Optimierung der Wachstumsbedingungen humaner Osteoblasten in vitro:
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2005
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| adam_text | B. M. Kotte Optimierung der Wachstumsbedingunqen humaner Osteoblasten in vitro
Inhaltsverzeichnis Seite
1. Einleitung 1
2. Grundlagen 3
2.1 Knochengewebe 3
2.1.1 Allgemein 3
2.1.2 Zellarten 4
2.1.3 Aufbau 5
2.1.4 Knochenentwicklung (Ossifikation) 7
2.2 Knochenersatz 10
2.2.1 Allgemein 10
2.2.2 Eigenschaften 11
2.2.3 Autogene Gewebe 12
2.2.4 Allogene Gewebe 14
2.2.5 Xenogene Gewebe 14
2.2.6 Metalle 15
2.2.7 Nichtmetalle 19
2.3 Tissue Engineering 22
2.4 Tissue Engineering von Knochengewebe 28
2.4.1 Allgemein 28
2.4.2 Unfraktioniertes frisches Knochenmark 29
2.4.3 Mesenchymale Stammzellen 31
2.4.4 Differenzierte Osteoblasten und Chondrozyten 32
2.4.5 Genetisch modifizierte Zellen 34
2.4.6 Zeil und Matrix Interaktion 34
2.5 Bone Morphogenetic Proteins 36
2.6 Funktionelle Gewebeentwicklung 41
3. Material und Methode
3.1 Zellpräparation 43
3.2 Meßmethoden 45
3.2.1 Casyl Modell TT 45
3.2.2 Messung Alkalische Phosphatase 46
B. M. Kotte Optimierung der Wachstumsbedingungen humaner Osteoblasten in vitro
3.2.3 Messung Osteokalzin 47
3.2.4 LSC 47
3.3 Perfusionskultursystem 50
3.4 Kulturansätze 52
3.4.1 Gewebekultur 52
3.4.2 Verschiedener Zelldichten im Monolayer 52
3.4.3 Vermehrungspotential im Monolayer bei gleicher Zelldichte 52
3.4.4 Mediumzusatz Ascorbinsäure/ß Glycerolphosphat und/oder Dexamethason
3.4.5 Perfusionskulturen 53
3.4.6 LSC/Chamberslideskulturen 53
4. Ergebnisse
4.1 Vermehrungspotentiale in der Gewebekultur 54
4.2 Wachstumsverhalten bei Aussaatdichten von unter 8 mg Knochen/cm2 56
4.3 Aussaat von verschiedenen Zelldichten im Monolayer 57
4.4 Vermehrungspotentiale im Monolayer 60
4.5 Mediumzusatz Ascorbinsäure/ß Glycerolphosphat und/oder Dexamethason 64
4.6 Perfusionskulturen 66
4.7 Laser Scanning Cytometrie 68
5. Diskussion 71
5.1 Vermehrungspotentiale 72
5.1.1 Alterabhängigkeit
5.2 Aussaatdichten 74
5.3 Alkalische Phosphatase 74
5.4 Medienzusätze 75
5.5 Perfusionskulturen 77
5.6 Laser Scanning Cytometrie 80
6. Zusammenfassung 82
7. Anhang mit Wertetabellen 84
8. Literatur 92
9. Lebenslauf, Selbstständigkeitserklärung, Danksagung 104
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