Einfluss von 17b-Östradiol [17-Beta-Östradiol] und Insulin auf die Proteinsynthese von kultivierten bovinen Gelenkknorpelzellen:
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2005
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis Seite
1. Einleitung 1
2. Material und Methoden 4
2.1 Chemikalien 4
2.2 Versuchstiere 6
2.3 Zellkultursystem der Gelenkknorpelzellen 6
2.3.1 Kultivierung der Gelenkknorpelzellen im Monolayer 7
2.4 Darstellung der Kulturstrategie 7
2.5 Inkubation von kultivierten Gelenkknorpelzellen 8
2.5.1 Inkubation von Gelenkknorpelzellen mit Östradiol und Tamoxifen 8
2.5.2 Inkubation von Gelenkknorpelzellen mit Insulin 8
2.6 Immuncytochemie 9
2.6.1 Immuncytochemische Darstellung von Typ I- und II-Kollagen an
Monolayerkulturen 9
2.6.2 Immuncytochemische Darstellung des Östrogenrezeptors a an
Monolayerkulturen 10
2.7 Einbau von radioaktiv markiertem Prolin in Gelenkknorpelzellen 11
2.8 ELISA zur Quantifizierung von Typ II-Kollagen 12
2.9 Bestimmung des DNA-Gehalts der Gelenkknorpelzellen 13
2.10 Statistik 14
3. Ergebnisse IS
3.1 Immuncytochemische Darstellung des Östrogenrezeptors a an
Gelenkknorpelzellen von Kühen 15
3.2 Immuncytochemische Darstellung von Typ I- und Typ II-Kollagen zur
Charakterisierung der kultivierten Gelenkknorpelzellen 15
3.3 Einfluss von Insulin und Östradiol auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen
von Kühen im Monolayer 18
3.4 Einfluss von Insulin auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen nach Vorinkubation mit Östradiol 20
3.5 Einfluss von Insulin auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen nach Vorinkubation mit Östradiol und Tamoxifen 21
3.6 Quantitative Bestimmung von Typ II-Kollagen bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen unter Verwendung eines ELISA 22
3.6.1 Einfluss von Östradiol auf die Typ II-Kollagensynthese 22
3.6.2 Einfluss von Insulin auf die Typ II-Kollagensynthese nach
Vorinkubation mit Östradiol 23
3.7 Einfluss von Insulin auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen nach gleichzeitiger Inkubation mit Östradiol 24
4. Diskussion 26
4.1 Einfluss der serumfreien Kulturphase auf den Östrogenrezeptor a und den
Differenzierungsgrad der Gelenkknorpelzellen im Monolayer 26
4.2 Einfluss von 17ß-Östradiol auf den Prolineinbau von kultivierten
Gelenkknorpelzellen 28
4.3 Typ n-Kollagenproduktion von kultivierten Gelenkknorpelzellen nach
Inkubation mit 17ß-Östradiol und Insulin 29
4.4 Hemmung des Protein-anabolen Effekts von Insulin auf
Gelenkknorpelzellen durch 17ß-Östradiol 30
5. Zusammenfassung 33
6. Literaturverzeichnis 35
7. Danksagung 43
8. Lebenslauf 44
|
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Inhaltsverzeichnis Seite
1. Einleitung 1
2. Material und Methoden 4
2.1 Chemikalien 4
2.2 Versuchstiere 6
2.3 Zellkultursystem der Gelenkknorpelzellen 6
2.3.1 Kultivierung der Gelenkknorpelzellen im Monolayer 7
2.4 Darstellung der Kulturstrategie 7
2.5 Inkubation von kultivierten Gelenkknorpelzellen 8
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2.5.2 Inkubation von Gelenkknorpelzellen mit Insulin 8
2.6 Immuncytochemie 9
2.6.1 Immuncytochemische Darstellung von Typ I- und II-Kollagen an
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3. Ergebnisse IS
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3.2 Immuncytochemische Darstellung von Typ I- und Typ II-Kollagen zur
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3.3 Einfluss von Insulin und Östradiol auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen
von Kühen im Monolayer 18
3.4 Einfluss von Insulin auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen nach Vorinkubation mit Östradiol 20
3.5 Einfluss von Insulin auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen nach Vorinkubation mit Östradiol und Tamoxifen 21
3.6 Quantitative Bestimmung von Typ II-Kollagen bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen unter Verwendung eines ELISA 22
3.6.1 Einfluss von Östradiol auf die Typ II-Kollagensynthese 22
3.6.2 Einfluss von Insulin auf die Typ II-Kollagensynthese nach
Vorinkubation mit Östradiol 23
3.7 Einfluss von Insulin auf den Prolineinbau bei Gelenkknorpelzellen von
Kühen nach gleichzeitiger Inkubation mit Östradiol 24
4. Diskussion 26
4.1 Einfluss der serumfreien Kulturphase auf den Östrogenrezeptor a und den
Differenzierungsgrad der Gelenkknorpelzellen im Monolayer 26
4.2 Einfluss von 17ß-Östradiol auf den Prolineinbau von kultivierten
Gelenkknorpelzellen 28
4.3 Typ n-Kollagenproduktion von kultivierten Gelenkknorpelzellen nach
Inkubation mit 17ß-Östradiol und Insulin 29
4.4 Hemmung des Protein-anabolen Effekts von Insulin auf
Gelenkknorpelzellen durch 17ß-Östradiol 30
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