Zytokinmodulationen bei Patienten mit Ankylosierender Spondylitis unter Behandlung mit dem TNFa-Antikörper [TNFalpha-Antikörper] Infliximab:
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| Veröffentlicht: |
2005
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| Beschreibung: | Berlin, Charité, Univ.-Med., Diss., 2005 |
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INHALTSVERZEICHNIS
I EINLEITUNG 4
1.1 Ankylosierende Spondylitis 4
1.2 Ziel der Arbeit 5
1.3 Diagnostik der Ankylosierenden Spondylitis 6
1.4 Therapie der Ankylosierenden Spondylitis 7
1.5 Immunologische Grundlagen 9
1.6 Autoimmunität bei Ankylosierender Spondylitis 11
1.7 Die Rolle von TNFa bei der Ankylosierenden Spondylitis 13
II PATIENTEN. MATERIAL UND METHODEN 14
11.1 Patienten 14
11.2 Klinische Messwerte 16
11.3 Verarbeitung humaner Zellen aus peripherem Blut 17
11.3.1 Isolierung humaner Zellen aus peripherem Blut 17
11.3.2 Stimulation von peripheren mononukleären Zellen 18
11.4 Verarbeitung von Vollblut 20
11.4.1 Verarbeitung und Stimulation von Vollblut 20
11.4.2 Färbung und Fixierung von Vollblut-Zellen 21
11.5 Verwendete monoklonale Antikörper bei der PBMC-Färbung 22
11.6 Verwendete monoklonale Antikörper bei der Vollblut-Färbung 23
11.7 Kopplung von Fluochromen an Antikörper 23
11.7.1 Kopplung von FITC und Cy5 23
11.7.2 Kopplung von PE 24
11.7.3 Titration von Antikörperlösungen 24
11.8 Durchflusszytometrie 24
11.9. Statistische Analysen 27
2
III ERGEBNISSE 28
«1.1 Klinische Werte 28
111.1.1 BASDAI 29
111.1.2 BASFI 30
111.1.3 C-reaktives Protein 32
lll.1.4Schmerz-Score 32
«1.2 Lymphozytenzahl 34
111.3 Zytokinmessungen an peripheren mononukleären Zellen 35
111.3.1 TNFa-Produktion 36
Hl.3.2 Die Zytokine IFNy, IL 2 und IL 10 38
«1.4 Zytokin-Messung in Vollblut-Zellen 40
IIIAITNFa 42
I|I.4.2IFNy 43
111.5 Statistik - Korrelationen 44
«1.6 Verlaufsbeobachtung an zwei Patienten zu sechs Zeitpunkten des ersten
Infusionszyklusses 46
111.6.1 Klinische Daten 46
111.6.2 Zytokine TNFa und INFY 48
111.6.3 Lymphozyten 50
«1.7 Vollbut-Stimulation mit verschiedenen Infliximab-Konzentrationen 51
IV DISKUSSION 56
IV.1 Untersuchung der AS-Patienten und ihrer T-Zellen 57
IV. 1.1 Klinische Daten und ihre Veränderungen in Abhängigkeit von anti-TNFa
Antikörperinfusionen 57
IV. 1.2 Veränderungen von TNFu-Produktionen in T-Zellen bei anti-TNFa
Antikörperinfusionen 58
IV. 13 Veränderungen der IFNy-Produktionen 60
IV.1.4 Rückgang der IL 10-Produktion 60
3
IV.1.5 Veränderung der IL 2-Produktion nach anti-TNFa Antikörperinfusionen. 61
IV.1.6 Zunahme der Lymphozytenzahl nach anti-TNFa Antikörperinfusion 61
IV. 1.7 Zusammenfassende Betrachtung der Ergebnisse der Patienten- und
Patientenzelluntersuchungen 62
IV.2 Rückgang Zytokin-produzierender T-Zellen nach direkter Inkubation
unter Zugabe von anti-TNFa Antikörpern 63
V ZUSAMMENFASSUNG 65
LITERATURVERZEICHNIS 66
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS 74
DANKSAGUNG 76
|
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1
INHALTSVERZEICHNIS
I EINLEITUNG 4
1.1 Ankylosierende Spondylitis 4
1.2 Ziel der Arbeit 5
1.3 Diagnostik der Ankylosierenden Spondylitis 6
1.4 Therapie der Ankylosierenden Spondylitis 7
1.5 Immunologische Grundlagen 9
1.6 Autoimmunität bei Ankylosierender Spondylitis 11
1.7 Die Rolle von TNFa bei der Ankylosierenden Spondylitis 13
II PATIENTEN. MATERIAL UND METHODEN 14
11.1 Patienten 14
11.2 Klinische Messwerte 16
11.3 Verarbeitung humaner Zellen aus peripherem Blut 17
11.3.1 Isolierung humaner Zellen aus peripherem Blut 17
11.3.2 Stimulation von peripheren mononukleären Zellen 18
11.4 Verarbeitung von Vollblut 20
11.4.1 Verarbeitung und Stimulation von Vollblut 20
11.4.2 Färbung und Fixierung von Vollblut-Zellen 21
11.5 Verwendete monoklonale Antikörper bei der PBMC-Färbung 22
11.6 Verwendete monoklonale Antikörper bei der Vollblut-Färbung 23
11.7 Kopplung von Fluochromen an Antikörper 23
11.7.1 Kopplung von FITC und Cy5 23
11.7.2 Kopplung von PE 24
11.7.3 Titration von Antikörperlösungen 24
11.8 Durchflusszytometrie 24
11.9. Statistische Analysen 27
2
III ERGEBNISSE 28
«1.1 Klinische Werte 28
111.1.1 BASDAI 29
111.1.2 BASFI 30
111.1.3 C-reaktives Protein 32
lll.1.4Schmerz-Score 32
«1.2 Lymphozytenzahl 34
111.3 Zytokinmessungen an peripheren mononukleären Zellen 35
111.3.1 TNFa-Produktion 36
Hl.3.2 Die Zytokine IFNy, IL 2 und IL 10 38
«1.4 Zytokin-Messung in Vollblut-Zellen 40
IIIAITNFa 42
I|I.4.2IFNy 43
111.5 Statistik - Korrelationen 44
«1.6 Verlaufsbeobachtung an zwei Patienten zu sechs Zeitpunkten des ersten
Infusionszyklusses 46
111.6.1 Klinische Daten 46
111.6.2 Zytokine TNFa und INFY 48
111.6.3 Lymphozyten 50
«1.7 Vollbut-Stimulation mit verschiedenen Infliximab-Konzentrationen 51
IV DISKUSSION 56
IV.1 Untersuchung der AS-Patienten und ihrer T-Zellen 57
IV. 1.1 Klinische Daten und ihre Veränderungen in Abhängigkeit von anti-TNFa
Antikörperinfusionen 57
IV. 1.2 Veränderungen von TNFu-Produktionen in T-Zellen bei anti-TNFa
Antikörperinfusionen 58
IV. 13 Veränderungen der IFNy-Produktionen 60
IV.1.4 Rückgang der IL 10-Produktion 60
3
IV.1.5 Veränderung der IL 2-Produktion nach anti-TNFa Antikörperinfusionen. 61
IV.1.6 Zunahme der Lymphozytenzahl nach anti-TNFa Antikörperinfusion 61
IV. 1.7 Zusammenfassende Betrachtung der Ergebnisse der Patienten- und
Patientenzelluntersuchungen 62
IV.2 Rückgang Zytokin-produzierender T-Zellen nach direkter Inkubation
unter Zugabe von anti-TNFa Antikörpern 63
V ZUSAMMENFASSUNG 65
LITERATURVERZEICHNIS 66
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS 74
DANKSAGUNG 76 |
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