FISH-Untersuchungen mittels UroVysionTM an Tissue-Multi-Arrays (TMA) zur Differenzierung flacher urothelialer Läsionen:
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2005
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis I
1. EINLEITUNG UND FRAGESTELLUNG 1
1.1. Anatomie der Harnblase 1
1.1.1. Makroskopische Anatomie 1
1.1.2. Mikroskopische Anatomie 1
1.2. Klassifizierung von Harnblasentumoren 2
1.3. Klassifikation und molekulargenetische Befunde urothelialer Läsionen und
Neoplasien 4
1.3.1. Flache urotheliale Lasionen 5
1.3.2. Papilläre urotheliale Neoplasien 8
1.3.3. Invasives Urothelkarzinom 9
1.3.4. Modell der molekularen Kanzerogenese 9
1.4. Tumorätiologie und statistische Daten 9
1.4.1. Inzidenz, Epidemiologie, Mortalität 9
1.4.2. Ätiologie 10
1.5. Polysomie und Möglichkeiten der Detektion 10
1.6. Onkogene und Tumorsuppressorgene 11
1.6.1. Onkogene 12
1.6.2. Tumorsuppressorgene 12
1.6.3. LOH - Verlust der Heterogenität und Tumorsuppressorgene 13
1.7. Ziel dieser Arbeit 14
2. MATERIAL UND METHODEN 15
2.1. Datenerhebung 15
2.2. Multiblock 15
2.3. Verwendete Materialien und Reagenzien 16
2.3.1. Materialien 16
2.3.2. Reagenzien 17
2.3.3. Verwendete FISH-Sondenkits 18
2.3.4. Antikörper für Immunhistochemie 18
2.3.5. Geräte für Histologische Begutachtung und Dokumentation 18
2.3.6. Gerate für FISH-Auszählung 18
2.4. Floureszenz-in-situ-Hybridisierung 19
2.4.1. Prinzip der Floureszenz-in-situ-Hybridisierung 19
2.4.2. Protokoll FISH: Gewebepräparation und Hybridisierung 20
2.4.3. Ergebnis-Evaluation der UroVysion-Hybridisierung 21
2.4.4. Ergebnis-Evaluation der PathVysion-Hybridisierung 21
Inhaltsverzeichnis n
2.4.5. Auswertungskriterien UroVysion 21
2.4.6. Auswertungskriterien PathVysion 22
2.5. Immunhistochemie 22
2.5.1. Prinzip der Immunhistochemie 22
2.5.2. Protokoll Immunhistochemie: Gewebepräparation und Antigendarstellung 23
2.5.3. Ergebnis-Evaluation der immunhistochemischen Färbung 23
3. ERGEBNISSE 25
3.1. Färbeprotokoll 25
3.2. Numerische Chromosomenaberrationen 25
3.2.1. Übersicht 25
3.2.2. Polysomie und Aneuploidie 27
3.2.3. Chromosomenkombinationen bei Polysomie 28
3.2.4. Assoziation des Status der Polysomie/Aneuploidie mit der Begleitläsionen 29
3.3. Relativer Verlust von Genlocus 9pl6 30
3.4. Abbildungen zur FISH mit UroVysion 32
3.5. Veränderungen des Expressionsmuster des c-erbB2-Rezeptors in flachen
urothelialen Läsionen 34
3.5.1. Übersicht 34
3.5.2. Bilder der immunhistochemischen Färbung 35
3.5.3. Amplifikation des HER2/neu-Gens als mögliche Ursache veränderter Expression 37
3.5.4. Assoziation des Expressionsmusters mit der Polysomie der Läsion 38
3.5.5. Assoziation des Expressionsmusters mit der Begleitläsion 38
4. DISKUSSION 40
4.1. Kritische Betrachtung der UroVysion-Färbung 40
4.2. Kritische Betrachtung der Verwendung von Tissue-Multi-Arrays 41
4.3. Numerische Chromosomenaberrationen - Polysomie 42
4.3.1. Hyperplasie, reaktive Atypie und Normalurothel 42
4.3.2. Dysplasie, Carcinoma in situ und pTl-Tumor 44
4.4. Präferentiell vermehrte Chromosomen und -kombinationen 45
4.5. Relative Deletion von 9p21 47
4.5.1. Ursachen für die Entstehung einer relativen Deletion 47
4.5.2. Verlust von 9p21 (pl6) und dessen Bedeutung für Kanzerogenese und
Tumorprogredienz 47
4.6. Amplifikation des HER2/neu-Genlocus 49
Inhaltsverzeichnis III
4.7. Expression des HER2/neu-Rezeptors 50
4.7.1. Expressionsmuster 50
4.7.2. Ursachen eines abnormen Expressionsmusters 51
4.7.3. Bedeutung abnormer Expression 51
4.8. Molekulargenetische Diskrimination flacher Urothelläsionen 53
5. ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 56
6. ANHANG 58
6.1. Verwendete Abkürzungen 58
6.2. Patientendaten 59
6.3. Abbildungsverzeichnis 62
7. LITERATURVERZEICHNIS 63
8. DANKSAGUNG 68
9. CURRICULUM VITAE 69
|
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Inhaltsverzeichnis I
1. EINLEITUNG UND FRAGESTELLUNG 1
1.1. Anatomie der Harnblase 1
1.1.1. Makroskopische Anatomie 1
1.1.2. Mikroskopische Anatomie 1
1.2. Klassifizierung von Harnblasentumoren 2
1.3. Klassifikation und molekulargenetische Befunde urothelialer Läsionen und
Neoplasien 4
1.3.1. Flache urotheliale Lasionen 5
1.3.2. Papilläre urotheliale Neoplasien 8
1.3.3. Invasives Urothelkarzinom 9
1.3.4. Modell der molekularen Kanzerogenese 9
1.4. Tumorätiologie und statistische Daten 9
1.4.1. Inzidenz, Epidemiologie, Mortalität 9
1.4.2. Ätiologie 10
1.5. Polysomie und Möglichkeiten der Detektion 10
1.6. Onkogene und Tumorsuppressorgene 11
1.6.1. Onkogene 12
1.6.2. Tumorsuppressorgene 12
1.6.3. LOH - Verlust der Heterogenität und Tumorsuppressorgene 13
1.7. Ziel dieser Arbeit 14
2. MATERIAL UND METHODEN 15
2.1. Datenerhebung 15
2.2. Multiblock 15
2.3. Verwendete Materialien und Reagenzien 16
2.3.1. Materialien 16
2.3.2. Reagenzien 17
2.3.3. Verwendete FISH-Sondenkits 18
2.3.4. Antikörper für Immunhistochemie 18
2.3.5. Geräte für Histologische Begutachtung und Dokumentation 18
2.3.6. Gerate für FISH-Auszählung 18
2.4. Floureszenz-in-situ-Hybridisierung 19
2.4.1. Prinzip der Floureszenz-in-situ-Hybridisierung 19
2.4.2. Protokoll FISH: Gewebepräparation und Hybridisierung 20
2.4.3. Ergebnis-Evaluation der UroVysion-Hybridisierung 21
2.4.4. Ergebnis-Evaluation der PathVysion-Hybridisierung 21
Inhaltsverzeichnis n
2.4.5. Auswertungskriterien UroVysion 21
2.4.6. Auswertungskriterien PathVysion 22
2.5. Immunhistochemie 22
2.5.1. Prinzip der Immunhistochemie 22
2.5.2. Protokoll Immunhistochemie: Gewebepräparation und Antigendarstellung 23
2.5.3. Ergebnis-Evaluation der immunhistochemischen Färbung 23
3. ERGEBNISSE 25
3.1. Färbeprotokoll 25
3.2. Numerische Chromosomenaberrationen 25
3.2.1. Übersicht 25
3.2.2. Polysomie und Aneuploidie 27
3.2.3. Chromosomenkombinationen bei Polysomie 28
3.2.4. Assoziation des Status der Polysomie/Aneuploidie mit der Begleitläsionen 29
3.3. Relativer Verlust von Genlocus 9pl6 30
3.4. Abbildungen zur FISH mit UroVysion 32
3.5. Veränderungen des Expressionsmuster des c-erbB2-Rezeptors in flachen
urothelialen Läsionen 34
3.5.1. Übersicht 34
3.5.2. Bilder der immunhistochemischen Färbung 35
3.5.3. Amplifikation des HER2/neu-Gens als mögliche Ursache veränderter Expression 37
3.5.4. Assoziation des Expressionsmusters mit der Polysomie der Läsion 38
3.5.5. Assoziation des Expressionsmusters mit der Begleitläsion 38
4. DISKUSSION 40
4.1. Kritische Betrachtung der UroVysion-Färbung 40
4.2. Kritische Betrachtung der Verwendung von Tissue-Multi-Arrays 41
4.3. Numerische Chromosomenaberrationen - Polysomie 42
4.3.1. Hyperplasie, reaktive Atypie und Normalurothel 42
4.3.2. Dysplasie, Carcinoma in situ und pTl-Tumor 44
4.4. Präferentiell vermehrte Chromosomen und -kombinationen 45
4.5. Relative Deletion von 9p21 47
4.5.1. Ursachen für die Entstehung einer relativen Deletion 47
4.5.2. Verlust von 9p21 (pl6) und dessen Bedeutung für Kanzerogenese und
Tumorprogredienz 47
4.6. Amplifikation des HER2/neu-Genlocus 49
Inhaltsverzeichnis III
4.7. Expression des HER2/neu-Rezeptors 50
4.7.1. Expressionsmuster 50
4.7.2. Ursachen eines abnormen Expressionsmusters 51
4.7.3. Bedeutung abnormer Expression 51
4.8. Molekulargenetische Diskrimination flacher Urothelläsionen 53
5. ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 56
6. ANHANG 58
6.1. Verwendete Abkürzungen 58
6.2. Patientendaten 59
6.3. Abbildungsverzeichnis 62
7. LITERATURVERZEICHNIS 63
8. DANKSAGUNG 68
9. CURRICULUM VITAE 69 |
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