Morphologische und molekularbiologische Untersuchungen (PCR und REA der 5,8S rRNA-Region) an Trichomonas gallinae und Tetratrichomonas gallinarum verschiedener Vogelarten:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Gießen
DVG Service
2005
|
Ausgabe: | 1. Aufl. |
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Beschreibung: | Paralleltitel: Morphological and molecularbiological investigations (PCR and REA of the 5,8S rRNA-region) of Trichomonas gallinae and Tetratrichomonas gallinarum of different species of birds |
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adam_text | AUS DER KLINIK FUER VOEGEL, REPTILIEN, AMPHIBIEN UND FISCHE DER JUSTUS
LIEBIG UNIVERSITAET GIESSEN BETREUER: PROF. DR. E. F. KALETA
MORPHOLOGISCHE UND MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN (PCR UND REA DER
5,8S RRNA-REGION) AN TRICHOMONAS GALLINAE UND TETRATRICHOMONAS
GALLINARUM VERSCHIEDENER VOGELARTEN INAUGURAL-DISSERTATION ZUR ERLANGUNG
DES DOKTORGRADES BEIM FACHBEREICH VETERINAERMEDIZIN DER
JUSTUS-LIEBIG-UNIVERSITAET GIESSEN EINGEREICHT VON BIRGIT HEIDI MARION
KNISPEL TIERAERZTIN AUS KOBLENZ GIESSEN 2005 INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS ABKUERZUNGEN 1 EINLEITUNG 1 2 LITERATURUEBERSICHT 3 2.1
TRICHOMONAS SPP. 3 2.1.1 TAXONOMIE VON TRICHOMONAS SPP. 3 2.1.2
TERMINOLOGIE DER ERKRANKUNGEN DURCH TRICHOMONADEN 6 2.1.3 VORKOMMEN VON
TRICHOMONADEN 6 2.1.3.1 VORKOMMEN BEIM VOGEL 6 2.1.3.2 VORKOMMEN BEIM
SAEUGETIER 8 2.1.3.3 VORKOMMEN BEIM MENSCH 9 2.1.4 MORPHOLOGIE DER
TRICHOMONADEN 9 2.1.5 AUFBAU DER TRICHOMONADEN 10 2.1.6 VERMEHRUNG DER
TRICHOMONADEN 11 2.2 TRICHOMONOSIS DER VOEGEL 1 2 2.2.1 EPIDEMIOLOGIE DER
TRICHOMONOSIS 12 2.2.2 PATHOGENESE DER TRICHOMONOSIS 14 2.2.3
IMMUNOLOGIE DER TRICHOMONOSIS 16 2.2.4 KLINISCH-MANIFESTE ERKRANKUNG
TRICHOMONOSIS 17 II INHALTSVERZEICHNIS 2.2.4.1 TRICHOMONOSIS DER TAUBE
17 2.2.4.2 TRICHOMONOSIS DES GREIFVOGELS 18 2.2.4.3 TRICHOMONOSIS DES
WELLENSITTICHS 18 2.2.4.4 TRICHOMONOSIS DES HUHNS, DER PUTE UND DER ENTE
19 2.2.4.5 TRICHOMONOSIS DES FASANS UND DER WILDENTE 19 2.2.5 PATHOLOGIE
DER TRICHOMONOSIS 20 2.2.5.1 PATHOLOGIE BEI TAUBE, GREIFVOGEL UND
WELLENSITTICH 20 2.2.5.2 PATHOLOGIE BEI HUHN, PUTE UND ENTE 22 2.2.6
HISTOPATHOLOGIE DER TRICHOMONOSIS 23 2.3 NACHWEIS- UND
DIFFERENZIERUNGSMOEGLICHKEITEN 25 2.3.1 DIAGNOSTIK DER TRICHOMONOSIS 25
2.3.2 DIFFERENTIALDIAGNOSEN DER TRICHOMONOSIS 28 2.3.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 28 2.3.3.1 POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR)
30 2.3.3.1.1 RRNA 30 2.3.3.2 RESTRIKTIONSENZYMANALYSE (REA) 32 2.3.3.3
RANDOM AMPLIFIED POLYMORPHIC DNA (RAPD) 32 2.3.3.4
PULSFELDGELELEKTROPHORESE (PFGE) 32 2.4 THERAPIE 33 INHALTSVERZEICHNIS
III 2.4.1 CHEMOTHERAPEUTIKA GEGEN TRICHOMONOSIS 33 2.4.2 CHEMOPROPHYLAXE
GEGEN TRICHOMONOSIS 34 2.5 FRAGESTELLUNGEN DER EIGENEN UNTERSUCHUNGEN 35
3 MATERIAL UND METHODEN 37 3.1 MATERIAL 37 3.1.1 HERKUNFT DER ISOLATE 38
3.1.2 MEDIEN, LOESUNGEN UND REAGENZIEN 47 3.1.3 ANZUCHTMEDIEN FUER
TRICHOMONADEN 52 3.1.3.1 DIAMOND-TYM-MEDIUM 52 3.1.3.2
HUEHNER-EMBRYO-FIBROBLASTEN 53 3.1.3.3 HUEHNER-EMBRYO-LEBER-ZELLEN 53
3.1.4 DNA-PRAEPARATIONS KIT 54 3.1.5 OLIGONUKLEOTIDPRIMER UND
THERMOCYCLER TEMPERATURPROGRAMM 54 3.1.6 RESTRIKTIONSENZYME 56 3.1.7
GERAETE UND VERBRAUCHSMATERIALIEN 57 3.2 METHODEN 59 3.2.1 PROBENENTNAHME
59 3.2.2 ANZUECHTUNG UND KONSERVIERUNG DER ISOLATE 59 3.2.3 UEBERPRUEFUNG
DER BEWEGLICHKEIT 60 IV INHALTSVERZEICHNIS 3.2.4 FAERBERISCHE DARSTELLUNG
DER TRICHOMONADEN 60 3.2.4.1 DAUERPRAEPARAT OHNE VORHERIGE FIXIERUNG 60
3.2.4.2 DAUERPRAEPARAT MIT VORHERIGER FIXIERUNG 61 3.2.5 PCR-VERMITTELTE
SPEZIESIDENTIFIZIERUNG 61 3.2.5.1 POLYMERASEKETTENREAKTION 61 3.2.5.2
PRAEPARATION DER PROTOZOEN-DNA 62 3.2.5.3 DURCHFUEHRUNG DER PCR 64 3.2.5.4
RESTRIKTIONSVERDAU 65 3.2.5.5 AGAROSEGELELEKTROPHORESE 65 3.2.5.6
ETHIDIUMBROMIDFAERBUNG UND DOKUMENTATION 67 3.2.6 TYPISIERUNGSVERFAHREN
68 3.2.6.1 RAPD 68 3.2.6.1.1 DNA-PRAEPARATION UND DURCHFUEHRUNG DER PCR 68
3.2.6.1.2 AGAROSEGELELEKTROPHORESE, FAERBUNG UND DOKUMENTATION 68 3.2.6.2
PULSFELDGELELEKTROPHORESE 69 3.2.6.2.1 DNA-PRAEPARATION 69 3.2.6.2.2
RESTRIKTIONSVERDAU 69 3.2.6.2.3 PULSFELDGELELEKTROPHORESE 70 3.2.6.2.4
FAERBUNG UND DOKUMENTATION 70 INHALTSVERZEICHNIS 4 ERGEBNISSE 71 4.1
KLINISCHE BEFUNDE 71 4.2 PATHOLOGISCHE BEFUNDE 72 4.3 BEFUNDE BEIM
NATIVPRAEPARAT 73 4.4 BEFUNDE BEIM FIXIERTEN UND GEFAERBTEN PRAEPARAT 73
4.5 FOLGERUNGEN AUS DER MORPHOLOGIE FUER DIE SYSTEMATIK 77 4.6 ANZUCHT
VON TRICHOMONADEN 78 4.7 KONSERVIERUNG ANGEZUECHTETER TRICHOMONADEN 78
4.8 SPEZIESIDENTIFIZIERUNG 79 4.8.1 AMPLIFIZIERUNG DES 5,8S
RRNA-ABSCHNITTS 79 4.8.2 NACHWEIS VON GENPOLYMORPHISMEN MITTELS
ENZYMVERDAU 79 4.8.2.1 BSELL 80 4.8.2.2 MSEL 83 4.8.2.3 TAQL 86 4.8.2.4
TASL 88 4.8.2.5 VSPL 91 4.9 TYPISIERUNG 93 4.9.1 TYPISIERUNG DURCH
RAPD-PCR 93 4.9.2 TYPISIERUNG DURCH PULSFELDGELELEKTROPHORESE 94 VI
INHALTSVERZEICHNIS 5 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.5.1 5.5.1.1 5.5.1.1.1
5.5.1.1.2 5.5.1.1.3 5.5.2 5.6 5.7 6 7 8 DISKUSSION KLINIK DER
TRICHOMONOSE IDENTIFIZIERUNG DER TRICHOMONADEN DIFFERENZIERUNG VON
TRICHOMONADEN ANZUCHT UND KONSERVIERUNG VON TRICHOMONADEN
MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN PCR REA BEURTEILUNG NACH ENZYMEN
BEURTEILUNG NACH VOGELGRUPPEN FOLGERUNG SEQUENZIERUNG FOLGERUNGEN AUS
DEN MORPHOLOGISCHEN UND GENETISCHEN BEFUNDEN FUER DIE SYSTEMATIK
ABSCHLUSSBEMERKUNGEN ZUSAMMENFASSUNG SUMMARY LITERATURVERZEICHNIS
DANKSAGUNG 95 95 97 97 98 101 101 101 102 103 106 109 110 112 113 115
116
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AUS DER KLINIK FUER VOEGEL, REPTILIEN, AMPHIBIEN UND FISCHE DER JUSTUS
LIEBIG UNIVERSITAET GIESSEN BETREUER: PROF. DR. E. F. KALETA
MORPHOLOGISCHE UND MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN (PCR UND REA DER
5,8S RRNA-REGION) AN TRICHOMONAS GALLINAE UND TETRATRICHOMONAS
GALLINARUM VERSCHIEDENER VOGELARTEN INAUGURAL-DISSERTATION ZUR ERLANGUNG
DES DOKTORGRADES BEIM FACHBEREICH VETERINAERMEDIZIN DER
JUSTUS-LIEBIG-UNIVERSITAET GIESSEN EINGEREICHT VON BIRGIT HEIDI MARION
KNISPEL TIERAERZTIN AUS KOBLENZ GIESSEN 2005 INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS ABKUERZUNGEN 1 EINLEITUNG 1 2 LITERATURUEBERSICHT 3 2.1
TRICHOMONAS SPP. 3 2.1.1 TAXONOMIE VON TRICHOMONAS SPP. 3 2.1.2
TERMINOLOGIE DER ERKRANKUNGEN DURCH TRICHOMONADEN 6 2.1.3 VORKOMMEN VON
TRICHOMONADEN 6 2.1.3.1 VORKOMMEN BEIM VOGEL 6 2.1.3.2 VORKOMMEN BEIM
SAEUGETIER 8 2.1.3.3 VORKOMMEN BEIM MENSCH 9 2.1.4 MORPHOLOGIE DER
TRICHOMONADEN 9 2.1.5 AUFBAU DER TRICHOMONADEN 10 2.1.6 VERMEHRUNG DER
TRICHOMONADEN 11 2.2 TRICHOMONOSIS DER VOEGEL 1 2 2.2.1 EPIDEMIOLOGIE DER
TRICHOMONOSIS 12 2.2.2 PATHOGENESE DER TRICHOMONOSIS 14 2.2.3
IMMUNOLOGIE DER TRICHOMONOSIS 16 2.2.4 KLINISCH-MANIFESTE ERKRANKUNG
TRICHOMONOSIS 17 II INHALTSVERZEICHNIS 2.2.4.1 TRICHOMONOSIS DER TAUBE
17 2.2.4.2 TRICHOMONOSIS DES GREIFVOGELS 18 2.2.4.3 TRICHOMONOSIS DES
WELLENSITTICHS 18 2.2.4.4 TRICHOMONOSIS DES HUHNS, DER PUTE UND DER ENTE
19 2.2.4.5 TRICHOMONOSIS DES FASANS UND DER WILDENTE 19 2.2.5 PATHOLOGIE
DER TRICHOMONOSIS 20 2.2.5.1 PATHOLOGIE BEI TAUBE, GREIFVOGEL UND
WELLENSITTICH 20 2.2.5.2 PATHOLOGIE BEI HUHN, PUTE UND ENTE 22 2.2.6
HISTOPATHOLOGIE DER TRICHOMONOSIS 23 2.3 NACHWEIS- UND
DIFFERENZIERUNGSMOEGLICHKEITEN 25 2.3.1 DIAGNOSTIK DER TRICHOMONOSIS 25
2.3.2 DIFFERENTIALDIAGNOSEN DER TRICHOMONOSIS 28 2.3.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 28 2.3.3.1 POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR)
30 2.3.3.1.1 RRNA 30 2.3.3.2 RESTRIKTIONSENZYMANALYSE (REA) 32 2.3.3.3
RANDOM AMPLIFIED POLYMORPHIC DNA (RAPD) 32 2.3.3.4
PULSFELDGELELEKTROPHORESE (PFGE) 32 2.4 THERAPIE 33 INHALTSVERZEICHNIS
III 2.4.1 CHEMOTHERAPEUTIKA GEGEN TRICHOMONOSIS 33 2.4.2 CHEMOPROPHYLAXE
GEGEN TRICHOMONOSIS 34 2.5 FRAGESTELLUNGEN DER EIGENEN UNTERSUCHUNGEN 35
3 MATERIAL UND METHODEN 37 3.1 MATERIAL 37 3.1.1 HERKUNFT DER ISOLATE 38
3.1.2 MEDIEN, LOESUNGEN UND REAGENZIEN 47 3.1.3 ANZUCHTMEDIEN FUER
TRICHOMONADEN 52 3.1.3.1 DIAMOND-TYM-MEDIUM 52 3.1.3.2
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THERMOCYCLER TEMPERATURPROGRAMM 54 3.1.6 RESTRIKTIONSENZYME 56 3.1.7
GERAETE UND VERBRAUCHSMATERIALIEN 57 3.2 METHODEN 59 3.2.1 PROBENENTNAHME
59 3.2.2 ANZUECHTUNG UND KONSERVIERUNG DER ISOLATE 59 3.2.3 UEBERPRUEFUNG
DER BEWEGLICHKEIT 60 IV INHALTSVERZEICHNIS 3.2.4 FAERBERISCHE DARSTELLUNG
DER TRICHOMONADEN 60 3.2.4.1 DAUERPRAEPARAT OHNE VORHERIGE FIXIERUNG 60
3.2.4.2 DAUERPRAEPARAT MIT VORHERIGER FIXIERUNG 61 3.2.5 PCR-VERMITTELTE
SPEZIESIDENTIFIZIERUNG 61 3.2.5.1 POLYMERASEKETTENREAKTION 61 3.2.5.2
PRAEPARATION DER PROTOZOEN-DNA 62 3.2.5.3 DURCHFUEHRUNG DER PCR 64 3.2.5.4
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ETHIDIUMBROMIDFAERBUNG UND DOKUMENTATION 67 3.2.6 TYPISIERUNGSVERFAHREN
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FAERBUNG UND DOKUMENTATION 70 INHALTSVERZEICHNIS 4 ERGEBNISSE 71 4.1
KLINISCHE BEFUNDE 71 4.2 PATHOLOGISCHE BEFUNDE 72 4.3 BEFUNDE BEIM
NATIVPRAEPARAT 73 4.4 BEFUNDE BEIM FIXIERTEN UND GEFAERBTEN PRAEPARAT 73
4.5 FOLGERUNGEN AUS DER MORPHOLOGIE FUER DIE SYSTEMATIK 77 4.6 ANZUCHT
VON TRICHOMONADEN 78 4.7 KONSERVIERUNG ANGEZUECHTETER TRICHOMONADEN 78
4.8 SPEZIESIDENTIFIZIERUNG 79 4.8.1 AMPLIFIZIERUNG DES 5,8S
RRNA-ABSCHNITTS 79 4.8.2 NACHWEIS VON GENPOLYMORPHISMEN MITTELS
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RAPD-PCR 93 4.9.2 TYPISIERUNG DURCH PULSFELDGELELEKTROPHORESE 94 VI
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TRICHOMONOSE IDENTIFIZIERUNG DER TRICHOMONADEN DIFFERENZIERUNG VON
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MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN PCR REA BEURTEILUNG NACH ENZYMEN
BEURTEILUNG NACH VOGELGRUPPEN FOLGERUNG SEQUENZIERUNG FOLGERUNGEN AUS
DEN MORPHOLOGISCHEN UND GENETISCHEN BEFUNDEN FUER DIE SYSTEMATIK
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