3 2 724 Miniere Fluoreszenz mit PMA 82
3.2.7.3 Zusammenfassung der Korrelationsanalysc zwischen arteriellen und coronar-venösen
Messwerten 84
3.2.8 Transmyokardialcr Gradient 85
3.2.8.1 Transmyokardialcr Gradient nach Ischämiephase 85
3 282 Transmyokardialer Gradient nach Ende EKZ 88
4 DISKUSSION »0
4 1 Extrakorporak Zirkulation 91
411 Zeitlicher Verlauf 92
3
Inhaltsverzeichnis
4.1.1.1 Ischämiezeit (Aorta auf) 92
4.1.1.2 Reperfusionszeit (Ende EKZ) 93
4.1.2 Transmyokardialer Gradient 94
4.1.2.1 Transmyokardialer Gradient nach Ischämiephase (Aorta auf) 95
4.1.2.2 Transmyokardialer Gradient nach Reperfusion (EKZ Ende) 97
4 2 Vergleich der Kardioplegieverfahren 98
4.2.1 Bretschneider-Kardioplegie 98
4.2.2 Blutkardioplegie nach Buckberg 99
4.2.3 Hot-Shot-Kardioplegie 99
4.3 Elnfluu eiterner Faktoren 101
4.3.1 Narkose 101
4.3.2 Ischämiezeit, Dauer der extrakorporalen Zirkulation und EF 102
4.3.3 Einfluss von Volutnenersatzlösungen 104
4.4 Oiidstiver Bunt 104
4.4.1 Stimulation mit PMA 106
4.4.2 Stimulation mit FMLP 107
4.4.3 Stimulation mit TNF-o und FMLP 107
4.5 Überlegungen zu therapeutischen Konsequenzen 108
4.6 Metliodenkritik 110
5 ZUSAMMENFASSUNG 111
6 ABKÜRZUNGEN 113
7 VERWENDETE GERATE UNO CHEMIKALIEN 115
7 1 Gerile 115
7.1.1 Probenabnahme, -aufarbeitung und Inkubation 115
7.1.2 Durchflußzytometrische Messung 115
7.1.3 Statistik 115
7.2 Biologisches Material 116
7 3 Chemikalien und Reagenzien 116
8 TABELLENVERZEICHNIS 117
4
Inhaltsverzeichnis
9 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 118
10 DANKSAGUNG 124
11 LITERATURVERZEICHNIS 125
12 DATENANHANG 131
12.1 Patientendaten 131
12.2 Messwerte 132
12.2.1 Anteil an aktivierten Zellen [%) 132
12.2.1.1 S-NULL 132
12.2.1.2 Stimulation S-FMLP 133
12.2.1.3 Stimulation S-TNF/FMLP 134
12.2.2 Mittlere Fluoreszenz [MESF] 135
12.2.2.1 Stimulation S-NULL 135
12.2.2.2 Stimulation S-FMLP 136
12.2.2.3 Stimulation S-TNF/FMLP 137
12.2.2.4 Stimulation S-PMA 138
12.3 Deskriptive Statistiken 139
12.3.1 Patientendaten 139
12.3.2 Messwette 140
12.3.2.1.1 Stimulation S-NULL 140
12.3.2.2 Stimulation S-FMLP 142
12.3.2.3 Stimulation mit S-TNF/FMLP 144
12.3.2.4 Stimulation S-PMA 146
12.3.3 Transmyokardialer Gradient (TMG) 147
12.3.3.1 Stimulation S-NULL 147
12.3.3.2 Stimulation S-FMLP 147
12.3.3.3 Stimulation S-TNF/FMLP 148
12.3.3.4 Stimulation S-PMA 148
12.4 Gruppen und Mehrfachvergleiche 149
12.4.1 Patientendaten 149
12.4.2 Messwerte 150
12.4.2 1 Stimulation S-NULL 150
12.4.2.2 Stimulation S-FMLP 152
12.4.2.3 Stimulation S-TNF/FMLP 154
5
Inhaltsverzeichnis
12.4.2.4 Stimulation S-PMA 156
12.4.3 Transmyokardialer Gradient 157
12.4.3.1 Stimulation S-NULL 157
12.4.3.2 Stimulation S-FMLP 157
12.4.3.3 Stimulation S-TNF/FMLP 158
12.4.3.4 Stimulation S-PMA 158
12.4 4 Korrelationen 159
12.4.4.1 Narkoseeinfluss 159
12.4.4.1.1 Anteil an aktivierten Zellen 159
12.4.4.1.2 Mittlere Fluoreszenz 160
12.4.5 Einfluss der EF 161
12.4.5.1 Coronar-sinus Proben nach T2 161
12.4.5.2 Coronar-sinus Proben nach T3 161
12.4.6 Gradient 162
12.4.6.1 Anteil an aktivierten Zellen 162
12.4.6.2 Mittlere Fluoreszenz 164
13 LEBENSLAUF 169
6
Tabellenverzeichnis
8 Tabellenverzeichnis
Tabelle 2-1 Zuordnung der Gruppen zu den unterschiedlichen Kardioplegieverfahren 16
Tabelle 2-2 Abnahmezeitpunkte der Blutproben 18
Tabelle 2-3 Zeitliche Abfolge der Blutentnahmen 18
Tabelle 2-4 Zusammensetzung Cardioplegin 22
Tabelle 2-5 Zusammensetzung Custodiol-Lösung 22
Tabelle 2-6 Zusammensetzung Blutkardioplegie nach Buckberg zur kalten Induktion 23
Tabelle 2-7 Zusammensetzung Blutkardioplegie nach Buckberg zur kalten Reinfusion
24
Tabelle 2-8 Hot-Shot-Lösung zur warmen Reperfusion 25
Tabelle 2-9 Inkubationsschema Oxidativer Burst 36
Tabelle 2-10 Programmierung Durchflusszytometer 37
Tabelle 2-11 Eigenschaften der Zweiparameter-Histogramme 38
Tabelle 2-12 Parameter der Gating-Fenster 38
Tabelle 3-1 Demografische Daten, operative und klinische Parameter des untersuchten
Patientenkollektives 43
117
Abbildungsverzeichnis
9 Abbildungsverzeichnis
Abbildung 1-1 Freisetzung reaktiver Agenzien aus Granulozyten 10
Abbildung 1-2 Reaktionspfad NO-Synthase und NADPH-Oxidase 11
Abbildung 2-1 Schema warme Reperfiision Hot-Shot [2] 24
Abbildung 2-2 Arbeitsplatz Durchflusszytometrie 30
Abbildung 2-3 Flüssigkeitssystem eines Durchflusszytometers 31
Abbildung 2-4 Detektionsschema eines Durchflusszytometers 32
Abbildung 2-5 Oxidation von Dihydrorhodamin-123 zu Rhodamin-123 33
Abbildung 2-6 Ficoll-Gradient zur Separation der Leukozyten 35
Abbildung 2-7 Histogramme der durchflusszytometrischen Messung 39
Abbildung 2-8 Zwei-Parameter-Histogramm für Leerweit und Stimulation mit FMLP,
TNF-a + FMLP bzw. PMA für jeden Messpunkt 41
Abbildung 3-1 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen Probe (A1) vor Beginn
der extrakorporalen Zirkulation(Tl) ohne Stimulation (S-NULL) und nach
Stimulation mit FMLP (S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 45
Abbildung 3-2 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der coronar-sinus Proben vor Beginn der
extrakoporalen Zirkulation (CS1) ohne Stimulation (S-NULL) und nach
Stimulation mit FMLP (S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 46
Abbildung 3-3 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Probe (AI) vor Beginn der
extrakorporalen Zirkulation(Tl) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation
mit FMLP (S-FMLP) und TNF, FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 47
Abbildung 3-4 Mittlere Fluoreszenz der coronar-sinus Proben (CS1) vor Beginn der
extrakoporalen Zirkulation (Tl) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation
mit FMLP (S-FMLP), TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 48
Abbildung 3-5 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen Probe (A2) nach
Ischämiezeit (T2) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit FMLP (S-
FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 49
Abbildung 3-6 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der coronar-sinus- Probe (CS2) nach
Ischämiezeit (T2) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit FMLP (S-
FMLP) sowie TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 50
118
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-7 Mittiere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Probe (A2) nach Ischämiezeit
(T2) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit FMLP (S-FMLP)
sowie TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 51
Abbildung 3-8 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Proben (A2) nach
Ischämiezeit (T2) ohne Stimulation (S-NULL) (p = 0,049) 52
Abbildung 3-9 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Proben (A2) nach
Ischämiezeit (T2) und Stimulation mit FMLP (S-FMLP (p = 0,026) 52
Abbildung 3-10 Mittlere Fluoreszenz (MF) der coronar-sinus Proben (CS2) nach
Ischämiezeit (T2) und Stimulation mit FMLP (S-FMLP), mit TNF/FMLP (S-
TNF/FMLP), PMA (S-PMA) und ohne Stimulation (S-NULL) 53
Abbildung 3-11 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen Probe (A3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) sowie Stimulation mit FMLP
(S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 54
Abbildung 3-12 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der coronar-sinus Probe (CS3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit
FMLP (S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 55
Abbildung 3-13 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Probe (A3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) sowie nach Stimulation mit
FMLP (S-FMLP) und TNF, FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 56
Abbildung 3-14 Mittlere Fluoreszenz (MF) der coronar-sinus Proben (CS3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) sowie nach Stimulation mit
FMLP (S-FMLP) und TNF, FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 57
Abbildung 3-15 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
II ohne Stimulation (S-NULL), dargestellt ist AAZ vor Narkose (A0) gegen AAZ
vorEKZ(Al) 59
Abbildung 3-16 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
III ohne Stimulation (S-NULL), dargestellt ist AAZ vor Narkose (A0) gegen AAZ
vorEKZ(Al) 59
Abbildung 3-17 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
I mit FMLP-Stimulation (S-FMLP), dargestellt ist AAZ vor Narkose (A0) gegen
AAZvorEKZ(Al) 60
119
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-18 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
II mit FMLP-Stimulation (S-FMLP), dargestellt ist AAZ vor Narkose (AO) gegen
AAZvorEKZ(Al) 60
Abbildung 3-19 20 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der
Gruppe III mit FMLP-Stimulation (S-FMLP), dargestellt ist AAZ vor Narkose
(AO) gegen AAZ vor EKZ (AI) 60
Abbildung 3-21 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe
III ohne Stimulation (S-NULL), dargestellt ist MF vor Narkose (AO) gegen AAZ
vor EKZ (AI) 61
Abbildung 3-22 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe I
unter Stimulation mit TNF und FMLP (S-TNF/FMLP), dargestellt ist MF vor
Narkose (AO) gegen AAZ vor EKZ (AI) 62
Abbildung 3-23 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe II
unter Stimulation mit TNF und FMLP (S-TNF/FMLP), dargestellt ist MF vor
Narkose (AO) gegen AAZ vor EKZ (AI) 62
Abbildung 3-24 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe II
unter Stimulation mit PMA (S-PMA), dargestellt ist MF vor Narkose (AO) gegen
AAZ vor EKZ (AI) 63
Abbildung 3-25 Korrelation zwischen der EF und der mittleren Fluoreszenz (MF) der
arteriellen Proben nach Ischämie (A2) in Gruppe I und Stimulation mit PMA (S-
PMA) 64
Abbildung 3-26 Korrelation zwischen der EF und der mittleren Fluoreszenz (MF) der
coronarsinus Proben nach Ischämie (CS2) in Gruppe I und Stimulation mit PMA
(S-PMA) 64
Abbildung 3-27 Korrelation zwischen der EF und der mittleren Fluoreszenz (MF) der
coronarsinus Proben nach Reperfusion (CS3) in Gruppe I und Stimulation mit
PMA (S-PMA) 65
Abbildung 3-28 Anteil der aktivierten Zellen (AAZ) in den arteriellen (A0-A3) und
coronar-sinus-Proben (CS1-CS3) ohne Stimulation (S-NULL) im zeitlichen
Verlauf 66
Abbildung 3-29 Anteil der aktivierten Zellen (AAZ) in den arteriellen (A0-A3) und
coronar-sinus-Proben (CS1-CS3) unter Stimulation mit FMLP (S-FMLP) im
zeitlichen Verlauf 67
120
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-30 Anteil der aktivierten Zellen (AAZ) in den arteriellen (A0-A3) und
coronar-sinus-Proben (CS1-CS3) unter Stimulation mit TNF-a+FMLP (S-
TNF/FMLP) im zeitlichen Verlauf 68
Abbildung 3-31 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben ohne Stimulation (S-NULL im zeitlichen Verlauf 69
Abbildung 3-32 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben unter Stimulation mit FMLP (S-FMLP) im zeitlichen Verlauf
70
Abbildung 3-33 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben unter Stimulation mit TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) im
zeitlichen Verlauf 71
Abbildung 3-34 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CSI-CS3) Proben unter Stimulation mit PMA (S-PMA) im zeitlichen Verlauf 72
Abbildung 3-35 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie T2 ohne
Stimulation (S-NULL) Gruppe I 73
Abbildung 3-36 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion T3 ohne
Stimulation (S-NULL) Gruppe I 74
Abbildung 3-37 38 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ)
in den arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe I 74
Abbildung 3-39 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), Stimulation
FMLP (S-FMLP), Gruppe II 75
Abbildung 3-40 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe I 75
Abbildung 3-41 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe II 76
121
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-42 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe III 76
Abbildung 3-43 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), keine
Stimulation (S-NULL), Gruppe I 77
Abbildung 3-44 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), keine
Stimulation (S-NULL), Gruppe II 77
Abbildung 3-45 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3), keine
Stimulation (S-NULL), Gruppe I 78
Abbildung 3-46 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), Stimulation mit
FMLP (S-FMLP), Gruppe I 78
Abbildung 3-47 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), Stimulation mit
FMLP (S-FMLP), Gruppe II 79
Abbildung 3-48 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),),
Stimulation mit FMLP (S-FMLP), Gruppe I 80
Abbildung 3-49 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),),
Stimulation mit FMLP (S-FMLP), Gruppe II 80
Abbildung 3-50 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),), Stimulation
mit TNF-a und FMLP (S-TNF/FMLP), Gruppe I 81
Abbildung 3-51 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),), Stimulation
mit TNF-a und FMLP (S-TNF/FMLP), Gruppe II 81
Abbildung 3-52 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),), Stimulation
mit TNF-a und FMLP (S-TNF/FMLP), Gruppe II 82
122
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-53 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3), Stimulation
mit PMA (S-PMA), Gruppe I 82
Abbildung 3-54 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3), Stimulation
mit PMA (S-PMA), Gruppe II 83
Abbildung 3-55 Statistisch signifikante Korrelationen des Anteils an aktivierten Zellen
A3 zu CS3 am Ende der Reperfusion (T3) mit FMLP-Stimulation (S-FMLP) in
Gruppe I - III 84
Abbildung 3-56 Statistisch signifikante Korrelationen des Anteils an aktivierten Zellen
A3 zu CS3 am Ende der Ischämiezeit (T2) mit TNF-a und FMLP -Stimulation (S-
TNF/FMLP) in Gruppe I - III 85
Abbildung 3-57 Transmyokardialer Gradienten für den Anteil aktivierter Zellen (AAZ)
sowie die mittlere Fluoreszenz(MF) zum Zeitpunkt T2 (Ischämiephase) mit
unterschiedlichen Stimulationsverfahren (S-NULL, S-FMLP, S-TNF/FMLP, S-
PMA) aller Gruppen I-III 87
Abbildung 3-58 Transmyokardialer Gradienten für den Anteil aktivierter Zellen (AAZ)
sowie die mittlere Fluoreszenz(MF) zum Zeitpunkt T3 (Reperfusionsphase) mit
unterschiedlichen Stimulationsverfahren (S-NULL, S-FMLP, S-TNF/FMLP, S-
PMA) aller Gruppen I-III 89
Abbildung 4-1 PECAM-1 im Entzündungsprozess[74] 109
123
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Titel: Einflussfaktoren auf den Verlauf der Neutrophilenaktivierung während der extrakorporalen Zirkulatio
Autor: Brünger, Frank
Jahr: 2006
Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 7
1.1 Kardioplegieverfahren 7
1.1.1 Bretschneider-Kardioplegie 8
1.1.2 Blutkardioplegie Buckberg 9
1.1.3 Hot-Shot-Verfahren 9
1.2 Neutrophile Granuloryttn 9
1.3 Zielsetzung 12
1.4 Studiendesign 13
2 MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 Patientenselektion 15
2.1.1 Einschlusskriterien IS
2.1.2 Ausschlusskriterien 15
2.1.3 Aufklärung 15
2.2 Rudombierung 16
2.3 Studienumfang und Einteilung der Patienten 16
2.4 Datenerfassung 17
2.4.1 Patientendaten 17
2.4.2 Probenentnahme und Entnahmezeitpunkt 17
2.5 Operationsverfahren 19
2.5.1 Narkose 19
2.5.1.1 Prämedikarion 19
2.5.1.2 Narkoseeinleitung 19
2.5.1.3 Narkosefortfuhrung 19
2.5.2 Operationstechnik 19
2.5.3 Extrakorporale Zirkulation und Herz-Lungen-Maschine 20
2.5.3.1 Ausstattung 20
2.5.3.2 Priming 20
2.5.3.3 Oxygenierung 2t
2.5.3.4 Perfusion und Hypothermie 21
2.5.3.5 Aufbau der extrakorporalen Zirkulation 21
2.5.4 Induktion des Herzstillstandes und Myokardprotektion 22
1
Inhaltsverzeichnis
2.5.4.1 Kardioplegie nach Breischneider 22
2.5.4.2 Kardioplegie nach Buckberg (Blulkardioplegie) 23
2.5.4 3 Kardioplegie mit Hot-Shot 24
2.5.5 Cellsaver 25
2.6 Statistik 2S
2.6.1 Verwendete Slatistikverfahren 25
2.6.2 Analyse der Abnahmezeitpunktc 27
2.6.3 Zeitlicher Verlauf 27
2.6.4 Einfluss der Narkose 27
2.6.5 Einfluss der Ischttmiezeit, der Dauer der cxtrakorporalen Zirkulation und der KF 28
2.6.6 Zusammenhang arterieller und coronar venöser Messwerte 28
2.7 Laboranarytik 29
2.7.1 Reagenzien 29
2.7.2 Verfahrensbeschreibung der Durctvflusszytomelrie 30
2.7.2.1 Aufbau des Durchflusszytometers 31
2 7.2.2 Testprinzip „Oxidativer Burst" 32
2.7.3 Durchführung der durchflusszytometrischen Messung 34
2.7.3.1 Probenaufarbeitung 34
2.7.32 Inkubation 35
2.7.3.3 Durchflusszytometrische Datenanalyse 37
2.7.3.4 Gatingparamcter 37
2.7.4 Aufbereitung der durchflusszytometrischen Messdaten 39
3 ERGEBNISSE 43
3 1 Patimtenkolkktiv 43
3 2 Ergcbniaw der Durchfluiaiytometxle 44
3.2.1 Oxidativer Burst der neutrophilen Granulozylen vor extrakorporaler Zirkulation (TI) 45
3 2 11 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen (AI) und coronar-sinus (CSI) Proben 45
3.2.1.2 Mittlere Fluoreszenz(MF) der arteriellen (AI) und coronar-smus (CSI) Proben 47
3.2 2 Oxidativer Burst der neutrophilen Granulozytcn nach Ischamiezeit (T2) 49
3.2.2.1 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen (A2) und coronar-smus (CS2) Proben 49
3.2 2 2 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A2) und coronar-smus (CS2) Proben 51
3.2.3 Oxtdativer Burst der neutrophiien Granulozytcn nach extrakorporaler Zirkulation (T3) 54
3.2.3. l Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen (A3) und coronar-smus (CS3) Proben 54
3 2 3 2 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A3) und coronar-smus (CS3) Proben 56
3 2 4 Einfluss der Narkose 58
3.2.4.1 Narkosecinfluss auf die Anzahl aktivierter Zellen 58
2
Inhaltsverzeichnis
3.2.4.2 Narkoseeinfluss auf die mittlere Fluoreszenz 61
3.2.5 Einfluss der Variablen Ischämiezeit, Dauer der extrakorporalen Zirkulation und EF 63
3.2.6 Zeitlicher Verlauf 66
3 2.6.1 Zeillicher Verlauf des Anteils aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und coronar-
sinus (CSI-CS3) Proben 66
3.2.6.1 I Anteil aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS 1-CS3)
Proben ohne Stimulatiort 66
3.2.6.1.2 Anteil aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und corona/-sinus(CSl-CS3)
Proben unter Stimulation mit FMLP 67
3.2 6.13 Anteil aktivierter Zellen der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS I-CS3)
Proben unter Stimulation mit TNF-a und FMLP 68
3.2 6.2 Zeitlicher Verlauf der Mittleren Fluoreszenz der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben 69
3.2.6.2.1 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS1-CS3)
Proben ohne Stimulation (S-NULL) 69
3.2.6.2 2 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus (CS1-CS3)
Proben unter Stimulation mit FMLP (S-FMLP) 70
3.26 2 3 Mittlere Fluoreszenz mit TNF-a und FMLP 71
3.2.6.2 4 Mittlere Fluoreszenz mit PMA 72
3.2.6.3 Zusammenfassung der Ergebnisse zum zeitlichen Verlauf 72
3.2.7 Zusammenhang arterieller und coronar venöser Messwerte 73
3.2.7.1 Zusammenhang des Anteils aktivierter Zellen arteriell und coronarvenös 73
3.2.7.1.1 Anteil aktivierter Zellen ohne Stimulation 73
3.2 7.1.2 Anteil aktiviertet Zellen mit FMLP 74
3.27 13 Anteil aktivierter Zellen mit TNF-a und FMLP 76
3.2.7.2 Zusammenhang der Mittleren Fluoreszenz arteriell und coronarvenös 77
3 2.7 2 1 Minlere Fluoreszenz ohne Stimulation 77
3.2.7.2.2 Mittlere Fluoreszenz mit FMLP 78
3 2 7.2 3 Minlere Fluoreszenz mit TNF-a und FMLP 80
3 2 724 Miniere Fluoreszenz mit PMA 82
3.2.7.3 Zusammenfassung der Korrelationsanalysc zwischen arteriellen und coronar-venösen
Messwerten 84
3.2.8 Transmyokardialcr Gradient 85
3.2.8.1 Transmyokardialcr Gradient nach Ischämiephase 85
3 282 Transmyokardialer Gradient nach Ende EKZ 88
4 DISKUSSION »0
4 1 Extrakorporak Zirkulation 91
411 Zeitlicher Verlauf 92
3
Inhaltsverzeichnis
4.1.1.1 Ischämiezeit (Aorta auf) 92
4.1.1.2 Reperfusionszeit (Ende EKZ) 93
4.1.2 Transmyokardialer Gradient 94
4.1.2.1 Transmyokardialer Gradient nach Ischämiephase (Aorta auf) 95
4.1.2.2 Transmyokardialer Gradient nach Reperfusion (EKZ Ende) 97
4 2 Vergleich der Kardioplegieverfahren 98
4.2.1 Bretschneider-Kardioplegie 98
4.2.2 Blutkardioplegie nach Buckberg 99
4.2.3 Hot-Shot-Kardioplegie 99
4.3 Elnfluu eiterner Faktoren 101
4.3.1 Narkose 101
4.3.2 Ischämiezeit, Dauer der extrakorporalen Zirkulation und EF 102
4.3.3 Einfluss von Volutnenersatzlösungen 104
4.4 Oiidstiver Bunt 104
4.4.1 Stimulation mit PMA 106
4.4.2 Stimulation mit FMLP 107
4.4.3 Stimulation mit TNF-o und FMLP 107
4.5 Überlegungen zu therapeutischen Konsequenzen 108
4.6 Metliodenkritik 110
5 ZUSAMMENFASSUNG 111
6 ABKÜRZUNGEN 113
7 VERWENDETE GERATE UNO CHEMIKALIEN 115
7 1 Gerile 115
7.1.1 Probenabnahme, -aufarbeitung und Inkubation 115
7.1.2 Durchflußzytometrische Messung 115
7.1.3 Statistik 115
7.2 Biologisches Material 116
7 3 Chemikalien und Reagenzien 116
8 TABELLENVERZEICHNIS 117
4
Inhaltsverzeichnis
9 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 118
10 DANKSAGUNG 124
11 LITERATURVERZEICHNIS 125
12 DATENANHANG 131
12.1 Patientendaten 131
12.2 Messwerte 132
12.2.1 Anteil an aktivierten Zellen [%) 132
12.2.1.1 S-NULL 132
12.2.1.2 Stimulation S-FMLP 133
12.2.1.3 Stimulation S-TNF/FMLP 134
12.2.2 Mittlere Fluoreszenz [MESF] 135
12.2.2.1 Stimulation S-NULL 135
12.2.2.2 Stimulation S-FMLP 136
12.2.2.3 Stimulation S-TNF/FMLP 137
12.2.2.4 Stimulation S-PMA 138
12.3 Deskriptive Statistiken 139
12.3.1 Patientendaten 139
12.3.2 Messwette 140
12.3.2.1.1 Stimulation S-NULL 140
12.3.2.2 Stimulation S-FMLP 142
12.3.2.3 Stimulation mit S-TNF/FMLP 144
12.3.2.4 Stimulation S-PMA 146
12.3.3 Transmyokardialer Gradient (TMG) 147
12.3.3.1 Stimulation S-NULL 147
12.3.3.2 Stimulation S-FMLP 147
12.3.3.3 Stimulation S-TNF/FMLP 148
12.3.3.4 Stimulation S-PMA 148
12.4 Gruppen und Mehrfachvergleiche 149
12.4.1 Patientendaten 149
12.4.2 Messwerte 150
12.4.2 1 Stimulation S-NULL 150
12.4.2.2 Stimulation S-FMLP 152
12.4.2.3 Stimulation S-TNF/FMLP 154
5
Inhaltsverzeichnis
12.4.2.4 Stimulation S-PMA 156
12.4.3 Transmyokardialer Gradient 157
12.4.3.1 Stimulation S-NULL 157
12.4.3.2 Stimulation S-FMLP 157
12.4.3.3 Stimulation S-TNF/FMLP 158
12.4.3.4 Stimulation S-PMA 158
12.4 4 Korrelationen 159
12.4.4.1 Narkoseeinfluss 159
12.4.4.1.1 Anteil an aktivierten Zellen 159
12.4.4.1.2 Mittlere Fluoreszenz 160
12.4.5 Einfluss der EF 161
12.4.5.1 Coronar-sinus Proben nach T2 161
12.4.5.2 Coronar-sinus Proben nach T3 161
12.4.6 Gradient 162
12.4.6.1 Anteil an aktivierten Zellen 162
12.4.6.2 Mittlere Fluoreszenz 164
13 LEBENSLAUF 169
6
Tabellenverzeichnis
8 Tabellenverzeichnis
Tabelle 2-1 Zuordnung der Gruppen zu den unterschiedlichen Kardioplegieverfahren 16
Tabelle 2-2 Abnahmezeitpunkte der Blutproben 18
Tabelle 2-3 Zeitliche Abfolge der Blutentnahmen 18
Tabelle 2-4 Zusammensetzung Cardioplegin 22
Tabelle 2-5 Zusammensetzung Custodiol-Lösung 22
Tabelle 2-6 Zusammensetzung Blutkardioplegie nach Buckberg zur kalten Induktion 23
Tabelle 2-7 Zusammensetzung Blutkardioplegie nach Buckberg zur kalten Reinfusion
24
Tabelle 2-8 Hot-Shot-Lösung zur warmen Reperfusion 25
Tabelle 2-9 Inkubationsschema Oxidativer Burst 36
Tabelle 2-10 Programmierung Durchflusszytometer 37
Tabelle 2-11 Eigenschaften der Zweiparameter-Histogramme 38
Tabelle 2-12 Parameter der Gating-Fenster 38
Tabelle 3-1 Demografische Daten, operative und klinische Parameter des untersuchten
Patientenkollektives 43
117
Abbildungsverzeichnis
9 Abbildungsverzeichnis
Abbildung 1-1 Freisetzung reaktiver Agenzien aus Granulozyten 10
Abbildung 1-2 Reaktionspfad NO-Synthase und NADPH-Oxidase 11
Abbildung 2-1 Schema warme Reperfiision Hot-Shot [2] 24
Abbildung 2-2 Arbeitsplatz Durchflusszytometrie 30
Abbildung 2-3 Flüssigkeitssystem eines Durchflusszytometers 31
Abbildung 2-4 Detektionsschema eines Durchflusszytometers 32
Abbildung 2-5 Oxidation von Dihydrorhodamin-123 zu Rhodamin-123 33
Abbildung 2-6 Ficoll-Gradient zur Separation der Leukozyten 35
Abbildung 2-7 Histogramme der durchflusszytometrischen Messung 39
Abbildung 2-8 Zwei-Parameter-Histogramm für Leerweit und Stimulation mit FMLP,
TNF-a + FMLP bzw. PMA für jeden Messpunkt 41
Abbildung 3-1 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen Probe (A1) vor Beginn
der extrakorporalen Zirkulation(Tl) ohne Stimulation (S-NULL) und nach
Stimulation mit FMLP (S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 45
Abbildung 3-2 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der coronar-sinus Proben vor Beginn der
extrakoporalen Zirkulation (CS1) ohne Stimulation (S-NULL) und nach
Stimulation mit FMLP (S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 46
Abbildung 3-3 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Probe (AI) vor Beginn der
extrakorporalen Zirkulation(Tl) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation
mit FMLP (S-FMLP) und TNF, FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 47
Abbildung 3-4 Mittlere Fluoreszenz der coronar-sinus Proben (CS1) vor Beginn der
extrakoporalen Zirkulation (Tl) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation
mit FMLP (S-FMLP), TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 48
Abbildung 3-5 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen Probe (A2) nach
Ischämiezeit (T2) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit FMLP (S-
FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 49
Abbildung 3-6 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der coronar-sinus- Probe (CS2) nach
Ischämiezeit (T2) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit FMLP (S-
FMLP) sowie TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 50
118
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-7 Mittiere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Probe (A2) nach Ischämiezeit
(T2) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit FMLP (S-FMLP)
sowie TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 51
Abbildung 3-8 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Proben (A2) nach
Ischämiezeit (T2) ohne Stimulation (S-NULL) (p = 0,049) 52
Abbildung 3-9 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Proben (A2) nach
Ischämiezeit (T2) und Stimulation mit FMLP (S-FMLP (p = 0,026) 52
Abbildung 3-10 Mittlere Fluoreszenz (MF) der coronar-sinus Proben (CS2) nach
Ischämiezeit (T2) und Stimulation mit FMLP (S-FMLP), mit TNF/FMLP (S-
TNF/FMLP), PMA (S-PMA) und ohne Stimulation (S-NULL) 53
Abbildung 3-11 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der arteriellen Probe (A3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) sowie Stimulation mit FMLP
(S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 54
Abbildung 3-12 Anteil aktivierter Zellen (AAZ) der coronar-sinus Probe (CS3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) und nach Stimulation mit
FMLP (S-FMLP) und TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) 55
Abbildung 3-13 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen Probe (A3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) sowie nach Stimulation mit
FMLP (S-FMLP) und TNF, FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 56
Abbildung 3-14 Mittlere Fluoreszenz (MF) der coronar-sinus Proben (CS3) nach
Reperfusionszeit (T3) ohne Stimulation (S-NULL) sowie nach Stimulation mit
FMLP (S-FMLP) und TNF, FMLP (S-TNF/FMLP) und PMA (S-PMA) 57
Abbildung 3-15 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
II ohne Stimulation (S-NULL), dargestellt ist AAZ vor Narkose (A0) gegen AAZ
vorEKZ(Al) 59
Abbildung 3-16 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
III ohne Stimulation (S-NULL), dargestellt ist AAZ vor Narkose (A0) gegen AAZ
vorEKZ(Al) 59
Abbildung 3-17 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
I mit FMLP-Stimulation (S-FMLP), dargestellt ist AAZ vor Narkose (A0) gegen
AAZvorEKZ(Al) 60
119
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-18 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der Gruppe
II mit FMLP-Stimulation (S-FMLP), dargestellt ist AAZ vor Narkose (AO) gegen
AAZvorEKZ(Al) 60
Abbildung 3-19 20 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf den AAZ in der
Gruppe III mit FMLP-Stimulation (S-FMLP), dargestellt ist AAZ vor Narkose
(AO) gegen AAZ vor EKZ (AI) 60
Abbildung 3-21 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe
III ohne Stimulation (S-NULL), dargestellt ist MF vor Narkose (AO) gegen AAZ
vor EKZ (AI) 61
Abbildung 3-22 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe I
unter Stimulation mit TNF und FMLP (S-TNF/FMLP), dargestellt ist MF vor
Narkose (AO) gegen AAZ vor EKZ (AI) 62
Abbildung 3-23 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe II
unter Stimulation mit TNF und FMLP (S-TNF/FMLP), dargestellt ist MF vor
Narkose (AO) gegen AAZ vor EKZ (AI) 62
Abbildung 3-24 Korrelationsanalyse des Narkoseeinflusses auf die MF in der Gruppe II
unter Stimulation mit PMA (S-PMA), dargestellt ist MF vor Narkose (AO) gegen
AAZ vor EKZ (AI) 63
Abbildung 3-25 Korrelation zwischen der EF und der mittleren Fluoreszenz (MF) der
arteriellen Proben nach Ischämie (A2) in Gruppe I und Stimulation mit PMA (S-
PMA) 64
Abbildung 3-26 Korrelation zwischen der EF und der mittleren Fluoreszenz (MF) der
coronarsinus Proben nach Ischämie (CS2) in Gruppe I und Stimulation mit PMA
(S-PMA) 64
Abbildung 3-27 Korrelation zwischen der EF und der mittleren Fluoreszenz (MF) der
coronarsinus Proben nach Reperfusion (CS3) in Gruppe I und Stimulation mit
PMA (S-PMA) 65
Abbildung 3-28 Anteil der aktivierten Zellen (AAZ) in den arteriellen (A0-A3) und
coronar-sinus-Proben (CS1-CS3) ohne Stimulation (S-NULL) im zeitlichen
Verlauf 66
Abbildung 3-29 Anteil der aktivierten Zellen (AAZ) in den arteriellen (A0-A3) und
coronar-sinus-Proben (CS1-CS3) unter Stimulation mit FMLP (S-FMLP) im
zeitlichen Verlauf 67
120
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-30 Anteil der aktivierten Zellen (AAZ) in den arteriellen (A0-A3) und
coronar-sinus-Proben (CS1-CS3) unter Stimulation mit TNF-a+FMLP (S-
TNF/FMLP) im zeitlichen Verlauf 68
Abbildung 3-31 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben ohne Stimulation (S-NULL im zeitlichen Verlauf 69
Abbildung 3-32 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben unter Stimulation mit FMLP (S-FMLP) im zeitlichen Verlauf
70
Abbildung 3-33 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CS1-CS3) Proben unter Stimulation mit TNF und FMLP (S-TNF/FMLP) im
zeitlichen Verlauf 71
Abbildung 3-34 Mittlere Fluoreszenz (MF) der arteriellen (A0-A3) und coronar-sinus
(CSI-CS3) Proben unter Stimulation mit PMA (S-PMA) im zeitlichen Verlauf 72
Abbildung 3-35 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie T2 ohne
Stimulation (S-NULL) Gruppe I 73
Abbildung 3-36 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion T3 ohne
Stimulation (S-NULL) Gruppe I 74
Abbildung 3-37 38 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ)
in den arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe I 74
Abbildung 3-39 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), Stimulation
FMLP (S-FMLP), Gruppe II 75
Abbildung 3-40 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe I 75
Abbildung 3-41 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe II 76
121
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-42 Korrelationsanalyse zwischen dem Anteil aktivierter Zellen (AAZ) in
den arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),
Stimulation FMLP (S-FMLP), Gruppe III 76
Abbildung 3-43 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), keine
Stimulation (S-NULL), Gruppe I 77
Abbildung 3-44 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), keine
Stimulation (S-NULL), Gruppe II 77
Abbildung 3-45 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3), keine
Stimulation (S-NULL), Gruppe I 78
Abbildung 3-46 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), Stimulation mit
FMLP (S-FMLP), Gruppe I 78
Abbildung 3-47 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2), Stimulation mit
FMLP (S-FMLP), Gruppe II 79
Abbildung 3-48 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),),
Stimulation mit FMLP (S-FMLP), Gruppe I 80
Abbildung 3-49 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3),),
Stimulation mit FMLP (S-FMLP), Gruppe II 80
Abbildung 3-50 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),), Stimulation
mit TNF-a und FMLP (S-TNF/FMLP), Gruppe I 81
Abbildung 3-51 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),), Stimulation
mit TNF-a und FMLP (S-TNF/FMLP), Gruppe II 81
Abbildung 3-52 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A2 und coronar-sinus Proben CS2 nach Ischämie (T2),), Stimulation
mit TNF-a und FMLP (S-TNF/FMLP), Gruppe II 82
122
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 3-53 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3), Stimulation
mit PMA (S-PMA), Gruppe I 82
Abbildung 3-54 Korrelationsanalyse zwischen der Mittleren Fluoreszenz (MF) in den
arteriellen A3 und coronar-sinus Proben CS3 nach Reperfusion (T3), Stimulation
mit PMA (S-PMA), Gruppe II 83
Abbildung 3-55 Statistisch signifikante Korrelationen des Anteils an aktivierten Zellen
A3 zu CS3 am Ende der Reperfusion (T3) mit FMLP-Stimulation (S-FMLP) in
Gruppe I - III 84
Abbildung 3-56 Statistisch signifikante Korrelationen des Anteils an aktivierten Zellen
A3 zu CS3 am Ende der Ischämiezeit (T2) mit TNF-a und FMLP -Stimulation (S-
TNF/FMLP) in Gruppe I - III 85
Abbildung 3-57 Transmyokardialer Gradienten für den Anteil aktivierter Zellen (AAZ)
sowie die mittlere Fluoreszenz(MF) zum Zeitpunkt T2 (Ischämiephase) mit
unterschiedlichen Stimulationsverfahren (S-NULL, S-FMLP, S-TNF/FMLP, S-
PMA) aller Gruppen I-III 87
Abbildung 3-58 Transmyokardialer Gradienten für den Anteil aktivierter Zellen (AAZ)
sowie die mittlere Fluoreszenz(MF) zum Zeitpunkt T3 (Reperfusionsphase) mit
unterschiedlichen Stimulationsverfahren (S-NULL, S-FMLP, S-TNF/FMLP, S-
PMA) aller Gruppen I-III 89
Abbildung 4-1 PECAM-1 im Entzündungsprozess[74] 109
123 |
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