Charakterisierung der Antigen-induzierten Arthritis in Cathepsin K-defizienten Mäusen:
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2005
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS
1 ZUSAMMENFASSUNG 1
2 EINLEITUNG 3
2.1 RHEUMATOIDE ARTHRITIS 3
2.1.1 Klinische und epidemiologische Aspekte 3
2.1.2 Ätiologie der rheumatoiden Arthritis 4
2.1.3 HistopathologischeCharakteristika 5
2.1.4 Immunpathogenetische Bedeutung ausgewählter Zellen und Zytokine 6
2.2 EXPERIMENTELLE ARTHRITISMODELLE 11
2.2.1 Übersicht 11
2.2.2 Das Modell der Antigen induzierten Arthritis 13
2.3 CATHEPSINK 16
2.3.1 Übersicht der Cysteinproteinasen 16
2.3.2 Vorkommen und physiologische Bedeutung von Cathepsin K 17
2.3.3 Cathepsin K in der rheumatoiden Arthritis 19
2.3.4 Tiermodelle Cathepsin K defiziente und transgene Mäuse 21
2.4 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 22
3 MATERIAL UND METHODEN 23
3.1 MATERIAL 23
3.1.1 Versuchstiere 23
3.1.2 Geräte 23
3.1.3 Verbrauchsmaterialien 24
3.1.4 Chemikalien und Reagenzien 24
3.1.5 Zellkulturmedien und Puffer 25
3.2 METHODEN 27
3.2.1 Immunisierung und Arthritisinduktion 27
3.2.2 Messung klinischer Parameter in der AIA 28
3.2.3 Histologie 29
3.2.4 Bestimmung matrixspezifischer Antikörper 30
3.2.5 In vitro Knorpeldestruktionsassay 31
3.2.6 Zelluläre und humorale Immunparameter 35
3.2.7 Immunhistologie 40
3.2.8 Proliferationsassay 40
3.2.9 Statistische Auswertung 41
4 ERGEBNISSE 42
4.1 BEURTEILUNG KLINISCHER PARAMETER DER AIA 42
4.1.1 Messung der Kniegelenkschwellung 42
4.1.2 Messung der verzögerten Überempfindlichkeitsreaktion (DTH) 42
4.2 HISTOLOGISCHE BEWERTUNG 44
4.3 BESTIMMUNG DES MILZGEWICHTES 45
4.4 BESTIMMUNG MATRIXSPEZIFISCHER ANTIKÖRPER 46
4.5 CHARAKTERISIERUNG DER KNORPELDESTRUKTION IM IN VITRO
KNORPELDESTRUKTIONSASSAY 47
4.5.1 Bestimmung der freigesetzten Glycosaminoglykane 47
4.5.2 Histologische Auswertung der synovialen Fibroblasten Knorpel Kokulturen 48
4.6 BEEINFLUSSUNG DER ZELLULÄREN UND HUMORALEN IMMUNITÄT 50
4.6.1 Bewertung der Aktivität der Peritonealmakrophagen 50
4.6.2 Bestimmung von Th Zell spezifischen Zytokinen 51
4.6.3 Bestimmung der Immunglobulin Subklassen IgGl, IgG2t, 53
4.6.4 Immunhistologie 56
4.6.5 Proliferationsassay 56
5 DISKUSSION 57
5.1 KRITIK DER EXPERIMENTELLEN VERFAHREN 5 8
5.1.1 Die Entzündung 5 8
5.1.2 Die Knorpeldestruktion 58
5.1.3 Die Knochendestruktion 60
5.2 BEURTEILUNG DER ENTZÜNDUNGSPARAMETER 61
5.3 BEWERTUNG DER KNORPELDESTRUKTION 67
5.4 BEEINFLUSSUNG DER KNOCHENDESTRUKTION 68
5.5 MATRIXSPEZIFISCHE ANTIKÖRPER URSACHE ODER WIRKUNG ? 72
5.6 SCHLUSSFOLGERUNGEN 74
6 LITERATURVERZEICHNIS 75
PRÄSENTATION DER ERGEBNISSE 95
LEBENSLAUF 96
EHRENWÖRTLICHE ERKLÄRUNG 97
DANKSAGUNG 98
|
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Inhaltsverzeichnis
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS
1 ZUSAMMENFASSUNG 1
2 EINLEITUNG 3
2.1 RHEUMATOIDE ARTHRITIS 3
2.1.1 Klinische und epidemiologische Aspekte 3
2.1.2 Ätiologie der rheumatoiden Arthritis 4
2.1.3 HistopathologischeCharakteristika 5
2.1.4 Immunpathogenetische Bedeutung ausgewählter Zellen und Zytokine 6
2.2 EXPERIMENTELLE ARTHRITISMODELLE 11
2.2.1 Übersicht 11
2.2.2 Das Modell der Antigen induzierten Arthritis 13
2.3 CATHEPSINK 16
2.3.1 Übersicht der Cysteinproteinasen 16
2.3.2 Vorkommen und physiologische Bedeutung von Cathepsin K 17
2.3.3 Cathepsin K in der rheumatoiden Arthritis 19
2.3.4 Tiermodelle Cathepsin K defiziente und transgene Mäuse 21
2.4 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 22
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3.1 MATERIAL 23
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3.1.3 Verbrauchsmaterialien 24
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3.1.5 Zellkulturmedien und Puffer 25
3.2 METHODEN 27
3.2.1 Immunisierung und Arthritisinduktion 27
3.2.2 Messung klinischer Parameter in der AIA 28
3.2.3 Histologie 29
3.2.4 Bestimmung matrixspezifischer Antikörper 30
3.2.5 In vitro Knorpeldestruktionsassay 31
3.2.6 Zelluläre und humorale Immunparameter 35
3.2.7 Immunhistologie 40
3.2.8 Proliferationsassay 40
3.2.9 Statistische Auswertung 41
4 ERGEBNISSE 42
4.1 BEURTEILUNG KLINISCHER PARAMETER DER AIA 42
4.1.1 Messung der Kniegelenkschwellung 42
4.1.2 Messung der verzögerten Überempfindlichkeitsreaktion (DTH) 42
4.2 HISTOLOGISCHE BEWERTUNG 44
4.3 BESTIMMUNG DES MILZGEWICHTES 45
4.4 BESTIMMUNG MATRIXSPEZIFISCHER ANTIKÖRPER 46
4.5 CHARAKTERISIERUNG DER KNORPELDESTRUKTION IM IN VITRO
KNORPELDESTRUKTIONSASSAY 47
4.5.1 Bestimmung der freigesetzten Glycosaminoglykane 47
4.5.2 Histologische Auswertung der synovialen Fibroblasten Knorpel Kokulturen 48
4.6 BEEINFLUSSUNG DER ZELLULÄREN UND HUMORALEN IMMUNITÄT 50
4.6.1 Bewertung der Aktivität der Peritonealmakrophagen 50
4.6.2 Bestimmung von Th Zell spezifischen Zytokinen 51
4.6.3 Bestimmung der Immunglobulin Subklassen IgGl, IgG2t, 53
4.6.4 Immunhistologie 56
4.6.5 Proliferationsassay 56
5 DISKUSSION 57
5.1 KRITIK DER EXPERIMENTELLEN VERFAHREN 5 8
5.1.1 Die Entzündung 5 8
5.1.2 Die Knorpeldestruktion 58
5.1.3 Die Knochendestruktion 60
5.2 BEURTEILUNG DER ENTZÜNDUNGSPARAMETER 61
5.3 BEWERTUNG DER KNORPELDESTRUKTION 67
5.4 BEEINFLUSSUNG DER KNOCHENDESTRUKTION 68
5.5 MATRIXSPEZIFISCHE ANTIKÖRPER URSACHE ODER WIRKUNG ? 72
5.6 SCHLUSSFOLGERUNGEN 74
6 LITERATURVERZEICHNIS 75
PRÄSENTATION DER ERGEBNISSE 95
LEBENSLAUF 96
EHRENWÖRTLICHE ERKLÄRUNG 97
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