Molekulare Mechanismen Interferon-g [Interferon-gamma] induzierter Apoptose in humanen neuroendokrinen Tumorzellen:
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| Format: | Abschlussarbeit Mikrofilm Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2004
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1
EINLEITUNG
7
1.1
NEUROENDOKRINE
TUMOREN
7
1.1.1
KLINIK
7
1.1.2
KLASSIFIKATION
8
1.1.3
DIAGNOSTIK
10
1.1.4
THERAPIE
11
1.2
INTERFERON-Y
(IFN-Y)
12
1.2.1
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
UND
KLINISCHE
ANWENDUNG
12
1.2.2
MOLEKULARER
WIRKMECHANISMUS
VON
INTERFERONEN
13
1.2.3
IFN-Y
UND
APOPTOSE
14
1.3
APOPTOSE
15
1.3.1
DEFINITION
UND
BIOLOGISCHE
FUNKTION
15
1.3.2
ABLAUF
DES
APOPTOSEPROZESSES
16
1.3.3
AUSLOESER
FUER
APOPTOSE
16
1.4
ZIEL
18
2
MATERIAL
19
2.1
ZELLINIEN
19
2.2
ANTIKOERPER
19
2.3
CHEMIKALIEN
20
3
METHODEN
21
3.1
ZELLKULTUR
21
3.2
ZELL-WACHSTUMSASSAYS
21
3.2.1
SUBSTRATABHAENGIGES
WACHSTUM
21
3.2.2
SUBSTRATUNABHAENGIGES
WACHSTUM
/
KOLONIEBILDUNGSASSAYS
(HTCA)
22
3.3
REPORTERGENASSAYS
22
3.4
RT-PCR
ANALYSE
23
3.4.1
RT-PCR
(REVERSE
TRANSKRIPTION-POLYMERASE-KETTENREAKTION)
23
3.5
WESTERN
BLOT
UND
IMMUNPRAEZIPITATION
26
3.5.1
BEHANDLUNG
DER
ZELLEN
26
3.5.2
HERSTELLUNG
VON
ZELLYSAETEN
26
3.5.3
IMMUNPRAEZIPITATION
26
3.5.4
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
27
3.5.5
WESTERN
BLOT
28
3.5.6
IMMUNODETEKTION
28
3.6
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
29
3.6.1
PRAEPARATION
VON
ZELLYSATEN
29
3.6.2
FACS-ANALYSE
29
3.7
DNA
FRAGMENTIERUNG
30
3.7.1
DNA-ISOLIERUNG
30
3.7.2
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
30
3.8
STATISTISCHE
ANALYSE
30
4
ERGEBNISSE
31
4.1
HUMANE
GEP-NET-ZELLEN
EXPRIMIEREN
FUNKTIONELL
INTAKTE
IFN-Y-REZEPTOREN
31
4.1.1
NACHWEIS
DER
EXPRESSION
DES
IFN-Y
REZEPTORS
MITTELS
RT-PCR
31
4.1.2
IFN-Y
AKTIVIERT
IN
HUMANEN
GEP-NETS
JANUSKINASEN
UND
STAT
TRANSKRIPTIONSFAKTOREN
32
4.1.3
IFN-Y
STIMULIERT
IN
QGP
1
-ZELLEN
DIE
AKTIVITAET
EINES
GAS
REPORTERGENKONSTRUKTS
34
4.2
IFN-Y
INHIBIERT
DAS
WACHSTUM
VON
HUMANEN
NET-ZELLEN
DURCH
INDUKTION
VON
APOPTOSE
35
4.2.1
IFN-Y
INHIBIERT
DAS
WACHSTUM
VON
GEP-NETS
35
4.2.2
IFN-Y
REDUZIERT
DIE
KLONOGENITAET
VON
GEP-NET
ZELLEN
36
4.2.3
IFN-Y
BEHANDLUNG
VERAENDERT
DIE
ZELLZYKLUSVERTEILUNG
VON
QGP
ZELLEN
36
4.2.4
IFN-Y
BEHANDLUNG
INDUZIERT
APOPTOSE
38
4.2.5
IFN-Y
BEHANDLUNG
FUEHRT
ZUR
SPALTUNG
VON
PARP
39
4.2.6
EXPRESSION
UND
AKTIVIERUNG
VON
CASPASE-3
40
4.2.7
CASPASE-1-INDUKTION
41
4.2.8
IFN-Y
INDUZIERT
IN
QGP-1
ZELLEN
IRF-1
42
5
DISKUSSION
44
6
ZUSAMMENFASSUNG
50
4
7
LEBENSLAUF
51
8
DANKSAGUNG
52
9
LITERATUR
53
5 |
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