Einfluß von Somatostatin auf die Genexpression in humanen Gliomen:
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2004
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis Seite
Abkürzungen
1. Einleitung 01
2. Material 07
2. 1. Chemikalien 07
2.2. Enzyme 08
2.3. Gebrauchsfertige Kits 08
2.4. Membranen und Filme 08
2.5. Geräte 09
2.6. Oligonukleotide 10
2.7. Medien 10
2.8. Puffer und Lösungen 11
2.9. Zellinie 13
3. Methoden 14
3.1. Durchführung des Atlas™ Human Cancer cDNA Expression Array 14
3. 2. Verifizierung der Atlas-Ergebnisse / Northern Blot-Analyse 17
3.2.1. Zellkultivierung 17
3.2.2. Durchführung der RNA-Isolierung 17
3.2.3. Photometrische Bestimmung der RNA-Konzentration 18
3.2.4. Durchführung der RNA-Elektrophorese 19
3.2.5. Durchführung der RT-Polymerase-Chain-Reaktion (RT-PCR) 20
3.2.5.1. Die Reverse-Transkriptions-Reaktion (RT-Reaktion) 20
3. 2.5. 2. Die Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) 21
3. 2.6. Überprüfung des PCR- Produktes und Herstellung der DNA- Sonde 22
3.2.7. Durchführung des Northern-Blot 23
3.2.8. Autoradiographie und Phosphoimaging 25
4. Ergebnisse 27
4.1. Atlas™ Human Cancer cDNA Expression Array 27
4.2. Verifizierung der Atlas-Ergebnisse 30
4.2.1. Zellkultivierung und RNA-Isolierung 30
4.2.2. RNA-Elektrophorese 30
4.2.3. RT-PCR, DNA-Elektrophorese und Aufreinigung der Sonde 32
4.2.4. Northem Blot, Autoradiographie und Phosphorimaging 35
4.2.4.1. IGFBP-2 36
4.2.4.2. CD27-Ligand (CD70) 39
4.2.4.3. NDK A 42
5. Diskussion 46
5. 1. IGFBP-2 46
5.1.1. Bedeutung der Expression von IGFBP-2 für die Tumorprogression 50
5. 1. 2. Bedeutung der Interaktion von Somatostatin und IGFBP-2 für die
Tumorprogression 50
5.2. CD27-Ligand (CD70) 52
5. 2. 1. Bedeutung der Expression von CD70 für die Tumorprogression 52
5.2.2. Bedeutung der Interaktion von Somatostatin und CD70 für die
Tumorprogression 54
5.3. NDK A 56
5.3.1. Bedeutung der Expression von NDK A für die Tumorprogression 56
5. 3. 2. Bedeutung der Interaktion von Somatostatin und NDK A für die
Tumorprogression 59
5.4. Vergleich Array-und Northem-Technologie 61
6. Zusammenfassung 66
7. Literaturverzeichnis 68
8. Danksagung 80
9. Lebenslauf 81
|
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Inhaltsverzeichnis Seite
Abkürzungen
1. Einleitung 01
2. Material 07
2. 1. Chemikalien 07
2.2. Enzyme 08
2.3. Gebrauchsfertige Kits 08
2.4. Membranen und Filme 08
2.5. Geräte 09
2.6. Oligonukleotide 10
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2.8. Puffer und Lösungen 11
2.9. Zellinie 13
3. Methoden 14
3.1. Durchführung des Atlas™ Human Cancer cDNA Expression Array 14
3. 2. Verifizierung der Atlas-Ergebnisse / Northern Blot-Analyse 17
3.2.1. Zellkultivierung 17
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3. 2.5. 2. Die Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) 21
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3.2.7. Durchführung des Northern-Blot 23
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4. Ergebnisse 27
4.1. Atlas™ Human Cancer cDNA Expression Array 27
4.2. Verifizierung der Atlas-Ergebnisse 30
4.2.1. Zellkultivierung und RNA-Isolierung 30
4.2.2. RNA-Elektrophorese 30
4.2.3. RT-PCR, DNA-Elektrophorese und Aufreinigung der Sonde 32
4.2.4. Northem Blot, Autoradiographie und Phosphorimaging 35
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4.2.4.3. NDK A 42
5. Diskussion 46
5. 1. IGFBP-2 46
5.1.1. Bedeutung der Expression von IGFBP-2 für die Tumorprogression 50
5. 1. 2. Bedeutung der Interaktion von Somatostatin und IGFBP-2 für die
Tumorprogression 50
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5. 2. 1. Bedeutung der Expression von CD70 für die Tumorprogression 52
5.2.2. Bedeutung der Interaktion von Somatostatin und CD70 für die
Tumorprogression 54
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5.3.1. Bedeutung der Expression von NDK A für die Tumorprogression 56
5. 3. 2. Bedeutung der Interaktion von Somatostatin und NDK A für die
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5.4. Vergleich Array-und Northem-Technologie 61
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