Die Bedeutung der angiotensinergen und muscarinergen Rezeptoren für die Vasopressin-Freisetzung nach zentraler hyperosmotischer Stimulation der Ratte:
Gespeichert in:
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| Format: | Mikrofilm Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2004
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Kiel, Univ., Diss., 2004 |
| Beschreibung: | 83 Bl. graph. Darst. |
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|---|---|
| adam_text | 1 EINLEITUNG 1
1.1 Renin-Angiotensin-System 1
1.1.1 Angiotensinrezeptor-Subtypen im Zentralnervensystem 2
1.1.2 Signaltransduktionsmechanismen von Angiotensinrezeptoren 4
1.1.3 Zentrale Wirkungen von Angiotensin II 6
1.1.3.1 Kardiovaskuläre Effekte 6
1.1.3.2 Neuroendokrine Effekte 8
1.1.3.3 Induzierbare Transkriptionsfaktoren (ITF) 8
1.1.3.4 Zelldifferenzierung, Antiproliferation und Apoptose 8
1.2 Cholinerge Rezeptoren im ZNS 9
1.2.1 Zentrales cholinerges System 9
1.2.2 Muscarinrezeptor-Subtypen 10
1.2.3 Lokalisation von Muscarinrezeptor-Subtypen im ZNS 11
1.2.4 Signaltransduktionsmechanismen von Muscarinrezeptoren 12
1.2.5 Zentrale Wirkungen von Muscarinrezeptoren 13
1.3 Zentrale Mechanismen der Osmoregulation 14
1.3.1 Zentrale Osmorezeptoren 15
1.3.2 Icv-Injektion hypertoner Kochsalzlösung als osmotischer Stimulus 15
1.3.3 Vasopressin-Freisetzung 16
1.3.4 Trinkantwort 16
1.3.5 Die Bedeutung des zentralen RAS für die Osmoregulation 17
1.3.6 Beteiligung zentraler cholinerger Mechanismen an der Osmoregulation 19
1.4 Gemeinsamkeiten des zentralen angiotensinergen und des zentralen cholinergen
Systems bei der Osmoregulation 20
1.4.1 Wirkungen nach zentraler Gabe des Agonisten 20
1.4.2 Co-Lokalisation von Rezeptoren 21
1.5 Fragestellung 22
2 MATERIAL UND METHODEN 23
2.1 Versuchstiere und deren Haltung 23
2.2 Pharmaka und Chemikalien 23
2.2.1 Ansatz der Lösungen 24
2 1 Methoden 26
2.3.1 Arterieller Katheter 26
2.3.2 Intracerebroventrikuläre (icv-) Katheter 28
2.3.4 Applikationstechnik der icv-Injektion 30
2.3.5 Messung von Vasopressin im Plasma 30
2.4 Statistische Verfahren 30
3 VERSUCHSPROTOKOLLE UND ERGEBNISSE 31
3.1 Einfluss einer periventrikulären Angiotensinrezeptorblockade auf die durch ANG
II (icv)-induzierte AVP-Freisetzung 31
3.1.1 Einfluss einer periventrikulären ATi-Rezeptorblockade auf die durch ANG II (icv)-
induzierte AVP-Freisetzung 32
3.1.2 Einfluss einer periventrikulären AT2-Rezeptorblockade auf die durch ANG II (icv)-
induzierte AVP-Freisetzung 33
3.1.3 Einfluss einer icv-Vorbehandlung mit Losartan und PD 123177 auf die basale AVP-
Freisetzung 34
3.2 Einfluss einer periventrikulären Angiotensin-Rezeptorblockade auf die durch
hypertone Kochsalzlösung (icv) induzierte AVP-Freisetzung 35
3.2.1 Einfluss einer icv-applizierten hypertonen Kochsalzlösung auf die AVP-Freisetzung
(Dosis-Wirkungs-Kurve) 35
3.2.2 Einfluss einer periventrikulären ATi-Rezeptorblockade auf die AVP-Freisetzung nach
icv-Gabe von hypertoner Kochsalzlösung 36
3.2.3 Einfluss einer periventrikulären AT2-Rezeptorblockade auf die AVP-Freisetzung nach
icv-Gabe von hypertoner Kochsalzlösung 37
3.3 Einfluss einer Muscarinrezeptorblockade auf die durch hypertone Kochsalzlösung
(icv) induzierte AVP-Freisetzung 39
3.3.1 Einfluss einer icv-Gabe von Atropin, Pirenzepin, Methoctramin, p-F-
Hexahydrosiladifenidol und Tropicamid auf den basalen AVP-Plasmaspiegel 39
3.3.2 Einfluss der nicht-selektiven periventrikulären Muscarinrezeptorblockade auf die
AVP-Freisetzung nach icv-Gabe hypertoner Kochsalzlösung 40
3.3.3 Einfluss der periventrikulären Blockade von vier Muscarinrezeptor-Subtypen auf die
durch hypertone Kochsalzlösung (icv) induzierte AVP-Freisetzung 41
4 DISKUSSION 43
4.1 Beteiligung periventrikulärer ATi- und ATVRczeptoren an der durch ANG II
(icv)-induzierten AVP-Freisetzung 43
4.2 Beteiligung von AT,- und AT2- sowie Muscarin-Rezeptoren an der AVP-
Freisetzung nach icv-Gabe hypertoner Kochsalzlösung 46
4.3 Subrypisierung des beteiligten Muscarinrezeptors an der AVP-Freisetzung nach
icv-Gabe hypertoner Kochsalzlösung 49
5 ZUSAMMENFASSUNG 52
6 LITERATURVERZEICHNIS 54
7 ANHANG 77
7.1 Glossar 77
7.2 Abbildungen und Tabellen 79
7.3 Danksagung 81
7.4 Lebenslauf Mathias Böser 82
79
7.2 Abbildungen und Tabellen
Abb. 1: Signaltransduktion des ATI-Rezeptors 5
Abb. 2: Signaltransduktion von Muscarinrezeptorsubtypen (hier Mj und M2) 13
Abb. 3: Einfluss einer periventrikulären ATI-Rezeptorblockade mit Losartan (Los) (icv) auf
die durch ANG II (10 pmol icv) induzierte AVP-Freisetzung ins Plasma bei der Ratte.
Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM, n = 6-8. **p 0,01 vs. 0,15 M NaCl +ANG II 32
Abb. 4: Einfluss einer periventrikulären AT2-Rezeptorblockade mit PD 123177 (PD) (icv)
auf die durch ANG II (10 pmol icv) induzierte AVP-Freisetzung ins Plasma bei der Ratte.
Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM, n = 9-10. *p 0,05 vs. 0,15 M NaCl + ANG II 33
Abb. 5: Einfluss einer icv Injektion hypertoner Kochsalzlösung (0,2, 0,3 und 0,6 M) auf die
Plasma-AVP-Spiegel der Ratte. Die Kontrollgruppe wurde mit isotoner (0,15 M) NaCl
behandelt. Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM, n = 5-10. Basal: basale AVP-Spiegel ohne
jegliche Vorbehandlung (n=10). *p 0,05, **p 0,01, ***p 0,001 vs. isotone NaCl 35
Abb. 6: Einfluss von periventrikulärer ATi-Rezeptorblockade mit Losartan (Los) in einer
Dosis von 10 nmol auf die durch icv-Injektionen hypertoner Kochsalzlösung (0,2, 0,3 und
0,6 M) induzierten Plasma-AVP-Spiegel bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte +
SEM, n = 7-9. **p 0,01 vs. mit hypertoner NaCl (0,2 bzw. 0,3 M) behandelte Tiere 36
Abb. 7: Einfluss von periventrikulärer AT2-Rezeptorblockade mit PD 123177 (PD) in einer
Dosis von 1 nmol auf die durch icv-Injektionen hypertoner Kochsalzlösung (0,2, 0,3 und
0,6 M) induzierten Plasma-AVP-Spiegel bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte +
SEM, n = 8-10. *p 0,05, **p 0,01 vs. mit hypertoner NaCl (0,2 bzw. 0,6 M) behandelte
Tiere 37
Abb. 8: Einfluss einer zentralen Vorbehandlung mit dem hochaffinen nicht-selektiven
Muscarinrezeptorantagonisten Atropin (Atr) in einer Dosis von 15 nmol auf die durch
hypertone Kochsalzlösung (icv) induzierte AVP-Freisetzung bei der Ratte. Gezeigt werden
Mittelwerte ± SEM, n = 8-10. *p 0,05, ***p 0,001 vs. mit hypertoner NaCl (0,3 bzw. 0,6
M) behandelte Tiere 40
Abb. 9: Einfluss der zentralen Vorbehandlung mit den Antagonisten der
Muscarinrezeptorsubtypen M, = Pirenzepin (Pir), M2 = Methoctramin (Meth), M3 = p-F-
Hexahydrosiladifenidol (HHSiD) und M4 = Tropicamid (Trop) in einer Dosis von jeweils
15 nmol auf die durch 0,6 M NaCl (icv) induzierte AVP-Ausschüttung bei der Ratte.
Gezeigt werden Mittelwerte + SEM, n = 6-11. *p 0,05 vs. mit 0,6 M NaCl behandelte
Tiere. Veh = Vehikel (isotone NaCl) 41
Abb. 10: Mögliche Mechanismen der AVP-Freisetzung nach hyperosmotischer Stimulation48
Abb. 11: Beteiligung angiotensinerger und muscarinerger Rezeptoren an der AVP-Frei¬
setzung nach hyperosmotischer Stimulation 51
80
Tab. 1: Angiotensinrezeptortypen und -subtypen im Gehirn 4
Tab. 2: Nomenklatur der Muscarinrezeptor-Subtypen 11
Tab. 3: Die Koordinaten für die Implantation der icv-Kanüle in den linken lateralen
Hirnventrikel (Paxinos und Watson 1982) 29
Tab. 4: Einfluss der icv-Injektion von Losartan bzw. PD 123177 auf die basale AVP-
Freisetzung bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte + SEM. Es wurden keine
signifikanten Unterschiede gefunden 34
Tab. 5: Einfluss der icv-Injektion muscarinerger Antagonisten auf die basale AVP-
Freiseteung bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM. Es zeigten sich keine
signifikanten Unterschiede 39
|
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1 EINLEITUNG 1
1.1 Renin-Angiotensin-System 1
1.1.1 Angiotensinrezeptor-Subtypen im Zentralnervensystem 2
1.1.2 Signaltransduktionsmechanismen von Angiotensinrezeptoren 4
1.1.3 Zentrale Wirkungen von Angiotensin II 6
1.1.3.1 Kardiovaskuläre Effekte 6
1.1.3.2 Neuroendokrine Effekte 8
1.1.3.3 Induzierbare Transkriptionsfaktoren (ITF) 8
1.1.3.4 Zelldifferenzierung, Antiproliferation und Apoptose 8
1.2 Cholinerge Rezeptoren im ZNS 9
1.2.1 Zentrales cholinerges System 9
1.2.2 Muscarinrezeptor-Subtypen 10
1.2.3 Lokalisation von Muscarinrezeptor-Subtypen im ZNS 11
1.2.4 Signaltransduktionsmechanismen von Muscarinrezeptoren 12
1.2.5 Zentrale Wirkungen von Muscarinrezeptoren 13
1.3 Zentrale Mechanismen der Osmoregulation 14
1.3.1 Zentrale Osmorezeptoren 15
1.3.2 Icv-Injektion hypertoner Kochsalzlösung als osmotischer Stimulus 15
1.3.3 Vasopressin-Freisetzung 16
1.3.4 Trinkantwort 16
1.3.5 Die Bedeutung des zentralen RAS für die Osmoregulation 17
1.3.6 Beteiligung zentraler cholinerger Mechanismen an der Osmoregulation 19
1.4 Gemeinsamkeiten des zentralen angiotensinergen und des zentralen cholinergen
Systems bei der Osmoregulation 20
1.4.1 Wirkungen nach zentraler Gabe des Agonisten 20
1.4.2 Co-Lokalisation von Rezeptoren 21
1.5 Fragestellung 22
2 MATERIAL UND METHODEN 23
2.1 Versuchstiere und deren Haltung 23
2.2 Pharmaka und Chemikalien 23
2.2.1 Ansatz der Lösungen 24
2 1 Methoden 26
2.3.1 Arterieller Katheter 26
2.3.2 Intracerebroventrikuläre (icv-) Katheter 28
2.3.4 Applikationstechnik der icv-Injektion 30
2.3.5 Messung von Vasopressin im Plasma 30
2.4 Statistische Verfahren 30
3 VERSUCHSPROTOKOLLE UND ERGEBNISSE 31
3.1 Einfluss einer periventrikulären Angiotensinrezeptorblockade auf die durch ANG
II (icv)-induzierte AVP-Freisetzung 31
3.1.1 Einfluss einer periventrikulären ATi-Rezeptorblockade auf die durch ANG II (icv)-
induzierte AVP-Freisetzung 32
3.1.2 Einfluss einer periventrikulären AT2-Rezeptorblockade auf die durch ANG II (icv)-
induzierte AVP-Freisetzung 33
3.1.3 Einfluss einer icv-Vorbehandlung mit Losartan und PD 123177 auf die basale AVP-
Freisetzung 34
3.2 Einfluss einer periventrikulären Angiotensin-Rezeptorblockade auf die durch
hypertone Kochsalzlösung (icv) induzierte AVP-Freisetzung 35
3.2.1 Einfluss einer icv-applizierten hypertonen Kochsalzlösung auf die AVP-Freisetzung
(Dosis-Wirkungs-Kurve) 35
3.2.2 Einfluss einer periventrikulären ATi-Rezeptorblockade auf die AVP-Freisetzung nach
icv-Gabe von hypertoner Kochsalzlösung 36
3.2.3 Einfluss einer periventrikulären AT2-Rezeptorblockade auf die AVP-Freisetzung nach
icv-Gabe von hypertoner Kochsalzlösung 37
3.3 Einfluss einer Muscarinrezeptorblockade auf die durch hypertone Kochsalzlösung
(icv) induzierte AVP-Freisetzung 39
3.3.1 Einfluss einer icv-Gabe von Atropin, Pirenzepin, Methoctramin, p-F-
Hexahydrosiladifenidol und Tropicamid auf den basalen AVP-Plasmaspiegel 39
3.3.2 Einfluss der nicht-selektiven periventrikulären Muscarinrezeptorblockade auf die
AVP-Freisetzung nach icv-Gabe hypertoner Kochsalzlösung 40
3.3.3 Einfluss der periventrikulären Blockade von vier Muscarinrezeptor-Subtypen auf die
durch hypertone Kochsalzlösung (icv) induzierte AVP-Freisetzung 41
4 DISKUSSION 43
4.1 Beteiligung periventrikulärer ATi- und ATVRczeptoren an der durch ANG II
(icv)-induzierten AVP-Freisetzung 43
4.2 Beteiligung von AT,- und AT2- sowie Muscarin-Rezeptoren an der AVP-
Freisetzung nach icv-Gabe hypertoner Kochsalzlösung 46
4.3 Subrypisierung des beteiligten Muscarinrezeptors an der AVP-Freisetzung nach
icv-Gabe hypertoner Kochsalzlösung 49
5 ZUSAMMENFASSUNG 52
6 LITERATURVERZEICHNIS 54
7 ANHANG 77
7.1 Glossar 77
7.2 Abbildungen und Tabellen 79
7.3 Danksagung 81
7.4 Lebenslauf Mathias Böser 82
79
7.2 Abbildungen und Tabellen
Abb. 1: Signaltransduktion des ATI-Rezeptors 5
Abb. 2: Signaltransduktion von Muscarinrezeptorsubtypen (hier Mj und M2) 13
Abb. 3: Einfluss einer periventrikulären ATI-Rezeptorblockade mit Losartan (Los) (icv) auf
die durch ANG II (10 pmol icv) induzierte AVP-Freisetzung ins Plasma bei der Ratte.
Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM, n = 6-8. **p 0,01 vs. 0,15 M NaCl +ANG II 32
Abb. 4: Einfluss einer periventrikulären AT2-Rezeptorblockade mit PD 123177 (PD) (icv)
auf die durch ANG II (10 pmol icv) induzierte AVP-Freisetzung ins Plasma bei der Ratte.
Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM, n = 9-10. *p 0,05 vs. 0,15 M NaCl + ANG II 33
Abb. 5: Einfluss einer icv Injektion hypertoner Kochsalzlösung (0,2, 0,3 und 0,6 M) auf die
Plasma-AVP-Spiegel der Ratte. Die Kontrollgruppe wurde mit isotoner (0,15 M) NaCl
behandelt. Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM, n = 5-10. Basal: basale AVP-Spiegel ohne
jegliche Vorbehandlung (n=10). *p 0,05, **p 0,01, ***p 0,001 vs. isotone NaCl 35
Abb. 6: Einfluss von periventrikulärer ATi-Rezeptorblockade mit Losartan (Los) in einer
Dosis von 10 nmol auf die durch icv-Injektionen hypertoner Kochsalzlösung (0,2, 0,3 und
0,6 M) induzierten Plasma-AVP-Spiegel bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte +
SEM, n = 7-9. **p 0,01 vs. mit hypertoner NaCl (0,2 bzw. 0,3 M) behandelte Tiere 36
Abb. 7: Einfluss von periventrikulärer AT2-Rezeptorblockade mit PD 123177 (PD) in einer
Dosis von 1 nmol auf die durch icv-Injektionen hypertoner Kochsalzlösung (0,2, 0,3 und
0,6 M) induzierten Plasma-AVP-Spiegel bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte +
SEM, n = 8-10. *p 0,05, **p 0,01 vs. mit hypertoner NaCl (0,2 bzw. 0,6 M) behandelte
Tiere 37
Abb. 8: Einfluss einer zentralen Vorbehandlung mit dem hochaffinen nicht-selektiven
Muscarinrezeptorantagonisten Atropin (Atr) in einer Dosis von 15 nmol auf die durch
hypertone Kochsalzlösung (icv) induzierte AVP-Freisetzung bei der Ratte. Gezeigt werden
Mittelwerte ± SEM, n = 8-10. *p 0,05, ***p 0,001 vs. mit hypertoner NaCl (0,3 bzw. 0,6
M) behandelte Tiere 40
Abb. 9: Einfluss der zentralen Vorbehandlung mit den Antagonisten der
Muscarinrezeptorsubtypen M, = Pirenzepin (Pir), M2 = Methoctramin (Meth), M3 = p-F-
Hexahydrosiladifenidol (HHSiD) und M4 = Tropicamid (Trop) in einer Dosis von jeweils
15 nmol auf die durch 0,6 M NaCl (icv) induzierte AVP-Ausschüttung bei der Ratte.
Gezeigt werden Mittelwerte + SEM, n = 6-11. *p 0,05 vs. mit 0,6 M NaCl behandelte
Tiere. Veh = Vehikel (isotone NaCl) 41
Abb. 10: Mögliche Mechanismen der AVP-Freisetzung nach hyperosmotischer Stimulation48
Abb. 11: Beteiligung angiotensinerger und muscarinerger Rezeptoren an der AVP-Frei¬
setzung nach hyperosmotischer Stimulation 51
80
Tab. 1: Angiotensinrezeptortypen und -subtypen im Gehirn 4
Tab. 2: Nomenklatur der Muscarinrezeptor-Subtypen 11
Tab. 3: Die Koordinaten für die Implantation der icv-Kanüle in den linken lateralen
Hirnventrikel (Paxinos und Watson 1982) 29
Tab. 4: Einfluss der icv-Injektion von Losartan bzw. PD 123177 auf die basale AVP-
Freisetzung bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte + SEM. Es wurden keine
signifikanten Unterschiede gefunden 34
Tab. 5: Einfluss der icv-Injektion muscarinerger Antagonisten auf die basale AVP-
Freiseteung bei der Ratte. Gezeigt werden Mittelwerte ± SEM. Es zeigten sich keine
signifikanten Unterschiede 39 |
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