Die Wirkung synthetischer Lipopeptide auf menschliche Thrombozyten und verschiedene Säugerzelllinien:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2005
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Seite
1 Abkürzungen 5
2 Einleitung 7
2.1 Bakterielle Zellwand und Zellmembran 7
2.1.1 Entdeckung der Bestandteile 7
2.1.2 Aufbau 8
2.1.3 Lipopolysaccharid 9
2.1.4 Lipoprotein 10
2.1.5 Toll like Rezeptoren 12
2.2 Synthetische Lipopeptide 18
2.2.1 Struktur 18
2.2.2 Herstellung 19
2.2.3 Wirkung synthetischer Lipopeptide auf Leukozyten,
Leukozytenzelllinien und andere Zellarten 19
2.3 Zusammensetzung und Funktionen der zellulären Bestandteile des Blutes 24
2.3.1 Thrombozyten 25
2.3.2 Signaltransduktion in Thrombozyten 26
2.3.3 Andere Blutzellen und Zelllinien 29
3 Hypothesen und Zielsetzung 34
4 Materialien 36
5 Methoden 40
5.1 Photoaffinitätsmarkierung 40
5.2 Gelelektrophorese und Autoradiographie markierter Membranproteine 40
5.3 Gelelektrophorese, Immunoblotting und Detektion
tyrosinphosphorylierter Proteine 41
5.4 Proteinbestimmung 41
5.5 Isolierung von Thrombozyten 42
5.6 Thrombozytenaggregationsmessung 42
5.7 Bestimmung der induzierten Serotoninauschüttung von Thrombozyten 42
5.8 Bestimmung der freien zytosolischen Calciumkonzentration [Ca2+]cyt
in Thrombozyten 43
5.9 Herstellung der Thrombozytenmembranen 44
5.10 Herstellung von Zelllysäten 44
5.11 Metabolische Markierung 44
5.12 Herstellung von Antiseren gegen Phosphotyrosin und Affinitätsreinigung 45
5.13 Zellkultivierung und differenzierung 46
5.14 Reproduzierbarkeit 47
6 Ergebnisse 48
6.1 Menschliche Thrombozyten 48
6.1.1 Effekt der Lipopeptide auf die Aggregation 48
6.1.2 Effekt der Lipopeptide auf die 3H Serotoninausschüttung 51
6.1.3 Wirkung der Lipopeptide auf die freie zytosolische
Calciumkonzentration [Ca2+]cyt in Thrombozyten 54
6.1.4 Wirkung der Lipopeptide auf die Phosphorylierung von Proteinen an
Tyrosinresten 55
6.1.5 Wirkung von PamsCys, PamaCysPEG und CysSer(Lys)4 auf
Thrombozyten 59
6.1.6 Wirkung von Genistein auf die Agonist induzierten Effekte an
Thrombozyten 59
6.1.7 Wirkung der Prostazyklinrezeptor Agonisten Cicaprost und Iloprost
auf die Agonist induzierten Effekte auf Thrombozyten 62
6.1.8 Wirkung von EGTA auf die Agonist induzierten Effekte 66
6.1.9 Wirkung von BAPTA AM auf die Agonist induzierten Effekte 67
6.1.10 Wirkung von Natriumnitroprussid und Sin 1 auf die Agonist
induzierten Effekte 71
6.1.11 Wirkung weiterer Substanzen auf die Agonist induzierten Effekte 75
6.1.12 Metabolische Markierung von Thrombozyten 78
6.1.13 Vergleich des polyklonalen mit dem monoklonalen Antikörper 79
6.1.14 Aktivierung von G Proteinen 80
6.2 Leukozytenkulturen 85
7 Diskussion 92
7.1 Thrombozytenaktivierung durch Lipopeptide 92
7.2 Spezifität 92
7.3 Mögliche Mechanismen der Lipopeptid induzierten
Thrombozytenaktivierung 93
7.4 Mögliche pathophysiologische Relevanz der Lipopeptid induzierten
Thrombozytenaktivierung 96
7.5 Leukozytenaktivierung durch Lipopeptide 97
8 Zusammenfassung 99
9 Literatur 102
Lebenslauf
Danksagung
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