TLR4-Rezeptor-vermittelter Einfluß von Endotoxin auf das Verkürzungsverhalten isolierter Kardiomyozyten der Maus:
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2006
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Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 7
2 Material und Methoden 12
2.1 Versuchstier 12
2.2 Gewinnung isolierter Kardiomyozyten 13
2.3 Zellkultur 16
2.4 Meßstand und Meßmethode 17
2.4.1 Versuchsstand 17
2.4.1.1 Inverses Mikroskop 17
2.4.1.2 Versuchskammer und Perfusion 17
2.4.1.3 Externe Stimulation 18
2.4.2 Sarkomerlängenmessung 19
2.5 Durchführung der Messung 21
2.5.1 Anheftung mit Laminin 21
2.5.2 Meßprotokolle 22
2.5.2.1 Einfluß der extrazellulären Ca2*-Konzentration 22
2.5.2.2 Untersuchung kultivierter Myozyten 23
2.6 Auswertung 23
2.6.1 Sarkomervcrkürzung im Gleichgewicht 24
2.6.2 Herztreppe nach Stimulationspause 26
2.7 Statistik 27
3 Ergebnisse 28
3.1 Einfluß einer veränderten extrazellulären Ca2*-Konzentration auf das
Verkürzungsverhalten ^8
3.1.1 Verkürzungen im Gleichgewicht
3.1.2 Auswirkungen auf die I Icrztreppe
3.2 Verkürzungsverhalten der kultivierten Myozyten
3.2.1 C3H/IIeN und C3H/HeJ im Gleichgewicht 33
3.2.1.1 Verkürzungsamplitude
6
3.2.1.2 Verkürzungsgeschwindigkeit 34
3.2.1.3 Relaxationsgeschwindigkeit 35
3.2.1.4 Verkürzungsdauer 37
3.2.1.5 Veränderungen der Ruhesarkomerlänge 3 8
3.2.2 Ergebnisse der kompletten Reizserien 38
3.2.2.1 Herztreppe der Gruppen N2-Kul undN2-LPS 39
3.2.2.2 Herztreppe beiC3H/HeJ-Tieren mit und ohne
LPS-Stimulation 40
4 Diskussion 42
4.1 Validität der Methoden 42
4.2 Auswirkungen unterschiedlicher extrazellulärer Kalziumkonzentrationen 45
4.3 Funktion von TLR4 an isolierten kultivierten Kardiomyozyten 49
5 Zusammenfassung 56
6 Veröffentlichungen 58
7 Literaturverzeichnis 59
8 Anhang 73
8.1 Zusammensetzung der Lösungen und Medien 73
8.2 Tabellarische Aufstellung der Meßwerte 74
8.3 Abkürzungsverzeichnis 81
9 Danksagung 83
10 Lebenslauf 85
|
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5
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 7
2 Material und Methoden 12
2.1 Versuchstier 12
2.2 Gewinnung isolierter Kardiomyozyten 13
2.3 Zellkultur 16
2.4 Meßstand und Meßmethode 17
2.4.1 Versuchsstand 17
2.4.1.1 Inverses Mikroskop 17
2.4.1.2 Versuchskammer und Perfusion 17
2.4.1.3 Externe Stimulation 18
2.4.2 Sarkomerlängenmessung 19
2.5 Durchführung der Messung 21
2.5.1 Anheftung mit Laminin 21
2.5.2 Meßprotokolle 22
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2.5.2.2 Untersuchung kultivierter Myozyten 23
2.6 Auswertung 23
2.6.1 Sarkomervcrkürzung im Gleichgewicht 24
2.6.2 Herztreppe nach Stimulationspause 26
2.7 Statistik 27
3 Ergebnisse 28
3.1 Einfluß einer veränderten extrazellulären Ca2*-Konzentration auf das
Verkürzungsverhalten ^8
3.1.1 Verkürzungen im Gleichgewicht
3.1.2 Auswirkungen auf die I Icrztreppe
3.2 Verkürzungsverhalten der kultivierten Myozyten
3.2.1 C3H/IIeN und C3H/HeJ im Gleichgewicht 33
3.2.1.1 Verkürzungsamplitude
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3.2.1.4 Verkürzungsdauer 37
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3.2.2 Ergebnisse der kompletten Reizserien 38
3.2.2.1 Herztreppe der Gruppen N2-Kul undN2-LPS 39
3.2.2.2 Herztreppe beiC3H/HeJ-Tieren mit und ohne
LPS-Stimulation 40
4 Diskussion 42
4.1 Validität der Methoden 42
4.2 Auswirkungen unterschiedlicher extrazellulärer Kalziumkonzentrationen 45
4.3 Funktion von TLR4 an isolierten kultivierten Kardiomyozyten 49
5 Zusammenfassung 56
6 Veröffentlichungen 58
7 Literaturverzeichnis 59
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