Verhalten epidermaler Zellen in Spalthauttransplantaten nach UVB-Bestrahlung:
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2004
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|---|---|
| adam_text | Inhalt
1. Einleitung 8
1.1. Einführung zum Thema: Spalthaut 8
1.1.1. Das Spalthauttransplantat 8
1.1.2. Vor-und Nachteile des Spalthauttransplantates 9
1.1.3. Die Transplantatgewinnung 10
1.1.4. Die Fixierung des Spalthauttransplantates 12
1.1.5. Die Einheilung des Spalthauttransplantates 13
1.1.6. Die Heilung und Versorgung der Entnahmestelle 14
1.1.7. Unterschiede zwischen Vollhaut- und Spalthauttransplantaten
15
1.2. Einführung zum Thema: Ultraviolette Strahlung 17
1.2.1. Physikalische Grundlagen 17
1.2.2. UVA-Strahlung und ihre Folgen 18
1.2.3. PUVA (Psoralen und UVA-Strahlung) 18
1.2.4. UVB-Strahlung und ihre Folgen 19
1.2.5. UVC-Strahlung und ihre Folgen 20
1.2.6. UV-induzierte Lichtdermatosen 20
1.2.6.1. Das Erythem, MED 20
1.2.6.2. Pigmentierung 21
1.2.6.3. Lichtschwiele 23
1.2.7. UV-induzierte Hautkarzinogenese 23
1.2.8. Lichttherapie 25
1.2.9. Fragestellung 25
2. Material und Methode 27
2.1. Patienten und Methoden 27
2.1.1. Patientenkollektiv 27
2.1.2. Patientenübersicht: 28
2.1.3.1. Die Entnahme und Fixation der Spalthauttransplantate. 29
2.1.3.2. Entwässern der Präparate 29
2.1.3.3. Paraffineinbettung 30
2.1.3.4. Entparaffinierung und Färbung 30
2.2. Die Immunmarkierung 31
4
2.2.1. Prinzip 31
2.2.2. Indirekte enzymatische Immunmarkierung 32
2.3. Antikörper 33
2.3.1. HMB 45 34
2.3.2. MIB 1 34
2.3.3. Bei 2 35
2.4. Protokoll der APAAP- Methode 35
2.5. Haemalaun-Färbung 36
2.6. Rezepte 36
2.6.1. Tris-Puffer 36
2.6.1.1. Stammlösung 36
2.6.1.2. Gebrauchslösung 37
2.6.2. BSA-Puffer 37
2.6.3. Propandiol-Stammpuffer 37
2.6.4. Antikörper- Verdünnungen 37
2.6.4.1. Primärer Antikörper 37
2.6.4.2. Brückenantikörper zur APAAP-Markierung 37
2.6.4.3. APAAP-Komplexe 38
2.6.4.4. APAAP-Substrat (Sparrezept) 38
2.7. Auswertung der Präparate 38
2.8. Bearbeitung der ausgezählten Ergebnisse 40
2.9. Darstellung der Ergebnisse 40
3. Ergebnisse 41
3.1. Befunde der Histopathologie 41
3.2. Auswertung der Gesamtzellzahl im Epithel 42
3.2.1. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper HMB 45 im
Epithel 42
3.2.2. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper MIB 1 im
Epithel 42
3.2.3. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper Bei 2 im
Epithel 42
3.3. Auswertung der Gesamtzellzahl im Corium 43
5
3.3.1. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper HMB 45 im
Corium 43
3.3.2. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper MIB 1 im
Corium 43
3.3.3. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper Bei 2 im
Corium 43
3.4. Messung der Spalthautdicke vor und nach UVB 44
3.4.1. Messung der Epidermisdicke 44
3.4.2. Messung der Retedicke 46
3.5. Antikörper 47
3.5.1. Auswertung des Antikörpers HMB 45 47
3.5.1.1. HMB 45 -positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Epithel 47
3.5.1.2. Prozentualer Anteil HMB 45-positiver Zellen im Epithel. 48
3.5.1.3. HMB 45-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Corium 49
3.5.1.4. Prozentualer Anteil HMB 45-positiver Zellen im Corium
50
3.5.2. Auswertung des Antikörpers MIB 1 51
3.5.2.1. MIB 1-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Epithel 51
3.5.2.2. Prozentualer Anteil MIB 1-positiver Zellen im Epithel 52
3.5.2.3. MIB 1-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Corium 53
3.5.2.4. Prozentualer Anteil MIB 1-positiver Zellen im Corium.... 54
3.5.3. Auswertung des Antikörpers Bei 2 56
3.5.3.1. Bei 2 -positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Epithel 56
3.5.3.1. Prozentualer Anteil Bei 2-positiver Zellen im Epithel 57
3.5.3.3. Bei 2-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Corium 57
3.5.3.4. Prozentualer Anteil Bei 2-positiver Zellen im Corium 59
4. Diskussion 60
4.1. Verwendete Methode 60
6
4.1.1. Patienten 60
4.1.2. Auswahl der Antikörper für die immunhistochemische
Markierung 60
4.1.3. Auswertung der Präparate 61
4.2. Veränderungen der Haut nach UVB-Bestrahlung 62
4.3. Photokarzinogenese 63
4.3.1. Sonnenbrandzellen als Apoptosezellen 63
4.3.2. Apoptose 65
4.4. Ergebnisse 67
4.4.1. HMB 45-positive Zellen 67
4.4.2. MIB 1-positive Zellen 69
4.4.3. Bei 2-positive Zellen 70
4.4.4. Veränderung der Epidermisdicke nach UVB-Bestrahlung.... 71
4.4.5. Reteleistenveränderung nach UVB-Bestrahlung 72
5. Zusammenfassende Wertung 74
5.1. Ausblicke 75
6. Literaturverzeichnis 76
7. Anhang 89
7.1. Ergebnisse HMB 45 89
7.2. Ergebnisse MIB 1 90
7.3. Ergebnisse Bei 2 91
7.4. Messung der Epidermisdicke 92
7.5. Messung der Retedicke 93
Lebenslauf 95
7
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| adam_txt |
Inhalt
1. Einleitung 8
1.1. Einführung zum Thema: Spalthaut 8
1.1.1. Das Spalthauttransplantat 8
1.1.2. Vor-und Nachteile des Spalthauttransplantates 9
1.1.3. Die Transplantatgewinnung 10
1.1.4. Die Fixierung des Spalthauttransplantates 12
1.1.5. Die Einheilung des Spalthauttransplantates 13
1.1.6. Die Heilung und Versorgung der Entnahmestelle 14
1.1.7. Unterschiede zwischen Vollhaut- und Spalthauttransplantaten
15
1.2. Einführung zum Thema: Ultraviolette Strahlung 17
1.2.1. Physikalische Grundlagen 17
1.2.2. UVA-Strahlung und ihre Folgen 18
1.2.3. PUVA (Psoralen und UVA-Strahlung) 18
1.2.4. UVB-Strahlung und ihre Folgen 19
1.2.5. UVC-Strahlung und ihre Folgen 20
1.2.6. UV-induzierte Lichtdermatosen 20
1.2.6.1. Das Erythem, MED 20
1.2.6.2. Pigmentierung 21
1.2.6.3. Lichtschwiele 23
1.2.7. UV-induzierte Hautkarzinogenese 23
1.2.8. Lichttherapie 25
1.2.9. Fragestellung 25
2. Material und Methode 27
2.1. Patienten und Methoden 27
2.1.1. Patientenkollektiv 27
2.1.2. Patientenübersicht: 28
2.1.3.1. Die Entnahme und Fixation der Spalthauttransplantate. 29
2.1.3.2. Entwässern der Präparate 29
2.1.3.3. Paraffineinbettung 30
2.1.3.4. Entparaffinierung und Färbung 30
2.2. Die Immunmarkierung 31
4
2.2.1. Prinzip 31
2.2.2. Indirekte enzymatische Immunmarkierung 32
2.3. Antikörper 33
2.3.1. HMB 45 34
2.3.2. MIB 1 34
2.3.3. Bei 2 35
2.4. Protokoll der APAAP- Methode 35
2.5. Haemalaun-Färbung 36
2.6. Rezepte 36
2.6.1. Tris-Puffer 36
2.6.1.1. Stammlösung 36
2.6.1.2. Gebrauchslösung 37
2.6.2. BSA-Puffer 37
2.6.3. Propandiol-Stammpuffer 37
2.6.4. Antikörper- Verdünnungen 37
2.6.4.1. Primärer Antikörper 37
2.6.4.2. Brückenantikörper zur APAAP-Markierung 37
2.6.4.3. APAAP-Komplexe 38
2.6.4.4. APAAP-Substrat (Sparrezept) 38
2.7. Auswertung der Präparate 38
2.8. Bearbeitung der ausgezählten Ergebnisse 40
2.9. Darstellung der Ergebnisse 40
3. Ergebnisse 41
3.1. Befunde der Histopathologie 41
3.2. Auswertung der Gesamtzellzahl im Epithel 42
3.2.1. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper HMB 45 im
Epithel 42
3.2.2. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper MIB 1 im
Epithel 42
3.2.3. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper Bei 2 im
Epithel 42
3.3. Auswertung der Gesamtzellzahl im Corium 43
5
3.3.1. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper HMB 45 im
Corium 43
3.3.2. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper MIB 1 im
Corium 43
3.3.3. Auswertung der Gesamtzellzahl beim Antikörper Bei 2 im
Corium 43
3.4. Messung der Spalthautdicke vor und nach UVB 44
3.4.1. Messung der Epidermisdicke 44
3.4.2. Messung der Retedicke 46
3.5. Antikörper 47
3.5.1. Auswertung des Antikörpers HMB 45 47
3.5.1.1. HMB 45 -positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Epithel 47
3.5.1.2. Prozentualer Anteil HMB 45-positiver Zellen im Epithel. 48
3.5.1.3. HMB 45-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Corium 49
3.5.1.4. Prozentualer Anteil HMB 45-positiver Zellen im Corium
50
3.5.2. Auswertung des Antikörpers MIB 1 51
3.5.2.1. MIB 1-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Epithel 51
3.5.2.2. Prozentualer Anteil MIB 1-positiver Zellen im Epithel 52
3.5.2.3. MIB 1-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Corium 53
3.5.2.4. Prozentualer Anteil MIB 1-positiver Zellen im Corium. 54
3.5.3. Auswertung des Antikörpers Bei 2 56
3.5.3.1. Bei 2 -positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Epithel 56
3.5.3.1. Prozentualer Anteil Bei 2-positiver Zellen im Epithel 57
3.5.3.3. Bei 2-positiv markierte Zellen und Gesamtzellzahl im
Corium 57
3.5.3.4. Prozentualer Anteil Bei 2-positiver Zellen im Corium 59
4. Diskussion 60
4.1. Verwendete Methode 60
6
4.1.1. Patienten 60
4.1.2. Auswahl der Antikörper für die immunhistochemische
Markierung 60
4.1.3. Auswertung der Präparate 61
4.2. Veränderungen der Haut nach UVB-Bestrahlung 62
4.3. Photokarzinogenese 63
4.3.1. Sonnenbrandzellen als Apoptosezellen 63
4.3.2. Apoptose 65
4.4. Ergebnisse 67
4.4.1. HMB 45-positive Zellen 67
4.4.2. MIB 1-positive Zellen 69
4.4.3. Bei 2-positive Zellen 70
4.4.4. Veränderung der Epidermisdicke nach UVB-Bestrahlung. 71
4.4.5. Reteleistenveränderung nach UVB-Bestrahlung 72
5. Zusammenfassende Wertung 74
5.1. Ausblicke 75
6. Literaturverzeichnis 76
7. Anhang 89
7.1. Ergebnisse HMB 45 89
7.2. Ergebnisse MIB 1 90
7.3. Ergebnisse Bei 2 91
7.4. Messung der Epidermisdicke 92
7.5. Messung der Retedicke 93
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